Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Біуретова реакція на пептидні зв’язки
Принцип методу. Амінокислоти, що здатні утворювати не менше двох пептидних зв’язків (—СО—NH—), у лужному розчині в присутності сульфату міді (ІІ) утворюють комплекси з атомами міді, котрі забарвлені в фіолетовий колір. Уперше реакція утворення таких комплексних сполук міді була проведена для біурету, тому вона й названа біуретовою. Біурет, який може бути отриманий при нагріванні сечовини до температури 1800 С, не є амінокислотою, але має два пептидні зв’язки
нагрівання 2H2N—CO—NH2 H2N—CO—NH—CO—NH2 +
+ NH3.
У лужному середовищі біурет зазнає енолізації за схемою
H2N—CO—NH—CO—NH2 HN==C—NH—C==NH .
ОН ОН
Дві молекули енольної форми біурету взаємодіють із гідроксидом міді (ІІ) та утворюють комплекс, у якому координаційні зв’язки утворені за рахунок електронних пар атомів азоту імінних груп. Подібний комплекс із міддю можуть утворювати деякі амінокислоти, в яких пептидні зв’язки виникають за рахунок карбоксильної та амінної груп. Прикладом такої амінокислоти може бути аспарагін. Гідроксид міді (ІІ) для проведення біуретової реакції отримують, як правило, в результаті реакції взаємодії сульфату міді (ІІ) з гідроксидом натрію (або калію)
CuSO4 + 2NaOH Cu(OH)2 + Na2SO4 .
Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, крапельниця, скляна паличка, 1 %-ий водний розчин аспарагіну, 10 %-ий розчин гідроксиду натрію (або калію), 10 %-ий розчин сульфату міді (ІІ). Хід роботи . В пробірку з 3 мл розчину аспарагіну додати 1 мл розчину гідроксиду натрію (або калію), 1-2 краплі розчину сульфату міді (ІІ) та вміст перемішати. Вміст пробірки при цьому забарвлюється в синьо-фіолетовий колір.
Ксантопротеїнова реакція Принцип методу. В ароматичних амінокислотах, які містять бензольні кільця (тирозин, триптофан, фенілаланін), під дією азотної кислоти відбувається реакція нітрування бензольного кільця з утворенням забарвленої в жовтий колір нітросполуки. У реакції гідроксиду натрію з хіноїдною формою динітротирозину утворюється натрієва сіль динітротирозину, що має оранжевий колір. Обладнання та реактиви : Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, спиртівка, пробіркотримач, 1 %-ий водний розчин тирозину, концентрована азотна кислота, 10 %-ий розчин гідроксиду натрію. Хід роботи . В пробірку внести 3 мл розчину тирозину та 1 мл концентрованої азотної кислоти. Суміш обережно нагріти в полум’ї спиртівки до появи жовтого забарвлення. Після охолодження в пробірку додати розчину гідроксиду натрію до появи оранжевого забарвлення. |
Последнее изменение этой страницы: 2019-03-31; Просмотров: 306; Нарушение авторского права страницы