Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


ИЗОЛЯЦИИ ВИЧ ПОСЛЕ-МОНТАНЬЕ



Роберт Галло и его сообщники первыми утверждают, что «Изоляция Т-лимфотропного ретровируса» Монтанье из BRU не была «истинной изоляцией». Впоследствии они утверждали, что именно их четыре майские статьи 1984 года в Science содержат доказательство «истинной изоляции». Однако между экспериментами по изоляции Монтанье и Галло очень мало различий.

 

У Монтанье был только один пациент, BRU, и он использовал культуру лимфоцитов пуповины в попытках доказать существование вирусных белков и, следовательно, существование LAV (ВИЧ). У Галло было 72 пациента, и вместо того, чтобы использовать Т-клетки пуповины в качестве среды для выращивания предполагаемого вируса, он использовал клон H9 «линии Т-клеток... называемый HT... полученным от взрослого человека с лимфоидным лейкозом».81, 152 Клеточная линия H9 культивировалась с помощью ткани, происходящей от пациентов со СПИДом или лиц с риском развития СПИДа. Супернатант культуры клеток H9 оседал в градиенте плотности сахарозы и в полосе 1, 16 г/мл, то есть материал Галло, называемый «очищенным вирусом», инкубировали с сывороткой, полученной от многих пациентов со СПИДом и лиц, находящихся в группе риска.

 

В отличие от одного пациента у Монтанье, BRU, чьи антитела реагировали с тремя белками в «очищенном, меченом вирусе», у Галло было много пациентов, в сыворотках которых содержались антитела, которые реагировали либо с белком p41, либо с белком p24, либо с обоими белками, присутствующими в его «очищенном вирусе». В отличие от Монтанье, Галло утверждал, что оба белка являются вирусными, но считается, что p41 более специфичный, чем p24. Галло, как и Монтанье, обнаружил много белков, присутствующих в клетках из его культур, которые также реагировали с антителами в сыворотках его пациентов, но, в отличие от Монтанье, он утверждал, что эти белки были либо вирусными, либо вирус-индуцированными. Доказательством Монтанье для передачи и изоляции было обнаружение RT-активности в двух последовательных культурах. Галло определил критерии «Обнаружение и выделение HTLV-III [ВИЧ] у пациентов со СПИДом и до СПИДа»:

«Образцы, демонстрирующие более одного из следующих, считались положительными», если имеется:

1. «Повторное обнаружение Mg2+ -зависимой активности обратной транскриптазы в надосадочных жидкостях»;

2. «Вирус, наблюдаемый с помощью электронной микроскопии»;

3. «Внутриклеточное проявление вирусных антигенов, обнаруженных антителами от серопозитивных доноров или кроличьей антисыворотки к HTLV-III»;

4. «Передача частиц, обнаруженных с помощью анализов RT или электронно-микроскопического наблюдения, к свежей человеческой пуповинной крови, к костному мозгу или к Т-лимфоцитам периферической крови»..9

 

Обнаружение - это не изоляция. И независимо от того, что Галло имел в виду под изоляцией, его критерии не могут быть использованы для доказательства изоляции. RT-активность, даже если она обнаружена в тысячах серийных культура, не является доказательством изоляции. Наблюдение «вируса» с помощью ЭМ не доказывает, что обнаруженные частицы являются вирусом, а тем более «ВИЧ», или что «вирус» был выделен. Эти критерии могут быть использованы для обнаружения, но тогда и только тогда, когда есть доказательства каждого из них, что ВИЧ на 100% является специфическим.153 Такое доказательство требует очистки вирусных частиц. Галло не публиковал такие доказательства в 1984 году и не имеет их с тех пор.

 

Даже если «более одного» из критериев Галло было бы доказательством «обнаружения и изоляции», его результаты всё ещё очень проблематичны - факт, признанный Галло. Галло протестировал 72 больных СПИДом, но «Обнаружение и изоляция» были положительными только в 26/72 (36%). Это означает, что почти две трети (64%) его больных СПИДом не заразились «ВИЧ», вирусом, вызывающим СПИД». Галло «решил» эту проблему крайне неправдоподобно, как он объяснил Хью Кристи (Huw Christie), редактору журнала Continuum Magazine, во время интервью, взятого в 1998 году на Женевской международной конференции по СПИДу. Галло сказал Кристи: «Иногда у нас был положительный Вестерн-блот, но мы не могли изолировать вирус. Так мы волновались и чувствовали, что иногда получаем ложные срабатывания, поэтому мы добавили Вестерн-блот. Это все, что я могу вам сказать. Это был экспериментальный инструмент, когда мы его добавили, и для нас это сработало хорошо, потому что мы могли бы изолировать вирус, когда мы это делали».154, 155 Возможно, Вестерн-блот «работал» для Галло», но это, с научной точки зрения, недействительно. Вестерн-блот является ещё одной технологией для обнаружения реакции антиген/антитело и, как и его критерий (3), не является изоляцией вируса. Реакция антитело/антиген может быть использована для обнаружения тогда и только тогда, когда реакция была доказана, доказательство которой прежде всего требует очистки вируса.

 

В своей книге «Научные вымыслы» (Science Fictions) Джон Крюдсон (John Crewdson) описывает, как Галло утверждал, что его «кроличья антисыворотка к HTLV-III» была «среди его самых важных вкладов». «Только от кроличьих антител мы узнали, что было причиной СПИДа».156 Для получения антител кроликов, направленных против ВИЧ, нужно вводить кроликам очищенные частицы или ВИЧ-белки. Вопрос в том, как Галло владел антисывороткой, чтобы доказать «обнаружение и изоляцию» ретровируса до того, как он доказал «обнаружение и изоляцию» того же вируса? Если антисыворотка Галло была получена путём инъекции кроликам материала из полосы плотности 1, 16 г/мл, то его кролики продуцировали бы антитела, которые реагировали, возможно, на всё, что есть в этом материале, независимо от его происхождения. Но поскольку Галло, как и Монтанье, не опубликовал даже ни одной электронной микрофотографии157, чтобы показать, что «очищенный вирус» содержит частицы ретровируса, а тем более очищенные частицы, вполне вероятно, что «очищенный вирус» не содержал ничего, кроме клеточного мусора.

Это означает, что «кроличья антисыворотка» от Gallo для HTLV-III была не более чем кроличьими антителами к неизвестному числу клеточных белков.

Аналогично, Галло утверждал, что он использовал «антитела от серопозитивных доноров», чтобы обнаружить «внутриклеточное проявление вирусных антигенов [белков]». Однако, чтобы определить, какие доноры являются сероположительными [имеют антитела, которые реагируют с «внутриклеточными антигенами»], необходимо сначала получить «связанные с вирусом антигены», которые могут быть получены только путём очистки вируса.

Галло считает, что его лаборатория представила клеточную линию H9 очень важным фактором в его успешной «истинной изоляции» и характеристике ВИЧ. Читая научные статьи 1984 года, создаётся впечатление, что линия клеток HT (ХТ), из которой его коллега Микулас Попович (Mikulas Popovic) разработал клон H9, возникла в лаборатории Галло152]. Однако исследование Национального института здравоохранения в лабораторных практиках Галло158 установило, что HT - это не что иное, как HUT -78, клеточная линия, разработанная в другой лаборатории в конце 1970-х годов Ади Гасдаром (Adi Gazdar). В публикации в Nature в апреле 1983 года Галло сообщил, что клетки HUT-78 «содержали HTLV[-I] провирусные [ретровирусные] последовательности».159

 

Дурмашкин и др. (Dourmashkin et al.)

Подпись: «Электронные микрофотографии выбранных областей мембраны фиксированных и секционных клеток, показывающих связанные с клеткой VLP [вирусоподобные частицы], почкующиеся от неинфицированных клеток H9» (выделено мной).

Более того, хотя Галло считал свою бессмертную H9 клеточную линию предельно важной в изоляции ВИЧ, точка зрения Монтанье заключается в том, что в бессмертных клеточных линиях «Это настоящий суп» из ретровирусных частиц.47 Галло, как и Монтанье, не использовал действительные меры контроля. «Истинная изоляция» Галло была не более «истинной», чем у Монтанье.

 

В 2003 году пертская группа отправила Галло письмо о том, знает ли он об интервью Тахи о признании Монтанье в том, что не было электронных микрофотографий «очищенного вируса BRU». Имели ли клиницисты основания для беспокойства по поводу очевидного следствия из ответа Монтанье? Проводили ли клиницисты в течение двух десятилетий диагностику пациентов с несуществующим ВИЧ? Галло ответил: «Монтанье впоследствии опубликовал фотографии очищенного ВИЧ, как, конечно, сделали и мы в наших первых работах. Вам не нужно беспокоиться. Свидетельства очевидны и ошеломляющие». На самом деле не было ни одной электронной микрофотографии очищенного «ВИЧ», опубликованной Галло в 1984 году и Монтанье и с тех пор.157

 


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-04-09; Просмотров: 299; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.018 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь