Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Цель – изучение биологических свойств чистой культуры бактерий ⇐ ПредыдущаяСтр 3 из 3
Биохимическая активность Визуально ТАВК
По Граму Ориентиров РА Подвижность Чистая культура гл лак мн мл сах на МПА или а) углеводолитическая актив-ть ср.Ресселя
МПБ МПБ МПБ МПС индо сероводород лак желатин а)протеолитическая Серологические свойства ТАВК
Ориентировочная реакция агглютинации на стекле Антитела Т, А, В. 1/50 1/100 1/120 1/400 1/800 1/1600… КК КС К – контроль Развернутая (пробирочная) реакция агглютинация Фагодиагностика
а) Типирование бактериофагами
В Т
В жидком МПБ
А На плотном МПА Т, А, В – б/фаги К – физ.раствор
б) Чувствительность к поливалентному (Т, А, В) на плотной или жидкой среде Выполняются также, но со смесью б/фагов, без их разделения. Дополнение к 3 а Свежевыделенные (идентифицированные) брюшнотифозные бактерии содержат Vi – антигены, к ним обнаружены 24 типа Vi – фага. Соответственно существует 24 типа брюшнотифозных Vi – штаммов. Кроме того, существует Vi – фаг I типа – универсальный для всех брюшнотифозных бактерий. Методика фаготипирования по Vi - специфичности 1. Чистую культуру отсеять на МПБ. Выращивать 4 дня при + 37оС. 2. 25 капель 4-х суточной культуры раздельно раскапать на чашки с МПА. Подсушить. 3. К каждой подсушенной капле добавить один из 24-х Vi –бактериофагов, а к 25-й обязательно Vi – фаг универсального типа. Подсушить. 4. Поместить в термостат при + 37оС на 2 часа, затем на 8-10 часов на холод (+ 4оС) и опять в термостат на 4 часа при + 37оС. 5. Учет результатов. Лизис культуры Vi – фагом I типа свидетельствует о её принадлежности к брюшнотифозным микробам. Лизис одним из 24 типов фага указывает на принадлежность штамма к этому типу моно- Vi – фага.
Чувствительность к лекарственным веществам антибиотикам
Метод лекарственных 1/5 1/10 1/20 1/40 1/80 Контроль Контроль дисков (диффузионный Метод серийных разведений культуры антибиотика на МПА) Зона отсутствия роста - Среда без помутнения говорит о чувствительности, с ним – у чувствительных к-р, об её отсутствии. наличие его – у устойчивых.
5. Заключение об идентификации микробного вида
На основании изученных свойств: морфологических, структурных, тинкторальных, подвижности, биохимических (углеводо- и протеолитических) серологических (антигенный состав), чувствительности к бактериофагу – делаем заключение о виде возбудителя – идентифицируем микробный вид фаготип культур. На основании чувствительности к лекарственным веществам и бактериофагам, даем заключение, чем надо лечить больного.
Приложение № 2 Бактериологический метод. Выделение чистой культуры при брюшном тифе из кала (копрокультура)
Метод отличается от предыдущего (гемокультура) только начальным этапом – подготовкой и характером материала и исключением накопления культуры. Цель – получение изолированной колонии. Посев (рассев) на ДДС По Граму Т А В К + 37оС 18-24 часа
Подвижность Исследуемый Ориентировочная РА Висмут – сульфит агар, Материал с АТ Т, А, В среды Левина, Плоскирева, (кал в физ.р-ре) К – контроль Эндо и т.д.
Дальнейшее изучение изолированных колоний, накопление чистой культуры и её исследование идёт по типу гемокультуры. Приложение № 5. Приложение № 3 Ускоренный бактериологический метод исследования крови при тифо-паратифозных инфекциях (Метод профессора Блинкина)
Метод основан на применении 2-х комплексов комбинированных питательных сред для выделения и идентификации культур, за счет чего этапы анализа сокращаются. I комплекс С 3-х сторон от пробирки индикаторные полоски на индол, аммиак, H2S
МПА с глюкозой МПА с лактозой и индикатором и индикатором
МПБ с газоулавливающим поплавком
II комплекс
МПА с мальтозой МПА с сахарозой и индикатором и индикатором
Среда Раппопорт с маннитом и поплавком-газоулавливателем
Изучение свойств культуры:
Визуальный контроль По Граму Подвижность Т А В К
Биохимическая, серологическая (ориентировочная реакция агглютинации), чувствительность к бактериофагу совмещены.
Приложение № 4 Схемы различных вариантов реакции агглютинации Видаля
Разведения сыворотки | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Диагностикум | 1 : 100 | 1 : 200 | 1 : 400 | 1 : 800 | 1 : 100 | 1 : 200 | 1 : 400 | 1 : 800 | 1 : 100 | 1 : 200 | 1 : 400 | 1 : 800 | ||||||||||||||||||||
О-монодиагностикум сальмонелл брюшного тифа | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | - | - | - | ++ | + | - | - | ||||||||||||||||||||
Н-монодиагностикум сальмонелл брюшного тифа | +++ | +++ | ++ | - | +++ | +++ | + | - | +++ | +++ | + | - | ||||||||||||||||||||
ОН-диагностикум сальмонелл парафита А | ++ | - | - | - | + | - | - | - | +++ | +++ | - | - | ||||||||||||||||||||
ОН-диагностикум сальмонелл парафита В | + | - | - | - | + | - | - | - | +++ | ++ | - | - |
Приложение № 5
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-10; Просмотров: 269; Нарушение авторского права страницы