|
Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
|
|
Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
К практическому занятию № 7Стр 1 из 4Следующая ⇒
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ К практическому занятию № 7 на тему: «Культивирование прочих микроорганизмов – грибов, простейших, риккетсий, хламидий. Определение чувствительности микробов к лекарственным веществам. Основы химиопрофилактики и химиотерапии»
по программе дисциплины «Микробиология, вирусология» по специальности - 31.05.01. «Лечебное дело» (уровень специалитета)
курс 2, семестр 4
Владивосток - 2016
Тема занятия: «Культивирование прочих микроорганизмов – грибов, простейших, риккетсий, хламидий. Определение чувствительности микробов к лекарственным веществам. Основы химиопрофилактики и химиотерапии». 2. Мотивация изучения темы. Первый раздел темы является продолжением предшествующих и отражает особенности культивирования и выделению чистых культур прочих микроорганизмов: спирохет, микоплазм, хламидий, грибов, простейших и риккетсий, которые необходимы при диагностике конкретных инфекций. В результате использования для лечения и предупреждения инфекционных заболеваний и их рецидивов различных химиотерапевтических средств, в том числе и антибиотиков, резко сократилась смертность от инфекционных болезней, снизилась тяжесть их течения, уменьшилось количество постинфекционных осложнений и хронизация болезней. Но это имеет место только в случаях адекватного назначения лекарственных препаратов, для чего необходимы знания основных принципов химиотерапии и химиопрофилактики, умение подобрать больному препарат оптимальной концентрации и вида при обязательном определении чувствительности к нему выделенных от больного возбудителей. Знакомству с ними и посвящена вторая часть темы настоящего занятия. Цели занятия. 3.1. Общая цель: изучение темы направлено на формирование компетенций по ФГОС-03 по специальности 31.05.01 – Лечебное дело - познакомиться с принципами культивирования и выделения чистых культур прочих возбудителей инфекций: спирохет, лептоспир, грибов, хламидий, простейших, риккетсий (ОПК-9); с основами химиотерапии и химиопрофилактики, с механизмами формирования лекарственной устойчивости и знакомство с методами ее определения (ОПК-9). Сформировать способность и готовность использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОПК-9), формировать умение работать с научной литературой, анализировать информацию, вести поиск, выделять основные положения, делать выводы, развивать личностные качества (ОПК-9). Конкретные цели и задачи. В результате изучения темы студенты должны: I уровень - «иметь представление» - об особенностях культивирования спирохет, лептоспир, грибов, хламидий, микоплазм, простейших, риккетсий; сформулировать характерные культуральные свойства этих микроорганизмов, знать классификацию и основные механизмы действия химиотерапевтических средств.
II уровень - «знать» - особенности культивирования и выделения чистых культур спирохет, лептоспир, грибов, хламидий, микоплазм, простейших, риккетсий; физиологию этих микроорганизмов; основные механизмы действия химиотерапевтических средств и механизмы формирования лекарственной устойчивости.
III уровень - «уметь» - выбрать методы диагностики и оценивать их результаты; проводить медицинские манипуляции в асептических условиях под контролем преподавателя.
IV уровень - «владеть» - методами определения чувствительности к антимикробным препаратам (с помощью дисков, серийных разведений); методами работы с лабораторным оборудованием, интерпретацией результатов исследования. 4. Этапы проведения практического занятия:
5.1. Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию: Задания для СРС во внеучебное время При подготовке к практическому занятию студенту необходимо в рабочей тетради заполнить протокол практического занятия по теме (зарисовать препараты, составить комплексные таблицы, развернутые схемы, заключения и т.д.): МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ И ЕГО ОФОРМЛЕНИЕМ
6. Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время: 1. Подготовить к проверке материалы по СРС (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия). 2. Охарактеризовать и определить мотивацию, цель и задачи занятия. 3. Входной контроль уровня знаний. 4. Оценить чувствительность к антимикробным препаратам контрольного тест-штамма (метод диско-диффузии в агар). 5. Разобрать и показать постановку теста по определению антибиотикочувствительности (метод дисков) с контрольным тест-штаммом. 6. Итоговый контроль уровня знаний. Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время. Исходный уровень
1. Что такое диско-диффузионный метод (метод Кирби-Баэура)? а) тест определения концентрации препарата в сыворотке, ингибирующей рост микроорганизмов б) простой метод определения чувствительности клинически значимых микроорганизмов к антимикробным агентам в) стандартный тест определения антимикробной чувствительности, зависящей от качества и РН среды, температуры, концентрации препарата и свойств тест-культуры г) тест определения чувствительности или резистентности микроорганизмов к препаратам
2. На какой день определяют характер антимикробного бактерицидного действия? а) через 18 - 24 часа б) через 4 - 6 суток в) через 6 -8 часов г) через 2 – 3 суток
3. На какой день определяют характер антимикробного бактериостатического действия? а) через 18 - 24 часа б) через 4 - 6 суток в) через 4 – 6 часов г) через 2- 3 суток
4. Что необходимо для определения концентрации антибиотика в биосубстрате: а) контрольный ряд с разведенным антибиотиком, равным искомому б) физиологический раствор в) все перечисленное г) дистиллированная вода
5. Какие культуральные свойства характерны для представителей семейства Mycoplasmataceae ? а) образуют видимые колонии на простых питательных средах б) для роста требуют сложных сред, дополненных внесением холестерина в) образуют характерные колонии желтого цвета г) нет правильного ответа
6. Какие из упомянутых микроорганизмов способны репродуцироваться во внеклеточной среде? а) Rickettsia rickettsii б) Chlamidia psittaci в) Chlamidia trachomatis г) Coxiella burnettii д) S . а ureus
7. Каким методом идентифицируют дрожжи? а) микроскопия окрашенного мазка б) визуализация роста культуры в) определение углеводолитической активности г) все вышеперечисленное 8. При учете результатов диско-диффузионного метода обнаружены чувствительные к антибиотику бактерии. Это значит: а) зона подавления роста бактерий вокруг диска большая б) зона подавления роста вокруг диска отсутствует в) наиболее интенсивный рост вблизи диска с антибиотиком и на нем г) нет правильного ответа
9. Атибиотиком, выделенным из грибов, является: а) тетрациклин б) полимиксин в) пенициллин г) грамицидин
10. Наиболее частым механизмом устойчивости к антибиотикам является: a) нарушение проницаемости микробной клетки б) выведение антибиотика из клетки в) модификация мишени г) энзиматическая инактивация антибиотика
Итоговый уровень
1. Что определяет резистентность микроорганизмов к лекарственным препаратам? а) наличие плазмид лекарственной устойчивости б) уменьшение числа, либо отсутствие рецепторов на поверхности клетки для взаимодействия препарата с микробом в) индуцирована применением антимикробных препаратов, селекция у стойчивых штаммов, с удалением чувствительных г) спонтанные мутации генома бактерии и/или хозяина д) возможны все механизмы
2. В состав пенициллинов входит а) бета-лактамное кольцо б) макролактоновое кольцо в) углеводные остатки г) пептиды
3. Сочетанное использование пенициллинов, клавулановой кислоты или сульфобактама имеет цель: а) увеличение растворимости антибиотика б) увеличение внутриклеточной концентрации антибиотика в) увеличение периода полувыведения антибиотика из организма +г) блокаду бета–лактамаз микроорганизма
4. Основной механизм действия β-лактамных антибиотиков сводится: а) к подавлению синтеза клеточных стенок б) к нарушению синтеза белка в) к нарушению синтеза ДНК г) к нарушению функций рибосом
5. Преимущественно каким методом определяют гифальные грибы? а) микроскопия окрашенного мазка б) определение культуральных свойств в) микроскопия мазка в ультрафиолетовом свете г) определения чувствительности к антимикробным препаратам
6. При каком значении химиотерапевтического индекса (ХТИ) лекарственный препарат считается эффективным: а) ХТИ > 3 б) ХТИ < 1 в) ХТИ = 1 г) ХТИ = 0
7. Каким методом культивируют хламидии: а) на искусственных питательных средах б) интротестикулярно в) в культуре клеток г) нет правильного ответа 8. Каким методом можно определить присутствие в объекте культивирования риккетсии а) окраска по Граму б) окраска по Романовскому-Гимзе в) метод темного поля г) метод люминесценции д) окраска по Здродовскому е) стереомикроскопия
9. Каким методом можно определить присутствие в объекте культивирования лептоспир а) метод темного поля б) окраска по Здродовскому в) стереомикроскопия г) по Граму
10. Каким методом культивируют спирохеты: а) на искусственных питательных средах б) интротестикулярно в) в развивающемся курином эмбрионе г) все вышеперечисленное
8. Учебно-материальное обеспечение: 8.2. Источники информации: Список рекомендуемой литературы: Основная: 1. Лекция по теме. 2. Методическая разработка по теме. 3. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2006. С.160 - 182. 4. O.K. Поздеев. Медицинская микробиология. Под ред. В.И. Покровского. М., 2006. С. 155 - 181. Дополнительная: 1. Красильников А.П., Романовская Т.Р. Микробиологический словарь-справочник. Минск, 1999. 2. Машковский М.Д. Справочник лекарственных средств. М., 1999. 3. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. С-Пб, 2002. С. 58 - 67. 4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Воробьева А.А. М., 2006. 5. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования под ред. М.О. Биргера. М., 1982. С. 170-182. 6. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.2.1890-04 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 04.03.2004).
Приложение 1 Приложение 2
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ СПИРОХЕТ 1. Культивирование спирохет на питательных средах - среда Нагучи (2% агар, 1 часть асцита, кусочки почек кролика, среда покрывается слоем вазелинового масла); - среда Аристовского (кроличья сыворотка, кусочек мозговой ткани под слоем вазелинового масла); - среда Уленгута (дистиллированная вода с сывороткой или антикоагулянтом); - среда Гельтцера (инактивированная сыворотка кролика, физ. раствор, кусочки куриного белка, 2 - 3 капли цитратной крови кролика или человека). Трепонемы с большим трудом культивируются на сложных питательных средах. При длительном выращивании на искусственных питательных средах они теряют вирулентность. Такие штаммы трепонем называются культуральными. 2. Культивирование в развивающемся 7-8 дневном курином эмбрионе. 3. Интратестикулярное заражение кролика-самца и культивирование трепонем в яичках. Приложение 3 КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ГРИБОВ Питательные среды для культивирования грибов: 1. Неселективные среды: - пивное сусло (неопохмеленное сусло стерилизуют при 110 0С 30 минут, затем используют его для приготовления: а) сусло жидкое (разводят водой), б) среда Сабуро жидкая (вода, глюкоза, пептон), в) сусло-агар (добавляют 2-3% агар-агара); - среда Сабуро плотная (агар, пептон, глюкоза, мальтоза, вода), - рисовая среда Левиной (варят цельный рис, разбавляют водой, фильтруют, добавляют агар-агар), - среда Левина (МПА, лактоза, эозин, метиленовая синь), - среда Эндо (МПА, лактоза, кислый фуксин, обесвеченный щелочью), - картофельно-глюкозный агар (отваренный в течение 1 часа картофель растирают, разбавляют водой, процеживают, добавляют глюкозу и агар), - МПА с 2% глюкозой, - желатиновая среда (в бульон на отваре сердечной мышцы быка добавляют желатин), - 5-10% КА (агар, дополненный экстрактом сердца и мозга), - асцитический агар (агар, асцитическая жидкость). 2. Селективные среды, дополненные одним или комплексом антибиотиков: пенициллином (20 ЕД/мл), стрептомицином (40 ЕД/мл) или гентамицином (0,5 мкг/мл), левомицитином (16 мг/мл).
Приложение 4 Приложение 5 КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ПРОСТЕЙШИХ 1. Среда NNN (3 N - Нови, Ниль, Николь): вода, поваренная саль, агар-агар, дефибринированная кровь кролика. 2. Для размножения лейшманий - среда 3 N модифицированная (свежую кровь заменяют переваром или разведенной сывороткой крови человека). 3. Для выделения чистой культуры трихомонад - обрабатывают материал пенициллином и стрептомицином (для устранения бактерий), добавляют нистатин (для устранения дрожжевых грибов). Затем засевают материал на одну из сред: - МПБ с 1% глюкозой и 5% лошадиной сыворотки. После посева среду сверху заливают вазелиновым маслом. - Среда Т (печеночный бульон, раствор Рингера, пептон, агар-агар, цистеин солянокислый. После стерилизации добавляют мальтозу, инактивированную сыворотку человека или асцитическую жидкость). Приложение 6
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ РИККЕТСИЙ 1. В развивающихся 7 - 11 дневных куриных эмбрионах: заражение производят в желточный мешок, температура и продолжительность выращивания зависят от вида риккетсий. 2. В культуре клеток: - первичные однослойные культуры клеток (чаще – трипсинированные культуры) куриных, мышиных, крысиных, человеческих фибробластов; - перевиваемые культуры клеток (опухолевых или нормальных тканей); - трипсинизированные культуры клеток почечного эпителия; первичные культуры ретикулярных клеток макрофагов (из костного мозга, селезенки). 3. В организме чувствительных животных: - легочный реккетсиоз у мышей (интраназальное введение материала молодым мышам); - легочный риккетсиоз у кроликов (введение в трахею); - перитониальный риккетсиоз у морских свинок и кроликов (внутрибрюшное введение); 4. Заражение вшей микроинъекциями: per rectum методом Вейгеля (введение заразного материала через стеклянный капилляр в кишечник членистоногих под контролем через бинокулярную лупу с увеличителем в 10-15 раз или per os (на кормилках); - методами непосредственного кормления насекомых на больных добровольцах.
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ к практическому занятию № 7 на тему: «Культивирование прочих микроорганизмов – грибов, простейших, риккетсий, хламидий. Определение чувствительности микробов к лекарственным веществам. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-10; Просмотров: 798; Нарушение авторского права страницы