Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах.

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 10Следующая ⇒

Сукцинатдегидрогеназы (СДГ) – единственный фермент цикла трикарбоновых кислот, прочно связанный с внутренней мембраной митохондрий (комплекс II). Коферментом СДГ является ФАД, принимающий два атома водорода от молекулы сукцината и переносящий их непосредственно на коэнзим Q (убихинон) в дыхательной цепи митохондрий. ФАД прочно связан с молекулой СДГ.

Принцип метода

Доказательством проявления активности СДГ является превращение окисленной формы метиленового синего в восстановленную форму после присоединения водорода. В результате происходит обесцвечивание синего раствора метиленового синего.

№ п/п	Реактивы и этапы	Опыт	Контроль
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.	Гомогенат мышц (мясной фарш), мл Нагревание на водяной бане в течение 5 минут Охлаждение до комнатной температуры Прибавление 0, 05М фосфатного буфера, рН=6, 8 Прибавление метиленового синего, 0, 05% раствор, капли Перемешивание стеклянной палочкой, заливание вазелиновым маслом и инкубация при комнатной температуре 15 минут Окраска Время обесцвечивания	- 1мл	+ 1мл

Сукцинат

краситель окисленная форма (синяя окраска)

СДГ ФАД ФАДН₂

Фумарат

краситель восстановленная форма (бесцветный раствор)

Тема 2.4. Глюконеогенез. Обмен гликогена.

План изучения темы

1. Основные этапы (схема и реакции) глюконеогенеза.

2. Пути включения в глюконеогенез лактата, аминокислот, глицерола в зависимости от физического состояния организма.

3. Этапы синтеза гликогена. Особенности мобилизации гликогена в печени и мышцах.

Вопросы для самоконтроля.

1. Назовите конечный продукт анаэробного гликолиза.

2. Судьба молочной кислоты, образующейся в мышцах.

3. Судьба молочной кислоты, образующейся в печени.

4. Дайте определение процессу глюконеогенеза.

5. Назовите метаболиты, используемые для синтеза глюкозы в процессе глюконеогенеза.

6. Назовите три необратимых этапа в процессе гликолиза.

7. Назовите ферменты, действующие на необратимых этапах гликолиза.

8. Назовите обходные пути, действующие на необратимых этапах гликолиза.

9. Назовите фермент, действующий на этапе превращения оксалоацетата в фосфоенолпируват.

10. Назовите фермент, осуществляющий превращение пирувата в оксалоацетат.

11. Назовите фермент, осуществляющий превращение фруктозо-1, 6-дифосфата во фруктозо-6-фосфат.

12. Назовите фермент, осуществляющий превращение глюкозо-6-фосфата в глюкозу.

13. Назовите этапы в процессе глюконеогенеза, требующие затраты АТФ.

14. Сколько молей АТФ потребуется на синтез 1 моля глюкозы из 2 молей лактата?

15. Может ли идти синтез глюкозы в клетках печени при дефиците в них кислорода? Ответ поясните

16. Биологическое значение глюконеогенеза.

17. Какая связь существует между гликолизом, протекающим в интенсивно работающей мышце, и глюконеогенезом в печени?

18. В каком направлении будет идти реакция, катализируемая лактатдегидрогеназой, при низком значении отношения НАДН/НАД⁺? Для какого органа это характерно?

19. Значение гликогена для организма.

20. В каких органах преимущественно откладывается гликоген?

21. Составьте схему превращения гликогена в глюкозу.

22. Назовите ферменты, катализирующие этапы превращения гликогена в глюкозу. К какому классу ферментов они относятся?

23. Почему резервной формой углеводов является гликоген, а не глюкоза?

24. Чем отличается гликогенолиз от гликолиза?

25. Сколько молей АТФ образуется при гликогенолизе в пересчете на каждую молекулу глюкозы? Сравните с аналогичной величиной при гликолизе.

26. Как называется процесс синтеза гликогена?

27. Назовите ферменты, участвующие в синтезе гликогена.

28. Напишите процесс синтеза гликогена.

29. В каких органах преимущественно откладывается гликоген после приема пищи?

30. При каких условиях происходит депонирование глюкозы в печени?

Задания, обязательные для выполнения в процессе самоподготовки

1. Нарисуйте схему глюкозо-лактатного цикла (цикл Кори), охарактеризуйте его значение.

2. Нарисуйте схему глюкозо-аланинового цикла, охарактеризуйте его значение.

3. Напишите процесс включения глицерола в глюконеогенез. Объясните значение и энергетический баланс процесса.

4. Объясните: может ли процесс глюконеогенеза в клетках печени идти в условиях дефицита в них кислорода.

Примеры тестовых заданий

1. В глюконеогенезе участвуют ферменты

1. Фосфорилаза

2. Фруктозо-1, 6-бисфосфата

3. Пируваткиназа

4. Пируваткарбоксилаза

5. Глюкокиназа

2. В синтезе глюкозы могут быть использованы

1. Гликогенные аминокислоты

2. Кетогенные аминокислоты

3. Глицерол

4. Высшие жирные кислоты

5. Холестерол

3. Глюконеогенез в организме протекает

1. В мышцах

2. В сердце

3. В печени

4. В лёгких

5. В жировой ткани

4. В процессе глюконеогенеза глюкозо-6-фосфатаза катализирует превращение

1. Глюкозо-6-фосфат в глюкозо-1-фосфат

2. Глюкозо-1-фосфат в гликоген

3. Глюкозо-6-фосфат в глюкозу

4. Гликоген в глюкозо-6-фосфат

5. Пируваткарбоксилаза в качестве кофермента содержит

1. НАД

2. ФАД

3. Биотин

4.ФМН

5. Фолиевую кислоту

6. Переносчиком гликозидных групп в реакции биосинтеза гликогена является

1. АТФ

2. ГТФ

3. АДФ

4. УТФ

5. УДФ

7. Гликогенфосфорилаза катализирует реакцию

1. Образования свободной глюкозы

2. Расщепление альфа- (1-6) гликозидной связи

3. Образование глюкозо-1-фосфата

4. Образование глюкозо-6-фосфата

5. Образование гликогена

8. Укажите соответствие

Процесс	Конечный продукт
1. Гликолиз анаэробный	а. Лактат
2. Гликогенез	б. Гликоген
	в. Пируват
	г. Глюкоза

9. Укажите соответствие

Процесс	Конечный продукт
1. Гликогенному	а. Лактат
2. Глюконеогенез	б. Гликоген
	в. Пируват
	г. Глюкоза

10. Укажите последовательность образования глюкозы из лактата в процессе глюконеогенеза

1. Оксалоацетат

2. Фосфоенолпируват

3. Пируват

4. 2-фосфоглицерат

5. Глюкозо-6-фосфат

6. Лактат

Примеры ситуационных задач

Задача №1

При интенсивной физической нагрузке и голодании субстратом для синтеза глюкозы является глицерол, образующийся при распаде жиров в жировой ткани. Подсчитайте сколько моль глицерола и АТФ необходимо для синтеза 1 моль глюкозы.

Для обоснования ответа вспомните:

1. Метаболиты, используемые для синтеза глюкозы в процессе глюконеогенеза.

2. Напишите схему включения глицерола в процесс глюконеогенеза.

Задача №2

Формой депонирования глюкозы является гликоген, который синтезируется в абсорбтивном периоде с затратой энергии. Учитывая, что основным источником АТФ для синтеза гликогена является аэробный распад глюкозы, определите: во что обходится организму хранение глюкозы в виде гликогена.

Для обоснования ответа вспомните:

1. Напишите схему синтеза гликогена.

2. Укажите количество АТФ, необходимое для присоединения одного мономера к молекуле гликогена.

3. Укажите энергетический эффект аэробного распада 1 моль глюкозы до СО₂и H₂O.

4. Сопоставьте количество АТФ, затраченное при синтезе гликогена, с количеством АТФ, образовавшимся при окислении глюкозы.

Задача №3

При обследовании у ребёнка обнаружены такие симптомы, как дерматит, замедленный рост, расстройство мышечной деятельности. Анализ мочи показал высокое содержание лактата. При биохимическом обследовании обнаружен дефицит фермента холокарбоксилазы, который катализирует присоединение биотина к специфическому остатку лизина в активном центре ферментов. Почему при данном нарушении в моче обнаруживается лактат?

Для обоснования ответа вспомните:

1. Назовите метаболический процесс, в котором образуется лактат.

2. Приведите схему использования лактата в организме.

3. Укажите скорость реакции, которая снижается вследствие дефицита синтазы холокарбоксилазы.

4. Напишите схему процесса, который нарушен и укажите значение процесса.

Задача №4

После интенсивной физической работы, когда в печень поступает большое количество лактата, в ней активируется глюконеогенез и тормозится гликолиз. Почему это происходит?

Для обоснования ответа вспомните:

1. Что такое глюконеогенез?

2. Что такое гликолиз?

3. Укажите ключевые ферменты этих процессов.

Лабораторная работа

⇐ Предыдущая 123 4 5 6 7 8 9 10 Следующая ⇒