Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ ПОСЕВА ИСПРАЖНЕНИЙ И УСЛОВИЯ ИХ ИНКУБИРОВАНИЯ

Питательная среда Выделяемые микроорганизмы Условия инкубации
Эндо Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia spp. и другиеEnterobacteriaceae Сутки при 37 оС и сутки при комнатной температуре (для обнаружения Yersinia spp.)
Плоскирева Salmonella spp., Shigella spp., V.parahaemolyticus 2 суток при 37 оС с просмотром через 24 часа
Селенитовый бульон или Мюллера-Кауфмана или магниевая Salmonella spp. 18-20 часов при 37 оС
Фосфатно--буферный раствор (ФБР) или забуференная пептонная вода или среда Серова или буферно-казеиново-дрожжевая среда Y.pseudotubercu­losis, Y.enterocolitica До 15 суток и более в холодильнике при 6-10 оС
Элективные питательные среды с антибиотиками (Skirrow или Karmali или Blaser или др.) Campylobacter spp. 2 суток при 42,5 оС в атмосфере: 5% O2; 10% CO2; 85% N
Щелочная пептонная вода и щелочной МПА или СЭДХ или TCBS V.cholerae 12-18 при 37 оС
Щелочной агар и среда Плоскирева и СЭДХ или TCBS V.parahaemolyticus 12-18 при 37 оС

ПОСЕВ ФЕКАЛИЙ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ НА ДИСБАКТЕРИОЗ [13]

Среды Разведения Микроорганизмы
Мюллера, селенитовая, магниевая Без разведения Патогенные энтеробактерии
Плоскирева, Левина с синтомицином 10-1
Печеночная среда Блаурока 10-3-10-10 Бифидобактерии
Агар Хенеля (анаэробные условия) 10-3-10-7 Бактероиды
МРС-4 (анаэробные условия) 10-3-10-7 Лактобациллы и стрептококки
Среда Калины или ДИФ-3 10-3-10-5 - взрослые 10-5-10-7 - дети Энтерококки
Желточно-солевой агар 10-3-10-5 Стафилококки
Среда Сабуро 10-3-10-5 Грибы рода Кандида
Среда Левина 10-3-10-5 Энтеробактерии
Среда Плоскирева 10-3
Среда Эндо 10-5
Малахитовый агар 10-1, 10-3, 10-5, 10-7 Синегнойная палочка
Кровяной агар 10-5, 10-7 Гемолизирующие культуры
Среда Вильсона 10-3, 10-5, 10-7 Клостридии

 

Для постановки диагноза "острая кишечная инфекция, обусловленная условно-патогенными микроорганизмами" необходимо учитывать следующие критерии:

отсутствие специфических признаков заболевания, обусловленного патогенными микроорганизмами;

обнаружение условно-патогенных микроорганизмов в испражнениях в количестве более 105 кл./г;

повторное обнаружение того же микроорганизма в возрастающей концентрации;

исчезновение условно-патогенного микроорганизма из фекалий или снижение его численности в результате проводимой терапии;

нарастание титра антител к данному условно-патогенному микроорганизму более чем в 4 раза при одновременном присутствии его в фекалиях в количестве более 105 кл./г

 

Диагностика дисбактериоза кишечника осуществляется на основании оценки качественных и количественных сдвигов в составе микрофлоры толстого кишечника (табл. 19). Численность отдельных групп микроорганизмов в составе кишечной микрофлоры подвержена значительным колебаниям в зависимости от возраста, пола, характера питания, физического состояния организма и многих других факторов. Следует отметить, что значение имеет не только состояние микробиоциноза кишечника в данный конкретный момент времени, но и динамика происходящих в нем изменений. Поэтому для более точной оценки состояния кишечной микрофлоры исследования необходимо повторить несколько раз. На достоверность полученного результата сильно влияет соблюдение сроков транспортировки материала. В ряде случаев, когда соблюдение этих сроков нереально, следует либо отказаться от определения численности неспорообразующих бактерий, либо с осторожностью подходить к информации о снижении их количества.

На дисбактериоз толстого кишечника указывают:

снижение количество бифидобактерий до уровня менее 10-8 кл./г;

увеличение доли атипичных эшерихий до более чем 10%;

появление гемолитической микрофлоры;

увеличение числа условно-патогенных грамотрицательных палочек или S.aureus (более 104 кл./г);

увеличение числа грибов рода Кандида (более 103 в кл./г);

увеличение до более 2·108 кл./г или снижение до 106 кл./г количества E.coli

Согласно схемы, предложенной Н.М.Грачевым и соавт. [13], различают 4 степени выраженности дисбактериоза:

 

1 степень Латентная, компенсированная форма. Характеризуется незначительными изменениями в аэробной части микробиоценоза (увеличение или уменьшение количества кишечных палочек). Бифидо- и лактофлора неизменны. Кишечные дисфункции, как правило, не регистрируются.
2 степень Субкомпенсированная форма. На фоне незначительного снижения количественного содержания бифидобактерий выявляются количественные и качественные изменения кишечной палочки или других условно-патогенных микроорганизмов. Пограничное состояние. Обследуемый может быть отнесен к группе риска. Назначение бактерийных препаратов целесообразно даже при отсутствии клинических проявлений. Если отмечается на фоне терапии, то свидетельствует о восстановлении микрофлоры.
3 степень Значительное снижение уровня бифидофлоры (105-107 кл./г) в сочетании со снижением лактофлоры и низким содержанием кишечных палочек. Как правило, сопровождаются кишечными дисфункциями. Необходимо незамедлительное назначение бифидумбактерина, лактобактерина или бификола.
4 степень Отсутствие бифидофлоры, значительное уменьшение лактофлоры и изменение количества кишечной палочки (снижение или увеличение), возрастание численности как облигатных, так и факультативных и не характерных для здорового человека видов условно-патогенных бактерий. Выраженные клинические проявления, вплоть до перфоративного язвенно-некротического энтероколита. Обязательным является назначение бифидумбактерина.

 

А.В.Знаменский и соавт. [19] предложили более простую классификацию:

1 степень нарастание числа УПМ при высоком уровне бифидобактерий.
2 степень бифидобактерии на нижней границе нормы (108 кл./г, нарастание числа УПМ, дисфункции кишечника.
3 степень уменьшение количества (менее 107 кл./г) бифидобактерий сочетается с изменениями в аэробной микрофлоре.
Декомпенсированный дисбактериоз  
   

 

 

Таблица 19

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА У ЗДОРОВЫХ ВЗРОСЛЫХ ЛЮДЕЙ И ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ [13]

Группа микроорганизмов Количество микроорганизмов в 1 г фекалий
у взрослых у детей
Бифидобактерии 108-1010 109-1010
Бактероиды 108 -1010 < 108 **
Молочнокислые палочки 106-107 106-108
Молочнокислый стрептококк 106-107 107-108
Энтерококки. 105-106 106-107
Эшерихии:    
с нормальной ферментативной активностью 107-108 107-108
со сниженной ферментативной активностью 106-107 106-107
лактозонегативные 106-107* 106-107*
Микробы рода Proteus < 104* < 103**
Другие условно патогенные энтеробактерии < 104* < 104*
Стафилококки (сапрофитический, эпидермальный) < 104* 104-106
Дрожжеподобные грибы < 104* < 104*
Спороносные анаэробные палочки (клостридии) < 105* -
Примечания: * могут обнаруживаться у части практически здоровых людей; ** обнаруживаются у незначитеельной части детей старше 3-х месяцев жизни.

 

ДИСБИОТИЧЕСКИЕ СОСТОЯНИЯ КИШЕЧНИКА И ВЛАГАЛИЩА (ИНБИОФЛОР, ФЕМОФЛОР, МИКРОБИОЦЕНОЗ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА)

Название  
Общая оценка естественной микрофлоры организма
Исследование на биоценоз влагалища и определение чувствительности к антимикробным и антигрибковым препаратам (с микроскопией нативного препарата, окрашенного по Граму)  
Дисбактериоз кишечника  
456-Ф Дисбактериоз кишечника с определением чувствительности к бактериофагам  
Исследование микробиоценоза урогенитального тракта (ИНБИОФЛОР)
Бактериальный вагиноз  
ИНБИОФЛОР- комплексное исследование микрофлоры урогенитального тракта  
Скрининг микрофлоры (13+КВМ)
Скрининг микрофлоры урогенитального тракта (13+КВМ*), соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта  
Фемофлор (9+КВМ)
ФЕМОФЛОР-9+КВМ*, соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта  
Фемофлор (17+КВМ)
ФЕМОФЛОР-17+КВМ*, соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта  
Лактобактерии
345УРО Лактобактерии, определение ДНК (Lactobаcillus spp., DNA) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта  

 

Диско-диффузионный метод оценки антибиотикочувствительности

 

Принцип метода


Принцип диско-диффузионного метода (по Keurby-Bauer) основан на феномене ингибиции антибиотиком поверхностного, видимого роста микроорганизмов на плотной (агаровой) питательной среде. Градиент концентрации антибиотика в питательной среде создается в результате его диффузии из носителя (картонного диска). Диск с антибиотиком помещается на поверхность питательной среды немедленно после посева (инокуляции) культуры исследуемого микроорганизма. При этом практически одновременно начинаются два процесса: диффузия антибиотика из диска и рост микроорганизмов на поверхности среды. С практической точки зрения важно то, что от диска к периферии происходит движение “фронта” концентрации антибиотика, равной его МПК в отношении исследуемого микроорганизма.

Особенностью роста микроорганизмов на питательных средах является наличие лаг-фазы – периода времени, в течение которого происходит адаптация культуры к новой среде. По окончании лаг-фазы рост культуры исследуемого микроорганизма начинается в тех областях, где концентрация антибиотика еще не превысила минимальную подавляющую.

Учитывая закономерности зонообразования очевидно, что для получения с помощью диско-диффузионного метода воспроизводимых результатов необходима стандартизация всех этапов исследования.

 

 

  • Приготовление и состав питательной среды
  • Приготовление суспензии исследуемого микроорганизма заданной концентрации
  • Минимизация интервала времени между инокуляцией микроорганизма и нанесения на поверхность среды дисков.
  • Соблюдение температурного и временного режима инкубации.

Последнее изменение этой страницы: 2016-03-17; Просмотров: 96; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2017 год. Все права принадлежат их авторам! (0.081 с.) Главная | Обратная связь