Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Тема 5 «Лабораторная диагностика стафилококкозов и стрептококкозов»



Цель – формирование практических умений проводить лабораторную диагностику кокковых инфнекций, формирование знаний о сущности и технике проведения бактериологических и серологических методов исследований, умений выделять биологические особенности возбудителей, работая с лабораторным оборудованием, делать заключение по изученному материалу, навыков работы с источниками информации, сопоставление биологических особенностей патогенных стафилококков и стрептококков.

План

1. Патологический материал для лабораторного исследования.

2. Лабораторные методы диагностики стафилококкозов.

3. Лабораторные методы диагностики стрептококкозов.

Материальное обеспечение: микроскоп, гнойный экссудат от больного животного, пробы молока от коров, больных маститом и здоровых. Питательные среды: МПБ, МПА, солевой и кровяной МПА, глюкозо-сывороточный МПБ, пробирки с цитратной плазмой кролика, пастеровские пипетки, МПА кровяной и солевой в чашках Петри, диски с антибиотиками и бромтимоловым индикатором, предметные стекла, стерильные пробирки, пипетки, бактериологические петли, набор бактериологических красок, фильтровальная бумага, дистиллированная вода, иммерсионное масло, микроскоп, демонстрационные среды в чашках Петри, культуры стафилоккоков и стрептококкоков с изученной антибиотикочувствительностью. Таблицы (Микробный состав молока коров, больных разными формами мастита; Гемолитическая активность патогенных кокков на кровяном агаре).

Теоретический материал

Лабораторная диагностика стафилококкозов.

Патологический материал: раневой экссудат, гной абсцессов, молоко при маститах, кровь при септицемии, продукты при пищевых отравлениях.

Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют. Прямая микроскопия позволяет дать только предварительный ответ. Одновременно сеют материал в чашки с кровяным, молочно-солевым и желточно-солевым агаром.

Патогенные штаммы на кровяном агаре образуют вокруг колоний зону гемолиза. На чашках с молочно-солевым агаром учитывают образование пигмента. На желточно-солевом агаре большинство патогенных стафилококков вызывает лецитовителлазную реакцию, проявляющуюся в образовании вокруг колонии зоны помутнения с радужным венчиком по периферии. Ставят реакцию плазмокоагуляции с цитратной плазмой крови кролика. При наличии у стафилококка фермента коагулазы плазма свертывается.

При необходимости установления источника возникновения стафилококковой инфекции и путей ее распространения, выделенные культуры подвергаются фаготипированию. Международный набор стафилококковых фагов состоит из 22 типов, разделенных на 4 группы. Энтеротоксины в пищевых продуктах и культурах определяют в РДП со стафилококковыми антисыворотками к энтеротоксинам А, В, С, D, Е, F.

В связи с широким распространением штаммов стафилококков, резистентных к лекарственным препаратам, проводят определение чувствительности выделенных стафилококков к антибиотикам на плотной среде методом бумажных дисков или реплик. Это очень важно для выбора рациональной химиотерапии.

Основным местом обитания стафилококков являются слизистые оболочки верхних дыхательных путей человека и животных. Гноеродные стафилококки можно легко обнаружить на предметах, расположенных в непосредственной близости к человеку, животным. Это позволяет отнести их к микроорганизмам – индикаторам воздушно-капельного загрязнения некоторых объектов внешней среды.

При подтверждении диагноза молоко коров, больных маститами, рекомендуется кипятить и использовать для кормовых целей, так как токсины и другие продукты патологического обмена ухудшают его качество и его делают совершенно не пригодным в пищу. Продажа молока от маститных коров запрещена.

Блюда, изготовленные из рыбы и морепродуктов, могут быть источником пищевой интоксикации. Посол рыбы не гарантирует исключение возможности образования токсина, т.к. стафилококк является галлофилом.

В продуктах с наличием стафилококков и их токсинов органолептические изменения не происходят. Интоксикации стафилококкового происхождения связаны с накоплением в инфицированной пище энтеротоксина. Классическое проявление поражения человека отмечается, когда в продукте (1 г) содержится 105-107 стафилококков, способных вырабатывать токсин, менее 1 мкг которого вызывает пищевую интоксикацию.

У больных стафилококкозом птиц наблюдаются явления септицемии. У взрослых – часто возникают артриты, дерматиты и тендовагиниты. При генерализованном процессе (абсцессы в суставах, изменения в органах) всю тушку вместе с органами направляют на техническую утилизацию.

Патогенные стрептококки у животных и человека заселяют слизистые оболочки, кожу и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности организма животного или отдельных тканей (при травме, ожоге и т.п.).

В естественных условиях стрептококки являются возбудителями заболеваний крупного рогатого скота и лошадей, а также нагноительных процессов. У поросят и птиц вызывают септическое заболевание – стрептококкоз (стрептококковая септицемия). Иногда обусловливают осложнение вирусных и бактериальных инфекций.

Стрептококки в течение нескольких дней могут сохраняться на предметах, окружающих больного, и в пыли. После высыхания они сохраняют жизнеспособность, но уже через несколько часов пребывания в воздухе теряет свою вирулентность.

Морфология. Шаровидные, не образующие спор бактерии, размером 0,2-2,0 мкм, грамположительные, располагаются парами или короткими цепочками.

Культивирование. На поверхности сывороточного МПА - стрептококки образуют мелкие, росинчатые колонии; на МПБ – бульон остается прозрачный, но на дне пробирки собирается мелкозернистый осадок.

Токсины и факторы патогенности. Патогенные стрептококки продуцируют экзотоксины различного действия: гемолизин, лейкоцидин, летальный токсин (некротоксин).

Кроме экзотоксинов патогенные стрептококки продуцируют следующие ферменты: гиалуронидазу, фибринолизин, дезоксирибонуклеазу, рибонуклеазу, нейраминидазу, протеиназу, стрептокиназу, амилазу, липазу, а также эндотоксины, которые характеризуются термостабильностью.

Все стрептококки разделены на три группы по гемолитической активности на агаре с кровью барана:

1)гемолитические (образуют бета-гемолиз, полностью гемолирующие),

2) зеленящие (образуют альфа-гемолиз, дающие частичный гемолиз),

3) негемолитические.

Стрептококки являются постоянными обитателями полости рта и верхних дыхательных путей человека и животных. В большом количестве альфа- и бета-гемолитические стрептококки выделяются в окружающую среду при кашле и чихании, наличие их в определенных объемах воздуха позволило некоторым исследователям рекомендовать их в качестве санитарно-показательных бактерий.

Тушки и внутренние органы больных стрептококковой септицемией птиц утилизируют. Яйца, полученные от птиц, благополучных по стрептококкозу групп, дезинфицируют и вывозят в сеть общественного питания, где используют в вареном виде, о чем указывается в ветеринарном свидетельстве. Их можно направлять для изготовления хлебобулочных и кондитерских изделий.

Теоретический материал по теме занятия студенты конспектируют в тетрадь и выполняют практические задания.

Практическое задание 1: Составьте схемы проведения лабораторного исследования на кокковые инфекции.

Этапы выполнения задания:

1 Отберите патологический материал для бактериологического и серологического исследований на стафилококковые инфекции и мастит коров.

2 Определите последовательность и технику выполнения бактериологических методов диагностики .

3 Определите необходимость и порядок выполнения серологического исследования биоматериалов.

4 Схемы исследований зарисуйте в тетрадь.

Практическое задание 2: Определите морфологические и тинкториальные свойства микробных культур.

Этапы выполнения задания:

1 Приготовьте мазки-препараты из гнойного экссудата и молока, зафиксируйте их.

2 Окрасьте мазки-препараты по методу Грама и простым методом.

3 Микроскопируйте окрашенные препараты, используя иммерсионную систему микроскопа, зарисуйте и опишите морфологические особенности стафилоккоков и стрептококков в тетрадь, отчитайтесь преподавателю.

Практическое задание 3: Определите культуральные свойства музейной микробной культуры.

Этапы выполнения задания:

1 Опишите характер роста микробной культуры на сывороточном агаре.

2 Опишите характер роста микробной культуры на МПА.

3 Опишите характер роста микробной культуры на сывороточном агаре.

4 Проанализируйте культуральные свойства изученной микробной культуры и сделайте заключение о соответствии ее сибириязвенным бациллам

Практическое задание 4:.Проведите бактериологическое исследование молока коров с целью обнаружения возбудителей мастита.

Этапы выполнения задания:

1 Проведите посев молока коров в питательные среды (кровяной агар, сывороточный агар, солевой агар, МПА, МПБ).

2 Посевы поместите в термостат для культивирования.

3 На следующем занятии изучите культуральные и морфологические свойства выросших культур.

4Определите чувствительность выделенных микробных культур к антибиотикам.

5 Сделайте заключение по диагностике мастита и лечению больных животных.

Практическое задание 5: Проведите контроль биологических препаратов, применяемых при стафилококкозах и стрептококкозах.

Этапы выполнения задания:

1 Определите назначение биологического препарата (диагностические, профилактические, лечебные), способ применения.

2 Определите пригодность препарата к использованию, обратите внимание на срок годности препарата, целостность упаковки, соответствие содержимого ампулы (флакона и др.) описанию в наставлении к препарату.

3 Полученные результаты внесите в таблицу рабочей тетради, проанализируйте и сделайте заключение по каждому препарату.

Вопросы и задания для контроля знаний. 1 Поясните порядок отбора патологического материала от больных животных при подозрении на мастит. 2.Какой материал подлежит исследованию на кокковые инфекции? 3 Назовите методы лабораторной диагностики инфекционных болезней, обусловленных патогенными и условно-патогенными стафилококками. 4 Какие методы применяют для определения токсигенности возбудителей? 5 Назовите биологические препараты, применяемые для профилактики стрептококковой септицемии телят. 6 Назовите возбудителей стрептококкозов. 7 Какие болезни сельскохозяйственных животных вызывают патогенные стрептококки? 8 С какой целью проводят посев патологического материала на кровяной агар? 9 Что означает термин «галофилы»? 10 На основании результатов каких исследований патологического материала можно установить окончательный диагноз на инфекционную болезнь? 11 Опишите характер роста Staphylococcus aureus на солевам агаре. 12 Какие виды кокков можно выявить на питательных средах с желчью? 13 Каким методом определяют патогенность стрептококков и стафилококков?

 


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-03-22; Просмотров: 413; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.018 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь