Методика подсчета эритроцитов и лимфоцитов в периферической крови.

Для подсчета форменных элементов наиболее часто применяется камера типа Бюркера с выгравированной на ней сеткой Горяева. Счетная камера состоит из толстого предметного стекла с особым углублением. На дне углубления счетной камеры выгравирована сетка, в клетках которой и подсчитываются форменные элементы. По краям углубления имеются возвышения, куда накладывается покровное стекло. Между нижней поверхностью этого стекла и дном углубления образуется замкнутое пространство, которое и представляет собой счетную камеру.

Счетная камера типа Бюркера разделена пополам глубокой канавкой и имеет на каждой половине сетку Горяева, что позволяет сразу считать 2 капли, не заполняя вновь камеры. Сетка Горяева имеет 225 больших квадратов (15Х15), 25 из которых разделены на малые, по 16 в каждом; имеются также пустые квадраты, собранные в группы по 4 квадрата. Всего в сетке 100 больших пустых квадратов, собранных в 25 групп (5X5).

Ход исследования:

Для подсчета эритроцитов берут смеситель (смесители представляют собой капиллярную пипетку с расширением- ампулой, содержащей бусинку, способствующую смешению крови с разводящей жидкостью) для эритроцитов, надевают резиновую трубочку, легким насасыванием набирают кровь из укола до метки 0,5. Избыток крови удаляют фильтровальной бумагой, после чего кончик смесителя погружают в приготовленный заранее флакон с 3% раствором поваренной соли или раствором Гайема и насасывают раствор, заполняя всю ампулу до метки 101. Тотчас снимают резиновую трубку, зажимают смеситель по длине между большим и указательным или средним пальцем и встряхивают в течение 3 минут. После этого заполняют счетную камеру, сливают 1-2 капли и выпускают последующую каплю на сетку.

Для подсчета лейкоцитов кровь из места укола набирают до метки 0,5, затем разводят 3% раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 минут, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета эритроцитов, наливают 4 мл 3% раствора поваренной соли или жидкости Гайема и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Для подсчета белых кровяных элементов в пробирку наливают 0,4 мл 3 - 5% раствора уксусной кислоты и 0,02 мл крови. Энергично встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку из гемометра Сали и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру.

Заполнение счетных камер:

Хорошо вымытое и вытертое шлифованное покровное стекло накладывают на выступающие боковые края. Болишими пальцами покровное стекло притирают, двигая вверх и вниз, все время плотно прижимая. Перед заполнением камеры вновь энергично встряхивают смесители, выпускают 2 капли на фильтровальную бумагу, а третьей заполняют щелку между камерой и покровным стеклом. Жидкость по капиллярности засасывается между ними и заполняет пространство над сеткой.

 Подсчет эритроцитов. Подсчет производят спустя 1-2 минуты (когда эритроциты осядут на дно камеры), пользуясь объективом 40Х и окуляром 7X, либо объективом 8Х и окуляром 15Х.

Придерживаются определенной последовательности счета: передвигая из квадрата в квадрат по горизонтали один ряд слева направо, следующий - справа налево. Считать эритроциты надо в 5 больших квадратах, т. е. в 80 маленьких.

Количество эритроцитов в 1 ммЗ (искомое) вычисляют следующим образом: единицей счета всегда, при всяком подсчете, в любой сетке служит малый квадрат. Объем его, как было указано, равен 1/4000 мм3. Сосчитав эритроциты в 5 больших квадратах, делят это количество на 80 и умножают на 200 (степень разведения крови) и на 4000 (чтобы получить количество клеток во всем кубическом миллиметре).

Подсчет лейкоцитов. Необходимо сосчитать не менее 100 больших квадратов (=1600 малых). Количество лейкоцитов в 1 мм3 получается следующим образом: число, сосчитанное в 3100 больших квадратах, делят на 1600 (приводят к 1 малому квадрату) и умножают на 20 (степень разведения) и на 4000.

Оценка полученных данных:

Нормальное количество эритроцитов в 1 ммЗ от 4500000 до 5000000. В норме среднее количество лейкоцитов в 1 мм3 от 5000 до 9000 (крайние границы 4000 - 9000).

 

43. Нормальная лейкоцитарная формула и ее изменения при различных заболеваниях.

Лейкоцитарная формула - процентное соотношение количества нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, базофилов и моноцитов.

Лейкоцитарная формула - норма:

Миелоциты --; метамиелоциты --; нейтрофилы палочкоядерные – 1-5%; нейтрофилы сегментоядерные –40-70%; лимфоциты –20-45%; моноциты –3-8%; эозинофилы –1-5%; базофилы -0-1%; плазмоциты--.

Варианты изменения (сдвига) лейкоцитарной формулы

Сдвиг влево [в крови увеличено количество палочкоядерных нейтрофилов, возможно появление метамиелоцитов (юных), миелоцитов] может указывать на следующие состояния: острые инфекционные заболевания; физическое перенапряжение; ацидоз и коматозные состояния.

Сдвиг вправо (в крови появляются гиперсегментированные гранулоциты) может свидетельствовать о следующих состояниях:

мегалобластной анемии;

болезнях почек и печени;

состоянии после переливания крови.

Значительное омоложение клеток происходит в таких случаях:

• так называемый бластный криз - наличие только бластных клеток (острые лейкозы, метастазы злокачественных новообразований, обострение хронических лейкозов);

• "провал" лейкоцитарной формулы - бластные клетки, промиелоциты и зрелые клетки, промежуточных форм нет (характерно для дебюта острого лейкоза).

Нейтрофилы. В зависимости от степени зрелости и формы ядра в периферической крови выделяют палочкоядерные (более молодые) и сегментоядерные (зрелые) нейтрофилы. Более молодые клетки нейтрофильного ряда - метамиелоциты (юные), миелоциты, промиелоциты - появляются в периферической крови в случае патологии и бывают свидетельством стимуляции образования клеток этого вида.

Увеличение количества нейтрофилов (нейтрофилёз, нейтрофилия):

инфекции (вызванные бактериями, грибами, простейшими, риккетсиями, некоторыми вирусами, спирохетами); воспалительные процессы (ревматизм, ревматоидный артрит, панкреатит, дерматит, перитонит, тиреоидит);

онкологические заболевания (опухоли различных органов).

Уменьшение количества нейтрофилов (нейтропения):

некоторые инфекции, вызванные бактериями (брюшной тиф и паратифы, бруцеллёз), вирусами (грипп, корь, ветряная оспа, вирусный гепатит, краснуха), простейшими (малярия), риккетсиями (сыпной тиф); болезни системы крови (гипо- и апластические, мегалобластные и железодефицитные анемии, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, острый лейкоз, гиперспленизм); анафилактический шок; тиреотоксикоз.

Лимфоциты составляют 20-40% всех лейкоцитов. Участвуют в регуляции иммунного ответа и координации работы всей иммунной системы в целом, эти клетки связаны с обеспечением иммунологической памяти.

Увеличение содержания лимфоцитов (лимфоцитоз):

инфекционные заболевания: инфекционный мононуклеоз, вирусный гепатит, коклюш, ОРВИ, токсоплазмоз, герпес, краснуха, ВИЧ-инфекция; заболевания системы крови: острый и хронический лимфолейкоз, лимфосаркома.

Уменьшение содержания лимфоцитов (лимфопения):

острые инфекции и заболевания; лимфогранулематоз; системная красная волчанка; почечная недостаточность; терминальная стадия онкологических заболеваний; иммунодефициты (с недостаточностью Т-клеток).

Эозинофильные сдвиги в лейкоцитарной формуле встречаются, если аллергический компонент включается в патогенез заболевания, сопровождающегося чрезмерным образованием IgE.

Эозинопения (уменьшение количества эозинофилов в крови менее 1 %) часто возникает в начале воспаления. Эозинофилия (рост количества эозинофилов >5%) соответствует началу выздоровления.

Увеличение количества эозинофилов (эозинофилия): аллергическая сенсибилизация организма (бронхиальная астма, аллергический ринит, атопический дерматит, экзема, пищевая аллергия); лекарственная аллергия; заболевания кожи (экзема, герпетиформный дерматит); паразитарные заболевания - глистные и протозойные инвазии.

Уменьшение количества эозинофилов (эозинопения): начальная фаза воспалительного процесса; тяжёлые гнойные инфекции; шок, стресс.

Моноциты составляют 3-9% всех лейкоцитов, способны к амёбовидному движению, проявляют выраженную фагоцитарную и бактерицидную активность. За эту функцию макрофаги называют "дворниками организма" .

Увеличение содержания моноцитов (моноцитаз): инфекции (вирусной, грибковой, протозойной этиологии); системные коллагенозы (системная красная волчанка) , ревматоидный артрит, узелковый периартериит; болезни крови (острый моноцитарный и миеломоноцитарный лейкозы, миелопролиферативные заболевания, миеломная болезнь, лимфогранулематоз);

Уменьшенне содержания моноцитов (моноцитопения ): апластическая анемия (поражение костного мозга); волосатоклеточный лейкоз; шоковые состояния.

Базофилы участвуют в аллергических и клеточных воспалительных реакциях замедленного типа в коже и других тканях, вызывая гиперемию, формирование экссудата, повышенную проницаемость капилляров.

Увеличение содержания базофилов (базофилия): хронический миелолейкоз;

микседема (гипотиреоз); ветряная оспа; хронические гемолитические анемии; состояние после спленэктомии; болезнь Ходжкина; язвенный колит.

 

⇐ Предыдущая37383940414243444546

Поделиться: