Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Исследование семенной жидкости



Семенную жидкость исследуют для того, чтобы определить способность мужчины производить потомство.

Эякулят (сперму) для исследования получают после 3-5 дневного полового воздержания. В этот период недопустимо употребление алкоголя, проведение массажа предстательной железы и семенных пузырьков.

Сбор спермы проводят метод мастурбации, при помощи специального вибратора в специальном помещении лаборатории. Материал собирают в чистую сухую стеклянную или тефлоновую посуду, желательно градуированную. Особенно тщательно должны быть собраны первые капли спермы, так как в них содержится около 70% сперматозоидов.

Сперматозоиды обладают небольшим запасом энергии и при активном движении в тепле быстро истощают запас её и становятся неподвижным. При низкой температуре необходимо оградить сперму от переохлаждения.

Доставка спермы в лабораторию должна быть не позже 30-40 минут после эякуляции.

Исследование спермы ( сперматограмма ) включает изучение физико-химических свойств семенной жидкости и микроскопическое исследование нативного и окрашенных препаратов.

Физические свойства:

1. Количество : измеряют в градуированной пробирке по нижнему мениску. У здоровых мужчин объем спермы за эякуляцию составляет в среднем 3-4 мл (2-8 мл). Полиспермия (более 6 мл) – в основном происходит за счет увеличения количества секретов предстательной железы и семенных пузырьков, функция которых регулируется тестостероном. Большой объем эякулята обладает высокой оплодотворяющей способностью, только в случае нормальной концентрации в нем сперматозоидов.

Олигоспермия (уменьшается до 1 мл) – встречается при андрогенной недостаточности (атрофии яичек) и у пожилых людей. Малого количества эякулята недостаточно для нейтрализации кислой реакции влагалищного секрета, это тормозит продвижение сперматозоидов к цервикальному каналу. У пожилых людей уменьшение объёма эякулята связано с недостаточной секрецией предстательной железы, семенных пузырьков и уменьшением образования сперматозоидов.

2. Цвет: в норме имеет серовато-беловатый цвет с молочно-белой опалесценцией. Патологические примеси могут изменять цвет эякулята. При гемоспермии эякулят окрашен в более или менее выраженный розоватый или коричневатый цвет. Желтый при пиоспермии (гнойный процесс в предстательной железе или семенных пузырьках).

3. Мутность: зависит от количества сперматозоидов. чем больше сперматозоидов, тем более резко выражена молочно-белая мутность. Стекловидно-прозрачная сперма обычно бедна сперматозоидами.

4. Запах: определяется органолептически. В нормальном эякуляте он обусловлен наличием спермина из предстательной железы и напоминает запах цветов каштана.

5. Консистенция: нормальный эякулят во время выделения жидкий, но на воздухе сразу же приобретает студенистую консистенцию (тягучесть), затем при комнатной температуре происходит постепенное его разжижение за счет ферментов секрета простаты (фибринолизина и фибриногеназы). В норме это происходит через 15-30 минут.

6. Вязкость : определяется после его полного разжижения с помощью стеклянной палочки с оплавленным концом. Сперму перемешивают стеклянной палочкой, а затем медленно извлекают и отмечают на глаз длину нити до разрыва. В норме эта величина составляет 1-5 мм (на поверхности палочки остается капля спермы). При повышенной вязкости нить, тянущаяся от поверхности жидкости вслед за палочкой, длиннее 5 мм. При пониженной – нить короче 1 мм (капли на палочке не остается).

7. Реакция: в норме рН 7, 2-7, 6. При сдвиге рН в кислую сторону сперматозоиды теряют способность к движению, а ниже рН=6, 0 обычно наблюдается некроспермия.

Микроскопическое исследование:

1. Изучение нативных препаратов:

Микроскопическое исследование спермы проводится после разжижения, но не после одного часа после эякуляции. Если семенная жидкость при комнатной температуре не разжижается, её необходимо поставить в термостат при Т – 37°С на несколько минут.

Семенную жидкость выливают в чашку Петри и просматривают на черном фоне, 1-2 капли наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом, после чего микроскопируют сначала под малым увеличением, а затем под большим увеличением.

Если в нативном препарате сперматозоиды не обнаруживаются, эякулят центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут, из полученного осадка готовят мазок.

В препаратах нормальной спермы видно большое количество подвижных сперматозоидов, имеющих грушевидную форму, шейку и хвост.

Клетки сперматогенеза в нативном препарате плохо дифференцируются, поэтому их исследуют только в окрашенном мазке. В норме составляют 0, 5-2% от количества сперматозоидов.

Эритроциты в норме отсутствуют или единичные в препарате. Встречаются при воспалительных процессах, травмах, папилломах семенных пузырьков и уретры, злокачесвтенных опухолях, гемоспермии.

Лейкоциты в норме единичные в поле зрения. Количество увеличивается при воспалительных процессах (простатиты, уретриты, везикулиты).

Эпителиальные клетки в норме могут быть обнаружены в незначительном количестве. Это клетки призматического эпителия мочеиспускательного канала, придатка яичка и клетки эпителия предстательной железы, увеличивается количество при воспалительном процессе. Имеют вид круглых клеток мелких размеров с признаками жировой дистрофии.

Макрофаги, фагоцитирующие сперматозоиды (сперматофаги) – крупные большие клетки со светлой, часто вакуолизированной цитоплазмой. Обнаруживаются при воспалительных процессах, и при застое спермы различного происхождения.

Липоидные тельца («лецитиновые зёрна») – мелкие матовые образования округлой формы, в нормальном эякуляте содержатся в значительном количестве, отражают гормональную функцию простаты. При простатите и раке простаты количество их уменьшается, иногда до полного исчезновения.

Амилоидные тельца (конкременты) – имеют овальную или округлую форму, характерное слоистое строение, с концентрической исчерченностью, напоминают зерна крахмала, центральная часть их мелкозернистая желтого цвета. Обнаруживаются при застое секрета предстательной железы (аденома или гипертрофия простаты).

Кристаллы Беттхера – бесцветные удлиненной формы, образуются при охлаждении эякулята в случае недостаточного сперматогенеза (гипоспермии) или при простатите. Они представляют собой фосфорнокислую соль спермина.

Слизь в нормальном эякуляте отсутствует.

Также можно встретить яичковые цилиндры и тельца Труссо-Лаллемана.

2. Подсчёт сперматозоидов в счетной камере Горяева:

Реактивы:

- 1, 0 мл 40% нейтрального формалина, 5, 0 бикарбоната натрия, 100 мл дистиллированной воды

- 1, 0 мл 40% нейтрального формалина и 100 мл дистиллированной воды.

Исследуемую сперму после предварительного размешивания набирают в пипетку Сали до метки и вводят в 0, 4 мл разводящей жидкости.

Содержимое пробирки неоднократно встряхивают, заполняют камеру, устанавливают на предметный столик микроскопа и проводят подсчет сперматозоидов в 5 больших квадратах по диагонали, подсчитывают только те, которые лежат головками внутри квадратов.

Можно развести сперму в смесителе – меланжере для лейкоцитов (спермы – до метки 0, 5, а раствор – до метки 11).

Полученное число умножают на 109, в результате получают количество сперматозоидов в 1 л эякулята, а затем умножают на объем эякулята и получают общее количество сперматозоидов.

В норме 100-150х109/л.

3. Определение содержания подвижный сперматозоидов:

Эякулят набирают в лейкоцитраный меланжер до метки 0, 5, теплый (не выше 370С) изотонический раствор хлорида натрия до метки 11, (сперма разводится в 20 раз). Перемешивают и заполняют камеру Горяева. Подсчитывают количество неподвижных сперматозоидов в 5 больших квадратах по диагонали. Из общего количества сперматозоидов вычитают число неподвижных, а затем высчитывают процентное содержание, исходя из пропорции:

Х=(Ах100): В, где

А – количество неподвижных сперматозоидов,

В – общее количество сперматозоидов.

Результат выражается в процентах.

Норма 80-90%.

Кинезисграмма процентное соотношение сперматозоидов с различной подвижностью. Количество подвижных сперматозоидов является главным критерием при оценке их полноценности. Активно подвижные сперматозоиды обладают быстрым поступательным движением с перемещением в поле зрения. Малоподвижные сперматозоиды двигаются медленно, совершая колебательное, манежное движение или подергивание на месте. Исследование проводят с использованием «окошечка Фонио» для ограничения поля зрения.

4. Подсчет живых и мертвых сперматозоидов:

- Окраска по Блуму . На сухое обезжиренное предметное стекло наносят каплю спермы, и рядом две капли водного раствора кислого (50 г/л) эозина, капли смешивают, через несколько секунд добавляют каплю водного р-ра нигрозина (100 г/л), перемешивают и делают тонкий мазок.

- Окраска 5% эозином. На сухое обезжиренное предметное стекло наносят каплю спермы, и рядом две капли 5% раствора эозина, капли смешивают,

Высушенный при комнатной температуре мазок микроскопируют при помощи иммерсионной системы. Подсчитывают 100 сперматозоидов, выделяя отдельно живые и мертвые. Мертвые окрашены в красный (красно-феолетовый) цвет, а живые бесцветны вследствие восстанавливающего действия фермента дегидразы на эозин.

Норма 80-90% (90-95%).


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-03-30; Просмотров: 347; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.023 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь