Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
К практическому занятию № 19Стр 1 из 8Следующая ⇒
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ К практическому занятию № 19 на тему: «Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет. Диагностика, профилактика и принципы терапии. Микробиология протозоозов»
по программе дисциплины «Микробиология, вирусология» по специальности - 31.05.01. «Лечебное дело» (уровень специалитета)
курс 3, семестр 5
Владивосток – 2016.
Тема занятия: Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет. Диагностика, профилактика и принципы терапии. Микробиология протозоозов. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет. Диагностика, принципы профилактики и терапии. 2. Мотивация изучения темы. Риккетсии - широко распространенные микроорганизмы, относящиеся к облигатным паразитам человека. Их естественным резервуаром являются животные и реже - человек, а источниками - членистоногие, в которых развиваются микроорганизмы, не причиняя им вреда. Исключением являются лишь возбудители лихорадки Ку, которая передается от человека к человеку без участия насекомых. Риккетсии вызывают заболевания, которые либо поражают население определенных районов (эндемические риккетсиозы), либо быстро распространяются по территории, захватывая целые государства (эпидемические риккетсиозы). Указанные особенности эпидемиологии, тяжелое, часто рецидивирующее течение заболевания, вызванного риккетсиями, наносят ощутимый медико-социальный и экономический ущерб здоровью населения страны. Весьма опасны для здоровья человека и хламидии, способные поражать половую и другие системы организма, в том числе репродуктивную, и влиявшие, особенно в прошлом, на орган зрения. Поэтому знания о биологии и прочих закономерностях этих инфекций очень важны как для врачей узко профильных специальностей (урологи, гинекологи, офтальмологи), так и широких (терапевты, педиатры, инфекционисты, эпидемиологи и пр). Паразитарные инвазии или протозоозы распространены повсеместно. Большинство из них - природно-очаговые зоонозы, для которых типичны эндемичные и спорадические случаи заболевания. Для многих протозоозов характерны стадио-, штаммо-специфические различия, что сообщает своеобразие патогенезу, клинике, лабораторной диагностике, профилактике таких протозоозов. Возбудители протозоозов многочисленны и разнообразны, отличаются выраженной органотропностью и тканевым тропизмом, что отражается на преимущественной локализации патологического процесса, определяя и особенности их диагностики. Все простейшие - эукариоты, обладают ядром и другими структурными элементами, присущими клеткам высших организмов. Их особенностью является способность к цистообразованию. Это сохраняет простейших и помогает их выживаемости в экстремальных условиях широкому распространению. Поэтому знание протозоозов и их возбудителей очень важно для врачей всех специальностей. Цели занятия. Общая цель: изучение темы направлено на формирование компетенций по ФГОС-03 по специальности 31.05.01 –Лечебное дел о: формировать способность и готовность использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОПК-9, ПК-22), формировать умение работать с научной литературой, анализировать информацию, вести поиск, выделять основные положения, делать выводы, развивать личностные качества (ОПК-9, ПК-22). Активно использовать современные достижения науки, особенно подчеркивая роль отечественных ученых в разработке данной темы (ОПК-9, ПК-22).
Конкретные цели и задачи. В результате изучения темы студенты должны: I уровень - «иметь представление» - обучающиеся способны дифференцировать представителей риккетсий и хламидий. основных возбудителей протозоозов (классы, виды); о методах и средствах профилактики, принципах лечения. ________________________________________________________________________ II уровень - «знать» - удельный вес риккетсиозов и хламидиоза в патологии человека, особенности морфологии и структуры простейших и способы их выявления; фазы существования простейших (вегетативную, цистную), их последовательность; эпидемиологию протозоозов (источник, пути распространения, реципиенты); биологическую характеристику возбудителей, патогенез, возрастные особенности формирования инфекционного процесса и иммунитета при протозоозах, риккетсиозах и хламидиозах, классификацию протозоозов по органотропности, характер течения и специфическую локализацию инвазионного процесса; особенности клинических проявлений, их связь с биологией возбудителей, особенности иммунитета при протозоозах; методы диагностики (материал, методы - микроскопический, микробиологический, серологический, аллергологический, биологический).. _____________________________________________________________________________ III уровень - «уметь» - обучающиеся способны сопоставлять биологические свойства возбудителей риккетсиозов, хламидиозов и протозоозов с патогенетическими механизмами, анализировать их с учетом динамики развития, выбирая методы лабораторной диагностики, материал исследования; забирать материал, направить его в лабораторию, ставить некоторые методы диагностики р. агглютинации – реакцию Вейля, РНГА, РСК – реакцию Нобля; оценивать диагностические титры (у взрослого и ребенка), определение стадии заболевания (начало, разгар, конец заболевания, прививочный, анамнестический); выбрать препараты для специфической диагностики, терапии и профилактики возбудителей риккетсиозов. ________________________________________________________________________ IV уровень - «владеть» - навыками клинической интерпретации результатов микробиологического исследования, уметь выбрать препараты для специфической диагностики, терапии и профилактики возбудителей риккетсиозов хламидиозов, протозоозов.
4. Этапы проведения практического занятия:
Ориентировочная основа действия (ООД) по проведению практического занятия (лабораторного, семинарского и т.д.). 1. Проверить материалы по СРС (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия). 2. Охарактеризовать и определить мотивацию, цель и задачи занятия. 3. Входной контроль уровня знаний. 4. Продемонстрировать решения ситуационной задачи по учебной теме согласно ниже представленного алгоритма (см. п.5). 5. Контролировать самостоятельное решение ситуационных задач студентами в соответствии с алгоритмом: – на основании жалоб больного, объективных и эпидемических данных, выбрать метод и материал для лабораторного исследования; обосновать; – на основании выше перечисленного и данных лабораторных исследований указать предположительный диагноз; - проанализировав возможные причины развития инфекционной патологии и наличие неблагоприятных условий, способствующих развитию патологического процесса, наметить план и сроки специфической и неспецифической профилактики; – проанализировать механизмы развития патологического процесса с выделением главного звена патогенеза, цепи причинно-следственных связей, наличия и механизмов развития с особенностями этиологического компонента, клиническими проявлениями, выбором материала исследования и сроков его забора; – рассмотреть и обосновать механизмы развития клинических проявлений (симптомов и синдромов) и лабораторных данных патологического процесса; – оценить динамику и характер развития патологического процесса, особенности антигенной характеристики возбудителя, обосновывая выбор метода экспресс-диагностики; – показать взаимосвязь между механизмами повреждения и защиты (основываясь на законе диалектики – «единства и борьбы противоположности»); – охарактеризовать степень «достаточности» защитно-приспособительных механизмов, обосновать их целесообразность в конкретной ситуации; – обосновать основы этиотропного и специфического лечения и профилактики.
6. Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию: 6.1. Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний. 1. История изучения риккетсиозов, вклад отечественной науки в развитие современных представлений о риккетсиозах. 2. Биологические свойства риккетсий, особенности паразитизма, современная классификация риккетсиозов и их возбудителей. 3. Источники, пути передачи и распространения риккетсиозов. 4. Патогенез риккетсиозов и особенности иммунитета. 5. Материал и методы лабораторной диагностики риккетсиозов, значение серологических методов исследования, их оценка. 6. Сыпной тиф. Биологические свойства возбудителя, особенности эпидемиологии, методы лабораторной диагностики, профилактики. 7. Болезнь Брилля, дифференциальная диагностика. 8. Ку - лихорадка, биологические свойства возбудителя, эпидемиологические особенности, патогенез, лабораторная диагностика. 9. Специфическая и общая профилактика риккетсиозов. 10. Хламидии и их роль в патологии человека. Методы диагностики различных форм хламидийной инфекции. Значение для здоровья человеческой популяции 11. Принципы профилактики и лечения хламидиозов. 12. Основные возбудители протозоозов (классы, виды). 13. Особенности морфологии и структуры простейших и способы их выявления. 14.Фазы существования простейших (вегетативная, цистная), их последовательность 15. Эпидемиология протозоозов (источник, пути распространения, реципиенты). 16. Классификация протозоозов по органотропности. Характер течения и специфическая локализация инвазионного процесса. Особенности клинических проявлений, их связь с биологией возбудителей. 17. Классификация протозоозов по преимущественному поражению органов и систем: кишечные. Кровяные, дерматотропные, висцеральные. 18. Особенности иммунитета при протозоозах. 19. Методы диагностики: Материал, методы - паразитоскопический, паразитологический, серологический, аллергический, биологический, ПЦР. 20. Методы и средства профилактики: общая, специфическая. 21. Принципы лечения: противопротозойные препараты : 6.2. Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
6.2. Задания для СРС во внеучебное время. При подготовке к практическому занятию студент в рабочей тетради заполняет протокол практического занятия по теме (зарисовывает препараты, составляет комплексные таблицы, развернутые схемы, заключения и т.д.): Основная: 1. Лекция по теме. 2. Методическая разработка по теме. 3. Микробиология и иммунология / Под ред. академика РАМН, проф. А.А. Воробьева //М.: Медицина, 2008.464с. 4. Поздеев О.К. Медицинская микробиология /М.: ГЭОТАР-МЕД, 2008. 768 с. 5. Борисов Л. Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /М., 2008. 736 с. 6. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2005. С. С. 30 – 40; С. 41-45. 7. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Воробьева А.А. М., 2006. С. 17 – 50; С. 30-50. 8. Шаркова В.А., Забелина Н.Р., Воропаева Н.М., Диго Р.Н., Коршукова О.А., Карпенко Н.В. Учебно-методическое пособие к практическим занятиям по общей микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов медицинских вузов /Учебно-методическое пособие. 2011. Владивосток: Медицина ДВ. 179 с. Дополнительная: 1. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С-Пб, 2002. С. 7 - 32. 2. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. С-Пб, 2002. С.21-29. 3. Биргер М.О. (под ред.) Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М., 1982. С. 20 -28. 4. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Под ред. Воробьева А.А., Быкова А.С. М., 2003. С. С.21 -29. С.78-82, 85-92, 141-181.
Приложение № 1 Классификация риккетсиозов
Приложение № 2 Схема постановки р. Нобля
3. Аллергодиагностика Ку-лихорадки (положительна с 5 дня заболевания)
Приложение № 4 Роль хламидий в инфекционной патологии человека
Приложение № 5
Приложение № 6 Комар вместе с кровью больного заглатывает половые клетки - гамонты. В желудке комара они превращаются в зрелые половые клетки - гаметы, после их слияния формируется зигота - оплодотворенная клетка. Зигота, проникая стенку желудка комара, превращается в ооцисту. Она растет, содержимое её многократно делится, образуя тысячи спорозоитов По видам плазмодия | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Pl.vivax | Pl.malariae | Pl.falciparum | Pl.ovale | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Кольца | Часто разорваны, напоминают восклицательный знак или фигуру летящей птицы. | Сходны с Pl. vivax | Сохраняют форму или видны ядро с маленьким комочком цитоплазмы, иногда разорваны. | Сходны с предыдущими видами, ядра крупные, неправильной формы, структура колец часто сохранена. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Эритроциты | Нередко сохраняются в виде бледных розовых дисков. На их фоне видны шизонты и зерна Шеффнера. | Не сохраняются | Не сохраняются | Сохраняются остатки пораженных эритроцитов, даже на стадии кольца | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Трофозоиты | Цитоплазма, амебовидных трофозоитов в виде нескольких комочков вокруг ядра. Зрелые трофозоиты компактны, округлы. | Плотные, округлые, хорошо окрашенные формы. Разорванные рофозоиты встречаются редко. Лентовидные стадии отсутствуют. | Обычно не встречаются | Компактные | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Пигмент | Мелкий, палочковидный | Круглые, крупные зерна | В виде черной глыбки | Бурокоричневый | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Морула | Строение как в тонком мазке | Строение как в тонком мазке | Обычно не встречается | Строение как в тонком мазке | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Гамонты | Женские не отличимы от зрелых трофозоитов, у мужских – ядро крупное, вокруг венчик зерен пигмента, цитоплазма бледно окрашена. | Похожи, но меньше. | Типичной полулунной формы, что помогает дифференцировать данный вид. | Сходны с гамонтами возбудителей 3-х – 4-х дневной малярии |
Приложение № 7
Trypanosoma gambiense
Trypanosoma rhodesiense
Возбудители американского трипаносома (болезни Шагаса)
Trypanosoma cruzi
Методы исследования: | Материал для исследования: |
1.Паразитоскопический (при остром течении африканского и американского трипаносома). Готовят нативные препараты из крови или мазок – “толстая капля”. Первый просматривают в фазовоконтрастном или темнопольном микроскопе; второй – фиксируют в жидком фиксаторе, окрашивают по Романовскому-Гимзе. Нативные препараты микроскопируют с объективом x 40 и окуляром x 10, окрашенные – с иммерсией (x 90, x 7). | Кровь, плазма крови. Спинномозговая жидкость. Пунктат из лимфоузлов. |
Примечания:
1.1. При отрицательных результатах используют метод накопления возбудителя, для чего из вены берут 9-10 мл крови, смешивают с 1 мл 3, 8% лимоннокислого натра. Цитратную кровь центрифугируют 10 мин. при 1000-1500 об/мин. Препараты готовят из осадка. Исследуют в нативном и окрашенном состоянии.
1.2. При хроническом трипаносомозе используют метод ксенодиагностики. Для этого на больных людях кормят клопов (переносчиков). В кишечнике клопов трипаносомы появляются на 5 день кормления в большом количестве.
2. Паразитологический метод: возможно культивирование материала от больных при температуре 26-28°С на специальных питательных средах, которые надлежит защищать от высыхания. Рецептура питательных сред см. в кн.: «Практическая паразитология», под ред. Д.В.Виноградова-Волжинского. Л., 1977, с.70-71.
3. Серологический метод: по общим правилам выполняют реакции преципитаци (антиген - экстракт из трипаносом), агглютинации (антиген – живые или инактивированные трипаносомы из крови животных или из культур). Для постановки РСК используют антиген - экстракт из сердечной мышцы инфицированных животных. Первую и вторую реакции выполняют при остром, третью - при хронической трипаносомозе.
4. Биологическая проба: выполняется на морских свинках, которым вводят по 5-10 мл крови больного и каждую неделю на протяжении месяца исследуют мазки из крови животных.
Приложение № 8
III. Биологические пробы
- При амебиазе – это энтеральное заражение 2-3 недельных крыс, котят, щенков, морских свинок.
- При лямблиозе - заражение белых мышей.
- При балантидиазе - заражение 2-3 недельных крысят, котят и т.п.
IV. Иммунологические иссдедования при кишечных протозоозах:
При амебиазе можно выполнять р.преципитации, иммуноферментный анализ (ИФА), реакцию энзимомеченных антител, РИФ или РНИФ.
Приложение № 9
СХЕМА ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТОКСОПЛАЗМОЗА
Материал исследования: кровь, сыворотка крови, спинномозговая жидкость, пунктат лимфатических узлов, моча, кал, мокрота, менструальные выделения; легкие; из абортивного материала - плацента, околоплодная жидкость; из органов трупа - головной мозг, кусочки печени, селезенки.
Методы исследования:
1. Паразитоскопический с окраской препарата по Романовскому-Гимзе, после фиксации в жидком фиксаторе.
Морфология токсоплазм зависит от стадии их развития.
- Свободная особь - трофозоит. Последний имеет аркоподобную форму.
Один конец трофозоита заострен, в нем расположен аппарат пенитрации коноид. Второй конец - округлый, ближе к нему расположено круглое ядро.
- Псевдоциста - скопление токсоплазм в клетке организма хозяина.
- Циста — структура, образованная токсоплазмами, с плотной оболочкой. Зоиты в цисте лежат так плотно, что при окраске видны только красного цвета (отсюда сравнение цисты с «банкой зернистой икры»).
- Форма эндодиогении - в период продольного деления токсоплазм можно увидеть 2 и больше дочерние особи, лежащие внутри материнской клетки. Она напоминает связку бананов. 1-4 формы токсоплазм – это результат их бесполого цикла развития, который они проходят в организме промежуточных хозяев, в том числе и человека.
Кроме того, существует другая морфологическая форма токсоплазм, образующаяся после слияния половых клеток в слизистой оболочке кишечника, кошки – ооциста. Она дозревает во внешней среде, в почве, в теплое время года, при повышенной температуре. Из созревшей ооцисты выходят инфекционные спорозоиты.
2. Паразитологический метод. Токсоплазмы - абсолютные паразиты. Поэтому их культивируют в развивающихся куриных эмбрионах, культуре тканей (лучше человеческих фибробластах - абортивных), в брюшной полости белых мышей.
3. Иммунологический метод. Постановка иммунологических реакций целесообразна с конца первой - начала второй недели заболевания. Чаще применяют ИФА – иммуноферментный анализ с использованием готовых тест-систем, где в лунках иммунологического планшета адсорбирован токсоплазменный антиген. Методика позволяет проводить как качественное, так и количественное исследование уровня антител в сыворотках заболевшего. Кроме того, есть возможность выявления классов иммуноглобулинов - IgM и IgG, что позволяет определить давность инфицирования.
Приложение № 10
Методы исследования:
Паразитоскопическое изучение | Паразитологический метод | |
Нативных препаратов | Окрашенных препаратов | |
Варианты: 1.Материал + 1 капля физраствора подогретого до +35о, +37о С, сверху положить покровное стекло. 2.Материал + физраствор, подогретый до +35о, 37о С + 1 капля 0, 01 % сафранина или другого носителя. Исследовать с объективом x 40, окуляром x 10, на столике-термостате. | Мазок высушить, фиксировать одним из химических фиксаторов (96о этиловым или метиловым спиртом, смесь Никифорова). Рекомендуется к 20 мл краски добавлять 1-2 капли синьки Массона. Окраска по Романовскому-Гимзе. Исследовать с иммерсией. При микроскопии: ядро, блефаропласт, жгутики, аксостиль красные или малиновые, цитоплазма – голубая. | Материал обрабатывают пенициллином, стрептомицином 500-1000 УД на 1 мл субстрата (для освобождения от бактерий) и нистатином 500 ЕД на 1 мл среды (для освобождения от кандид). 0, 3-0, 5 мл материала засевают на среды: -МПБ с 1% глюкозы и 5% лошадиной инактивированной сывороткой; -среду Джонсона-Трасела, состав: пептон, агар-агар, цистеин солянокислый, мальтоза, печеночный экстракт, раствор Рингена 1N NaOH, после прогревания, фильтрования к среде добавляют метиленовую синь. Стерилизуют в автоклаве, перед посевом доливают 1 мл стерильной инактивированной лошадиной сыворотки. Рост на 3-4 день культивирования при +37о С. |
В настоящее время используется также ПЦР – полимеразная цепная реакция, которая выявляет ДНК возбудителя в исследуемом материале.
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ
к практическому занятию № 19
на тему: «Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет.
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-09; Просмотров: 517; Нарушение авторского права страницы