Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Исследование семенной жидкости⇐ ПредыдущаяСтр 13 из 13
Семенную жидкость исследуют для того, чтобы определить способность мужчины производить потомство. Эякулят (сперму) для исследования получают после 3-5 дневного полового воздержания. В этот период недопустимо употребление алкоголя, проведение массажа предстательной железы и семенных пузырьков. Сбор спермы проводят метод мастурбации, при помощи специального вибратора в специальном помещении лаборатории. Материал собирают в чистую сухую стеклянную или тефлоновую посуду, желательно градуированную. Особенно тщательно должны быть собраны первые капли спермы, так как в них содержится около 70% сперматозоидов. Сперматозоиды обладают небольшим запасом энергии и при активном движении в тепле быстро истощают запас её и становятся неподвижным. При низкой температуре необходимо оградить сперму от переохлаждения. Доставка спермы в лабораторию должна быть не позже 30-40 минут после эякуляции. Исследование спермы ( сперматограмма ) включает изучение физико-химических свойств семенной жидкости и микроскопическое исследование нативного и окрашенных препаратов. Физические свойства: 1. Количество : измеряют в градуированной пробирке по нижнему мениску. У здоровых мужчин объем спермы за эякуляцию составляет в среднем 3-4 мл (2-8 мл). Полиспермия (более 6 мл) – в основном происходит за счет увеличения количества секретов предстательной железы и семенных пузырьков, функция которых регулируется тестостероном. Большой объем эякулята обладает высокой оплодотворяющей способностью, только в случае нормальной концентрации в нем сперматозоидов. Олигоспермия (уменьшается до 1 мл) – встречается при андрогенной недостаточности (атрофии яичек) и у пожилых людей. Малого количества эякулята недостаточно для нейтрализации кислой реакции влагалищного секрета, это тормозит продвижение сперматозоидов к цервикальному каналу. У пожилых людей уменьшение объёма эякулята связано с недостаточной секрецией предстательной железы, семенных пузырьков и уменьшением образования сперматозоидов. 2. Цвет: в норме имеет серовато-беловатый цвет с молочно-белой опалесценцией. Патологические примеси могут изменять цвет эякулята. При гемоспермии эякулят окрашен в более или менее выраженный розоватый или коричневатый цвет. Желтый при пиоспермии (гнойный процесс в предстательной железе или семенных пузырьках). 3. Мутность: зависит от количества сперматозоидов. чем больше сперматозоидов, тем более резко выражена молочно-белая мутность. Стекловидно-прозрачная сперма обычно бедна сперматозоидами. 4. Запах: определяется органолептически. В нормальном эякуляте он обусловлен наличием спермина из предстательной железы и напоминает запах цветов каштана. 5. Консистенция: нормальный эякулят во время выделения жидкий, но на воздухе сразу же приобретает студенистую консистенцию (тягучесть), затем при комнатной температуре происходит постепенное его разжижение за счет ферментов секрета простаты (фибринолизина и фибриногеназы). В норме это происходит через 15-30 минут. 6. Вязкость : определяется после его полного разжижения с помощью стеклянной палочки с оплавленным концом. Сперму перемешивают стеклянной палочкой, а затем медленно извлекают и отмечают на глаз длину нити до разрыва. В норме эта величина составляет 1-5 мм (на поверхности палочки остается капля спермы). При повышенной вязкости нить, тянущаяся от поверхности жидкости вслед за палочкой, длиннее 5 мм. При пониженной – нить короче 1 мм (капли на палочке не остается). 7. Реакция: в норме рН 7, 2-7, 6. При сдвиге рН в кислую сторону сперматозоиды теряют способность к движению, а ниже рН=6, 0 обычно наблюдается некроспермия. Микроскопическое исследование: 1. Изучение нативных препаратов: Микроскопическое исследование спермы проводится после разжижения, но не после одного часа после эякуляции. Если семенная жидкость при комнатной температуре не разжижается, её необходимо поставить в термостат при Т – 37°С на несколько минут. Семенную жидкость выливают в чашку Петри и просматривают на черном фоне, 1-2 капли наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом, после чего микроскопируют сначала под малым увеличением, а затем под большим увеличением. Если в нативном препарате сперматозоиды не обнаруживаются, эякулят центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут, из полученного осадка готовят мазок. В препаратах нормальной спермы видно большое количество подвижных сперматозоидов, имеющих грушевидную форму, шейку и хвост. Клетки сперматогенеза в нативном препарате плохо дифференцируются, поэтому их исследуют только в окрашенном мазке. В норме составляют 0, 5-2% от количества сперматозоидов. Эритроциты в норме отсутствуют или единичные в препарате. Встречаются при воспалительных процессах, травмах, папилломах семенных пузырьков и уретры, злокачесвтенных опухолях, гемоспермии. Лейкоциты в норме единичные в поле зрения. Количество увеличивается при воспалительных процессах (простатиты, уретриты, везикулиты). Эпителиальные клетки в норме могут быть обнаружены в незначительном количестве. Это клетки призматического эпителия мочеиспускательного канала, придатка яичка и клетки эпителия предстательной железы, увеличивается количество при воспалительном процессе. Имеют вид круглых клеток мелких размеров с признаками жировой дистрофии. Макрофаги, фагоцитирующие сперматозоиды (сперматофаги) – крупные большие клетки со светлой, часто вакуолизированной цитоплазмой. Обнаруживаются при воспалительных процессах, и при застое спермы различного происхождения. Липоидные тельца («лецитиновые зёрна») – мелкие матовые образования округлой формы, в нормальном эякуляте содержатся в значительном количестве, отражают гормональную функцию простаты. При простатите и раке простаты количество их уменьшается, иногда до полного исчезновения. Амилоидные тельца (конкременты) – имеют овальную или округлую форму, характерное слоистое строение, с концентрической исчерченностью, напоминают зерна крахмала, центральная часть их мелкозернистая желтого цвета. Обнаруживаются при застое секрета предстательной железы (аденома или гипертрофия простаты). Кристаллы Беттхера – бесцветные удлиненной формы, образуются при охлаждении эякулята в случае недостаточного сперматогенеза (гипоспермии) или при простатите. Они представляют собой фосфорнокислую соль спермина. Слизь в нормальном эякуляте отсутствует. Также можно встретить яичковые цилиндры и тельца Труссо-Лаллемана. 2. Подсчёт сперматозоидов в счетной камере Горяева: Реактивы: - 1, 0 мл 40% нейтрального формалина, 5, 0 бикарбоната натрия, 100 мл дистиллированной воды - 1, 0 мл 40% нейтрального формалина и 100 мл дистиллированной воды. Исследуемую сперму после предварительного размешивания набирают в пипетку Сали до метки и вводят в 0, 4 мл разводящей жидкости. Содержимое пробирки неоднократно встряхивают, заполняют камеру, устанавливают на предметный столик микроскопа и проводят подсчет сперматозоидов в 5 больших квадратах по диагонали, подсчитывают только те, которые лежат головками внутри квадратов. Можно развести сперму в смесителе – меланжере для лейкоцитов (спермы – до метки 0, 5, а раствор – до метки 11). Полученное число умножают на 109, в результате получают количество сперматозоидов в 1 л эякулята, а затем умножают на объем эякулята и получают общее количество сперматозоидов. В норме 100-150х109/л. 3. Определение содержания подвижный сперматозоидов: Эякулят набирают в лейкоцитраный меланжер до метки 0, 5, теплый (не выше 370С) изотонический раствор хлорида натрия до метки 11, (сперма разводится в 20 раз). Перемешивают и заполняют камеру Горяева. Подсчитывают количество неподвижных сперматозоидов в 5 больших квадратах по диагонали. Из общего количества сперматозоидов вычитают число неподвижных, а затем высчитывают процентное содержание, исходя из пропорции: Х=(Ах100): В, где А – количество неподвижных сперматозоидов, В – общее количество сперматозоидов. Результат выражается в процентах. Норма 80-90%. Кинезисграмма – процентное соотношение сперматозоидов с различной подвижностью. Количество подвижных сперматозоидов является главным критерием при оценке их полноценности. Активно подвижные сперматозоиды обладают быстрым поступательным движением с перемещением в поле зрения. Малоподвижные сперматозоиды двигаются медленно, совершая колебательное, манежное движение или подергивание на месте. Исследование проводят с использованием «окошечка Фонио» для ограничения поля зрения. 4. Подсчет живых и мертвых сперматозоидов: - Окраска по Блуму . На сухое обезжиренное предметное стекло наносят каплю спермы, и рядом две капли водного раствора кислого (50 г/л) эозина, капли смешивают, через несколько секунд добавляют каплю водного р-ра нигрозина (100 г/л), перемешивают и делают тонкий мазок. - Окраска 5% эозином. На сухое обезжиренное предметное стекло наносят каплю спермы, и рядом две капли 5% раствора эозина, капли смешивают, Высушенный при комнатной температуре мазок микроскопируют при помощи иммерсионной системы. Подсчитывают 100 сперматозоидов, выделяя отдельно живые и мертвые. Мертвые окрашены в красный (красно-феолетовый) цвет, а живые бесцветны вследствие восстанавливающего действия фермента дегидразы на эозин. Норма 80-90% (90-95%). |
Последнее изменение этой страницы: 2019-03-30; Просмотров: 347; Нарушение авторского права страницы