Лабораторная диагностика при сибирской язве

1. Материал исследования:

       при кожной форме:

       - содержимое везикул, пустул;

       - отделяемое карбункула, язвы;

       при легочной форме:

       - мокрота;

       при кишечной форме:

       - кал;

       при подозрении на септическую форму (на фоне повышенной температуры):

       - кровь.

2. Методы исследования:

       а) микроскопический (обычный и иммунофлюоресцентный)

       б) микробиологический

       в) биологический

г) серологический (реакция преципитации по Асколи)

д) аллергологический (внутрикожная аллергическая проба с антраксином).

3. Окраска мокроты больного по методу Ребигера:

       На нефиксированный препарат налить краску Ребигера (генцианвиолет, растворенный в 40% формалине – это и краситель, и фиксатор) на 20 секунд. Промыть водой. Капсулы – красно-фиолетовые, бактерии – темно-фиолетовые.

4. Бактериологическое исследование при сибирской язве:

(при наиболее распространенной кожной форме бактериологическое подтверждение только в 50% случаев).

Внимание: бациллы сибирской язвы - спорообразующие аэробы. Для выделения их чистой культуры используют общеизвестную схему выделения чистой культуры аэробов.

5. Биологический метод:

       Материал вводится подкожно кроликам (белых мышей и морских свинок не используют потому, что некоторые штаммы слабовирулентных и даже непатогенных для человека бацилл могут вызвать их гибель).

       Зараженные кролики гибнут от сибирской язвы через 2-3 суток с явлениями оцепенения, характерно отсутствие трупного окоченения, не свернувшаяся густая, темная кровь.

Дифференциация сибиреязвенного микроба от других почвенных бактерий

Признак	Сибиреязвенная бацилла	Подобные сибиреязвенной	Сенная бацилла
Подвижность	-	+	+
Капсулообразование	+	-	-
Рост на МПБ	МПБ прозрачен, хлопьевидный осадок, пленки нет	МПБ мутный, плотный осадок, на поверхности пленка	МПБ мутный, после образования пленки – прозрачный
Рост на МПА	Белые волнистые колонии	Твердые, округлые беловатые колонии	Серо-беловатые, матовые
Гемолиз	Нет	Гемолиз	Нет
Лакмусовое молоко	Покраснение	Посинение	Посинение
Среда с желтком	Коагуляция через 24 часа	Коагуляция через 6-8 часов	Коагуляция через 6 часов
Патогенность для: - белых мышей, - морских свинок,   - кроликов	Погибают через 24 часа Погибают через 24-36 часов Погибают через 36-72 часа	То же Не патогенные   Не патогенные	Не патогенные микробы Не патогенные   Не патогенные
Отношение к бактериофагу	Лизируются специфическим фагом	Нет	Нет

 

Приложение 5

Микробиологическая диагностика туляремии

I. Бактериологический метод:

       Материал для исследования: содержимое бубона, отделяемое кожной язвы, конъюнктивы, зева, кровь, мокрота, ткани и органы трупа человека, грызунов, животных, объекты внешней среды.

1 день:      Обработка               Мазки-отпечатки            Заражение

       иммунолюминесцентной    Окраска по Граму              морской свинки

       сывороткой (РИФ, РНИФ)

3-5 дни: Патанатомическое        мазки-отпечатки     Посев на среду Посев на МПА

исследование       органов                 Окраска по Граму   Мак-Коя           (нет роста).

                                                                                       (желточная среда)

6-7 дни:     Мазок            Реакция агглютинации         Изучение биохимической

                   Окраска    с туляремийной                  активности проводят редко

                   по Граму   диагностической                    (среды Гисса непригодны.

                                          сывороткой                    Используют монометрический

                                                                                           метод Варбурга).

                                                         Бактерии туляремии расщепляют до кислоты гл, мл

                                                                                           Образуют Н₂S.                                                                                                                                                   

II. Биологический метод:

подкожное или внутрибрюшинное заражение мышей, морских свинок:

- патанатомическое исследование (увеличение миндалин, органов РЭС и т.д.);

- мазки – отпечатки, микроскопия;

- посев на питательные среды.

III. Серологический метод:

чаще используют для ретроспективной диагностики реакции:

       - агглютинации (диагностический титр у детей 1: 100),

       - гемагглютинации (титры 1: 1280 – 1: 1560),

       - кровяно-капельную реакцию Минкевича,

       - реакцию преципитации.

IV. Аллергологический метод:

0, 1 мл тулярина вводится строго внутрикожно.

Для контроля – 0, 1 мл 0, 9% физиологического раствора.

Учет результатов через 24-48 часов.

                                                                                                                         Приложение 6

⇐ Предыдущая123

Поделиться: