Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ

к практическому занятию  № 13

на тему: «Микробиология эшерихиозов, шигеллезов, сальмонеллёзов (брюшного тифа, паратифов)»

по программе дисциплины «Микробиология, вирусология»

по специальности - 31.05.01. «Лечебное дело» (уровень специалитета)

 

курс 3, семестр 5

 

Составитель:  Зайцева Е.А., д.м.н., профессор кафедры   Рецензент:  Шаркова В.А., д.м.н., профессор, заведующая кафедрой

 

Владивосток - 2016

1. Тема занятия: «Микробиология эшерихиозов, шигеллезов, сальмонеллёзов (брюшного тифа, паратифов)»

2. Мотивация изучения темы. Большой удельный вес представителей родов Escherichia , Shigella , Salmonella в классификационной схеме семейства энтеробактерий, их родство с возбудителями других кишечных инфекций по целому ряду признаков значительно затрудняют дифференциальную диагностику. В то же время, широкая распространенность и, следовательно, высокая эпидемическая значимость их в инфекционной патологии человека создают предпосылки к необходимости углубленного изучения их биологических свойств, рациональных методов лабораторной диагностики, знакомства с проблемами профилактики и лечения, в том числе специфических.

Знания этого раздела микробиологии, как и кишечных инфекций – вообще, усвоение этой темы расширяет круг знаний студентов. Они пригодятся им в изучении других дисциплин (эпидемиологии, инфекционных болезней), будут полезны врачам, занимающимся клинической деятельностью и санитарно-эпидемиологическим надзором.

 

Цели занятия.

3.1.  Общая цель: изучение темы направлено на формирование компетенций по ФГОС-03 по специальности 31.05.01 –Лечебное дел о: формировать способность и готовность использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОПК-9), формировать умение работать с научной литературой, анализировать информацию, вести поиск, выделять основные положения, делать выводы, развивать личностные качества (ОПК-9). Активно использовать современные достижения науки, особенно подчеркивая роль отечественных ученых в разработке данной темы (ОПК-9).

 

3.2.Конкретные цели и задачи.

В результате изучения темы студенты должны:

I уровень - «иметь представление» - обучающиеся способны дифференцировать представителей эшерихий, шигелл и сальмонелл.

________________________________________________________________________

II уровень - «знать» - удельный вес кишечных инфекций в патологии человека, биологическую характеристику возбудителей, патогенез, возрастные особенности формирования инфекционного процесса при эшерихиозах, шигеллёзах и сальмонеллезах, принципы диагностики, терапии и основы профилактики.

_____________________________________________________________________________

III уровень - «уметь» - обучающиеся способны сопоставлять биологические свойства возбудителей кишечных инфекций с патогенетическими механизмами, анализировать их с учетом динамики развития, выбирая методы лабораторной диагностики, материал исследования; забирать материал, направить его в лабораторию, ставить некоторые методы диагностики р. агглютинации – реакции Видаля, Нобля, Кастеллани; оценивать диагностические титры, определение стадии заболевания (начало, разгар, конец заболевания, прививочный, анамнестический), определение возможного бактерионосительства в РПГА (эритроцитарным Vi – диагностикумом); выбрать препараты для специфической диагностики, терапии и профилактики возбудителей кишечных инфекций.

________________________________________________________________________

IV уровень - «владеть» - навыками клинической интерпретации результатов микробиологического исследования, уметь выбрать препараты для специфической диагностики, терапии и профилактики возбудителей кишечных инфекций.

 

4. Этапы проведения практического занятия:

№ п/п	Название этапа	Цель этапа	Время
1	2	3	4
I. Вводная часть занятия			5-10 %
1.	Организация занятия	Мобилизовать внимание студентов на данное занятие	5
2.	Определение темы, мотивации, цели, задач занятия	Раскрыть практическую значимость занятия в системе подготовки к профессиональной деятельности, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов	5-10
II. Основная часть занятия			80-90%
1	2	3	4
3.	Контроль исходных знаний, умений и навыков	Проверка готовности студентов к занятию, выявление исходного уровня знаний, умений и навыков	15-20
4.	Общие и индивидуальные задания на СРС в учебное время	Дифференцированное ориентирование студентов к предстоящей самостоятельной их работе	20-30
5.	Демонстрация методики	Показать ориентировочную основу действия (ООД)	20-30
6.	Управляемая СРС в учебное время	Овладение необходимыми общекультурными, профессиональными компетенциями, исходя из конкретных целей занятия	20-30
7.	Реализация планируемой формы занятия (семинар, практическая работа)	Контроль результатов обучения и оценка с помощью дескрипторов	45
8.	Итоговый контроль	Оценивание индивидуальных достижений студента, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка	10-15
III. Заключительная часть занятия			5-10 %
9.	Подведение итогов занятия	Оценка деятельности студентов, определение достижения цели занятия. Преподаватель анализирует работу каждого студента. Подводит итоги занятия, делает выводы, определяет выполнение учебно-воспитательных целей, а также общий уровень подготовки студентов к занятию. Объявляет оценки студентам, отмечает хорошо и слабо подготовленных студентов, отвечает на вопросы.	5 -10
10.	Общие и индивидуальные задания на СРС во внеучебное время	Указание на самоподготовку студентов, ее содержание и характер	5

Ориентировочная основа действия (ООД) по проведению практического занятия (лабораторного, семинарского и т.д.).

1. Проверить материалы по СРС (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия).

2. Охарактеризовать и определить мотивацию, цель и задачи занятия.

3. Входной контроль уровня знаний.

4. Продемонстрировать решения ситуационной задачи по учебной теме согласно ниже представленного алгоритма (см. п.5).

5. Контролировать самостоятельное решение ситуационных задач студентами в соответствии с алгоритмом:

– на основании жалоб больного, объективных и эпидемических данных, выбрать метод и материал для лабораторного исследования; обосновать;

– на основании выше перечисленного и данных лабораторных исследований указать предположительный диагноз;

- проанализировав возможные причины развития инфекционной патологии и наличие неблагоприятных условий, способствующих развитию патологического процесса, наметить план и сроки специфической и неспецифической профилактики;

– проанализировать механизмы развития патологического процесса с выделением главного звена патогенеза, цепи причинно-следственных связей, наличия и механизмов развития с особенностями этиологического компонента, клиническими проявлениями, выбором материала исследования и сроков его забора;

– рассмотреть и обосновать механизмы развития клинических проявлений (симптомов и синдромов) и лабораторных данных патологического процесса;

– оценить динамику и характер развития патологического процесса, особенности антигенной характеристики возбудителя, обосновывая выбор метода экспресс-диагностики;

– показать взаимосвязь между механизмами повреждения и защиты (основываясь на законе диалектики – «единства и борьбы противоположности»);

– охарактеризовать степень «достаточности» защитно-приспособительных механизмов, обосновать их целесообразность в конкретной ситуации;

– обосновать основы этиотропного и специфического лечения и профилактики.

6. Итоговый контроль уровня знаний.

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ И ЕГО ОФОРМЛЕНИЕМ

№	Наименование учебного элемента	Методическое решение	Регламент протокола
1.	Посев крови больного для накопления возбудителя, его выделения в чистой культуре (гемокультура) и идентификация микробного вида с а) определением чувствительности к антибиотикам, б) фаготипированием.	Приложение № 1.	Зарисовать все этапы схемы, подписать.
2.	Составить схему выделения копрокультуры.	Приложение № 2.	Записать в протокол. Зарисовать.
3.	Ускоренный бактериологический метод диагностики. Зарисовать.	Приложение № 5.	Зарисовать.
4.	Выполнить ускоренную кровяно-капельную реакцию агглютинации по Минкевичу.	Капля крови из пальца на предметное стекло + дистиллированная вода + диагностикум. Покачивая через 2-3 мин., в положительных случаях наблюдают появление агглютината. Оформить контроли: кровь без АГ, физ.раствор + АГ.	Зарисовать в протоколе и записать.
5.	Заполнить схему реакции Видаля с сывороткой крови больного тифопаратифозным сальмонеллезом, прочитать и оценить готовый результат.	Приложение № 4. В четырех рядах пробирок развести испытуемую сыворотку от 1:50 до 1:6400 в физ.растворе 0,85%. В каждый ряд внести диагностикумы по схеме.	Записать, согласно приложения, результаты. Дать заключение в протоколе.
6.	На демонстрационном материале оценить реакции Кастелани, РПГА.	Составить схему постановки: а) реакции Кастеллани. Приложение №5. б)РПГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом. Приложение № 6.	Зарисовать в протоколе, дать заключение по  реакциям.
7.	Ознакомиться по схеме с материалом, временем его анализа в связи с фазами патогенеза тифо- и паратифозной инфекции.	Суммирование клинико-патогенетических и лабораторно-диагностических данных. Приложение№7.	Записать подробно в протокол.
8.	Ознакомиться с: а) питательными средами; б) иммуно-биологическими препаратами.	Приложение № 8. Приложение № 9.	Записать в протокол.
9.	Тестовый контроль усвоения материала.	Приложение №10.

6.3. Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты и эталоны).

Работа с контрольно-обучающими тестами:

Основная:

1. Лекция по теме.

2. Методическая разработка по теме.

3. Микробиология и иммунология / Под ред. академика РАМН, проф. А.А. Воробьева //М.: Медицина, 2008.464с.

4. Поздеев О.К. Медицинская микробиология /М.: ГЭОТАР-МЕД, 2008. 768 с.

5. Борисов Л. Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /М., 2008. 736 с.

 

Дополнительная:

1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2005. С. С. 30 – 40; С. 41-45.

2. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Воробьева А.А. М., 2006. С. 17 – 50; С. 30-50.

3. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С-Пб, 2002. С. 7 - 32.

4. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. С-Пб, 2002. С.21-29.

5. Биргер М.О. (под ред.) Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М., 1982. С. 20 -28.

6. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Под ред. Воробьева А.А., Быкова А.С. М., 2003. С..

 

Приложение № 1

Биохимическая активность

                                          Визуально   ТАВК

 

                                          По Граму

                                                                  Ориентиров

                                                                             РА

                                          Подвижность

Чистая культура                                                             гл лак мн мл сах

на МПА или                                                                   а) углеводолитическая актив-ть

ср.Ресселя

 

                              МПБ МПБ МПБ МПС

                        индо сероводород лак желатин

                       а)протеолитическая

Серологические свойства

ТАВК

 

Ориентировочная реакция

агглютинации на стекле

Антитела Т, А, В.                 1/50 1/100 1/120 1/400 1/800 1/1600… КК  КС

К – контроль                         Развернутая (пробирочная) реакция агглютинация

Фагодиагностика

 

а) Типирование бактериофагами

 

К

В

А

Т

             К

 

 

 

В                             Т

 

                                                                       В жидком МПБ

              

    

А

На плотном МПА Т, А, В – б/фаги

К – физ.раствор

 

б) Чувствительность к поливалентному (Т, А, В) на плотной или жидкой среде

Выполняются также, но со смесью б/фагов, без их разделения.

Дополнение к 3 а

       Свежевыделенные (идентифицированные) брюшнотифозные бактерии содержат Vi – антигены, к ним обнаружены 24 типа Vi – фага. Соответственно существует 24 типа брюшнотифозных Vi – штаммов. Кроме того, существует Vi – фаг I типа – универсальный для всех брюшнотифозных бактерий.

       Методика фаготипирования по Vi - специфичности

1. Чистую культуру отсеять на МПБ. Выращивать 4 дня при + 37^оС.

2. 25 капель 4-х суточной культуры раздельно раскапать на чашки с МПА. Подсушить.

3. К каждой подсушенной капле добавить один из 24-х Vi –бактериофагов, а к 25-й обязательно Vi – фаг универсального типа. Подсушить.

4. Поместить в термостат при + 37^оС на 2 часа, затем на 8-10 часов на холод (+ 4^оС) и опять в термостат на 4 часа при + 37^оС.

5. Учет результатов. Лизис культуры Vi – фагом I типа свидетельствует о её принадлежности к брюшнотифозным микробам.

Лизис одним из 24 типов фага указывает на принадлежность штамма к этому типу моно- Vi – фага.

 

 

Приложение № 2

Бактериологический метод. Выделение чистой культуры при брюшном тифе из кала (копрокультура)

 

       Метод отличается от предыдущего (гемокультура) только начальным этапом – подготовкой и характером материала и исключением накопления культуры.

       Цель – получение изолированной колонии.

                                          Посев (рассев) на ДДС                                          

                              По Граму Т А В К                                              + 37^оС

                                                                                                            18-24 часа

                               

 

                   Подвижность

Исследуемый                                 Ориентировочная РА         Висмут – сульфит агар,

Материал                            с АТ Т, А, В                       среды Левина, Плоскирева,

(кал в физ.р-ре)                   К – контроль                       Эндо и т.д.

                                           

       Дальнейшее изучение изолированных колоний, накопление чистой культуры и её исследование идёт по типу гемокультуры. Приложение № 5.

Приложение № 3

Ускоренный бактериологический метод исследования крови при тифо-паратифозных инфекциях (Метод профессора Блинкина)

 

       Метод основан на применении 2-х комплексов комбинированных питательных сред для выделения и идентификации культур, за счет чего этапы анализа сокращаются.

I комплекс

С 3-х сторон от пробирки индикаторные

полоски на индол, аммиак, H₂S

 

 

                       

 

МПА с глюкозой                       МПА с лактозой

                           и индикатором                            и индикатором

 

                                          МПБ с газоулавливающим поплавком

 

II комплекс

 

                   МПА с мальтозой                             МПА с сахарозой

                       и индикатором                    и индикатором

 

                   Среда Раппопорт с маннитом и поплавком-газоулавливателем

 

Изучение свойств культуры:

 

Визуальный контроль По Граму         Подвижность       Т А В К

 

 

       Биохимическая, серологическая (ориентировочная реакция агглютинации), чувствительность к бактериофагу совмещены.

 

 

Приложение № 4

Схемы различных вариантов реакции агглютинации Видаля

Варианты РА	«Инфекционная» (разгар заболевания)				«Анамнестическая»				«Прививочная»

Разведения сыворотки