Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Опыт № 3 Исследование эмиграции лейкоцитов в ротовой полости человека под влиянием хемотаксинов
Опыт производится в несколько этапов: 1. Взятие смыва полости рта для определения «фоновой» миграции лейкоцитов. Для этого полость рта очистить, тщательно прополоскав её водопроводной водой в течение 2-х минут. Использовать для этой цели стакан № 1. Через 10 минут набрать в стакан № 1 с помощью шприца 10 мл физиологического раствора и прополоскать им в течение 2-х минут передний отдел полости рта. Смыв собрать в стакан № 1 и отставить в сторону. 2. Взятие смыва полости рта для исследования эмиграции лейкоцитов после споласкивания рта свежим мясным бульоном. После проведения первого этапа опыта или взятия «фоновой» порции смыва прополоскать передний отдел рта в течение 2-х минут 5‑ ю мл свежего говяжьего бульона. После ополаскивания бульон выплюнуть в раковину. Через 10 минут после «обработки» ротовой полости бульоном вновь в течение 2-х минут прополоскать передний отдел ротовой полости 10 мл физиологического раствора. Смыв собрать в стакан № 2. Через 10 минут ещё раз ополаскивают в течение 2-х минут передний отдел ротовой полости 10 мл физиологического раствора. Смыв собрать в стакан № 3. 3. Подсчет лейкоцитов в собранном для исследования материале. Жидкость в стакане № 1 тщательно перемешать, набирая её в лейкоцитарный меланжер и выдувая обратно 7-10 раз. В чистый пустой бюкс набрать этим же меланжером перемешанную жидкость до метки 0, 5, просушить пипетку марлевой салфеткой. Набрать тем же меланжером до метки 1, 0 3 % раствор уксусной кислоты и перенести в бюкс с жидкостью. Смесь перемешать пипеткой и оставить стоять на 5 минут. Подготовить камеру Горяева для подсчета форменных элементов. Заполнить камеру смесью из стакана № 1. Поместить камеру на предметный столик микроскопа, используя окуляр 15, объектив 8, найти сетку и подсчитать лейкоциты в 100 больших квадратах (рис. 1). Внимание! В счетной камере кроме лейкоцитов встречаются клетки плоского эпителия, остатки пищи, которые необходимо отличать от лейкоцитов и не следует считать.
Определить содержание лейкоцитов в 1 мкл исследуемой жидкости по формуле:
где: 1600 – число малых квадратов в 100 больших квадратах в сетке Горяева; 1/4000 – объём 1 малого квадрата в мм; 3 – разведение исследуемой жидкости; а – сумма сосчитанных лейкоцитов. Для получения результата достаточно практически умножить количество сосчитанных лейкоцитов на 7, 5, т. е.
Используя описанную методику, подсчитать содержание лейкоцитов в смывах №2 и №3. Определить индекс эмиграции лейкоцитов (ИЭЛ) для проб №2 и №3 по формуле:
где: Л1 – число лейкоцитов в «фоновой» пробе; Лх – число лейкоцитов после ополаскивания бульоном (стаканом №2 и №3).
Таблица 1 Влияние мясного бульона на эмиграцию лейкоцитов
Рис. 2 Кривая эмиграции лейкоцитов при действии мясного бульона на слизистую оболочку полости рта.
Обсудите результаты и сделайте выводы, ответив на вопросы: 1. Проявлением какого вида реактивности являются наблюдаемые изменения? 2. Каков механизм наблюдаемых реакций организма у испытуемых? 3. Какую форму индивидуальной реактивности (нормэргическую, гиперэргическую, гипоэргическую) вы наблюдали? Опыт № 4 Просмотр окрашенного мазка (демонстрационный препарат) Мазок приготовлен заранее из надосадочной жидкости, полученной после центрифугирования промывных вод из стакана № 2. Мазок изучить под микроскопом с иммерсией. Описать морфологический состав смыва. Зарисовать лейкоциты в различных стадиях дегенерации, эпителиальные клетки, микроорганизмы.
Занятие 6. Иммунологическая реактивность организма. Иммунопатология ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ Уметь проводить патофизиологический анализ клинических и модельных ситуаций, связанных с развитием иммунопатологических состояний и реакций. СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ 1. Контроль и коррекция исходного уровня подготовки студентов. Собеседование и дискуссия по вопросам: 1. Представление о системе иммунобиологического надзора, её структуре, функции, роли в организме. Механизмы иммунитета – специфические и естественные факторы защиты. 2. Типовые формы нарушения иммуногенной реактивности организма: классификация, общая характеристика. 3. 1Особенности формирования иммунологической реактивности в раннем детском возрасте 4. 3Роль иммунных механизмов в развитии некоторых стоматологических заболеваний. 5. Первичные В-зависимые (гуморальные) иммунодефициты: причины, механизмы развития, проявления. 6. Первичные Т-зависимые (клеточные) иммунодефициты: причины, механизмы развития, проявления. 7. Первичные комбинированные иммунодефициты: причины, механизмы развития, проявления. 8. Вторичные (приобретенные) иммунодефициты и иммунодепрессивные состояния, их причины, принципы лечения. 9. Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). Этиология, эпидемиология, патогенез, последствия. 10. Патологическая иммунная толерантность: причины, проявления, последствия. 11. Реакция «трансплантат против хозяина»: причины, виды, механизмы развития. |
Последнее изменение этой страницы: 2017-03-15; Просмотров: 383; Нарушение авторского права страницы