Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Методы микробиологического исследования при бруцеллезе ⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 2
1. Материал исследования: - кровь: берут 5-10 мл из вены в начальном периоде (до лечения антибиотиками), - моча: 30-20 мл перед посевом центрифугируют 1-2 часа и далее работают с осадком, - желчь: получают при дуоденальном зондировании (1, 5-2 мл), перед посевом центрифугируют 1-2 часа. Кроме указанных материалов можно исследовать: - пунктат из костного мозга, - ткани плода при спонтанном аборте, - околоплодные воды, - кусочки некротизированной плаценты, - молоко родильницы; В сельской местности дополнительно: - мясо погибших животных, - молоко коров, коз, - воду, - навоз. 2. Методы исследования:
- серологические (реакции Райта, Хеддельсона, Минкевича, РИФ, РНИФ, ИФА), - опсонофагоцитарная проба. 5. Аллергический: - аллергическая проба Бюрне (с бруцеллином), - РПН в присутствии аллергена.
Приложение 2 Схема бактериологического исследования на бруцеллез I Этап: Материал исследования: Цель работы: флаконы: накопление микробов
№ 1 № 2 МПБ + глюкоза + глицерин или необходимо 5-10% углекислого
печеночный бульон + 0, 2% цитрат газа (зажечь ватную пробку и натрия горящей ввести во флакон, затем пробку залить расплавленным парафином)
В термостат при + 37оС 30 дней (контроль каждые 4-5 дней)
II Этап: Материал исследования: Цель работы:
рост на жидких средах накопления получение изолированных колоний
по Граму РИФ печеночный агар + антифаговая сыворотка + генцианвиолет
В термостат при + 37оС, 25-30 дней (контроль каждые 4-5 дней)
III Этап: Материал исследования: Цель работы: изолированные колонии выделение и накопление чистой культуры
В термостат при + 37оС, на 20-25 дней
печеночный МПА
по Граму (РИФ, РНИФ)
IV Этап: Материал исследования: Цель работы: чистая культура на идентификация печеночном МПА микробного вида
по Граму (РИФ, РНИФ) - дифференциация вида бруцелл по: ¨ потребности первичных генераций в СО2; ¨ бактериостатическому действию на микробов анилиновых красителей (основного фуксина, тионина); ¨ образованию H2S; ¨ агглютинации монорецепторными сыворотками на стекле, в развернутой классической РА; ¨ чувствительности к фагу «Тб». Заключение: на основе комплекса признаков.
Приложение 3 Таблица дифференциальных свойств видов роста бруцелл
Дифференциация видов бруцелл по биохимической активности
Приложение 4 Лабораторная диагностика при сибирской язве 1. Материал исследования: при кожной форме: - содержимое везикул, пустул; - отделяемое карбункула, язвы; при легочной форме: - мокрота; при кишечной форме: - кал; при подозрении на септическую форму (на фоне повышенной температуры): - кровь. 2. Методы исследования: а) микроскопический (обычный и иммунофлюоресцентный) б) микробиологический в) биологический г) серологический (реакция преципитации по Асколи) д) аллергологический (внутрикожная аллергическая проба с антраксином). 3. Окраска мокроты больного по методу Ребигера: На нефиксированный препарат налить краску Ребигера (генцианвиолет, растворенный в 40% формалине – это и краситель, и фиксатор) на 20 секунд. Промыть водой. Капсулы – красно-фиолетовые, бактерии – темно-фиолетовые. 4. Бактериологическое исследование при сибирской язве: (при наиболее распространенной кожной форме бактериологическое подтверждение только в 50% случаев). Внимание: бациллы сибирской язвы - спорообразующие аэробы. Для выделения их чистой культуры используют общеизвестную схему выделения чистой культуры аэробов. 5. Биологический метод: Материал вводится подкожно кроликам (белых мышей и морских свинок не используют потому, что некоторые штаммы слабовирулентных и даже непатогенных для человека бацилл могут вызвать их гибель). Зараженные кролики гибнут от сибирской язвы через 2-3 суток с явлениями оцепенения, характерно отсутствие трупного окоченения, не свернувшаяся густая, темная кровь. Дифференциация сибиреязвенного микроба от других почвенных бактерий
Приложение 5 Микробиологическая диагностика туляремии I. Бактериологический метод: Материал для исследования: содержимое бубона, отделяемое кожной язвы, конъюнктивы, зева, кровь, мокрота, ткани и органы трупа человека, грызунов, животных, объекты внешней среды. 1 день: Обработка Мазки-отпечатки Заражение иммунолюминесцентной Окраска по Граму морской свинки сывороткой (РИФ, РНИФ) 3-5 дни: Патанатомическое мазки-отпечатки Посев на среду Посев на МПА исследование органов Окраска по Граму Мак-Коя (нет роста). (желточная среда) 6-7 дни: Мазок Реакция агглютинации Изучение биохимической Окраска с туляремийной активности проводят редко по Граму диагностической (среды Гисса непригодны. сывороткой Используют монометрический метод Варбурга). Бактерии туляремии расщепляют до кислоты гл, мл Образуют Н2S. II. Биологический метод: подкожное или внутрибрюшинное заражение мышей, морских свинок: - патанатомическое исследование (увеличение миндалин, органов РЭС и т.д.); - мазки – отпечатки, микроскопия; - посев на питательные среды. III. Серологический метод: чаще используют для ретроспективной диагностики реакции: - агглютинации (диагностический титр у детей 1: 100), - гемагглютинации (титры 1: 1280 – 1: 1560), - кровяно-капельную реакцию Минкевича, - реакцию преципитации. IV. Аллергологический метод: 0, 1 мл тулярина вводится строго внутрикожно. Для контроля – 0, 1 мл 0, 9% физиологического раствора. Учет результатов через 24-48 часов. Приложение 6 Лабораторная диагностика чумы Материал для исследования Содержимое бубонов, язв, кровь, СМЖ, мокрота, испражнения, трупный материал (грызунов, людей), блохи.
Методы исследования 1. Микроскопический (окраска по Граму, РИФ). 2. Микробиологический с выделением культуры и её идентификацией. 3. Биологический с заражением чувствительных животных (мыши, крысы). 4. Иммунологический: РА, РНГА, РИФ, ИФА. 5. Аллергологический метод применяется in vivo, in vitro а) Используется при ДСЛ в виде внутрикожной пробы с аллергеном, полученным из псевдотуберкулезного микроба. Это специфический аутолизат или препарат из его клеточной стенки. Положительная реакция начинает проявляться с 4-7 дня болезни и сохраняется до 5 месяцев. Это реакция in vivo на больных. б) Аллергеном – псевдотуберкулином пользуются так же для реакции повреждаемости нейтрофилов больного in vitro. Приложение 7 |
Последнее изменение этой страницы: 2017-05-11; Просмотров: 578; Нарушение авторского права страницы