Цельная кровь отобранная с ЭДТА.

Загрязнённые пробы непригодны.

Подготовка проб

Для подготовки проб требуется гемолизирующий раствор DiaSys oneHbA1c (№ по каталогу: 1 4570 99 10 113).

Пропорция:

Гемолизирующий раствор             1000 мкл

Проба / Калибратор / Контроль                     20 мкл

Перемешайте пробу с гемолизирующим раствором и выждите 5 минут или до полного гемолиза.

Стабильность проб

Цельная кровь: 1 неделя при     2 – 8 °C

Гемолизат:         6 часов              при     15 – 25 °C

Гемолизат:         1 неделя при     2 – 8 °C

Процедура определения

Адаптации к биохимическим анализаторам запрашивайте дополнительно.

Основные параметры для Hitachi 911:

Длина волны, нм	660 (монохроматическая)
Температура, °C	37
Измерение	По 1 точке
Проба / Калибратор	6 мкл
Реагент 1	240 мкл
Реагент 2	80 мкл
Внесение реагента 2	Цикл 15 (276 сек)
Считывание	Цикл 31 (590 сек)
Калибровка	Сплайн-аппроксимация

Примечание: При выполнении анализа вручную следует пересчитать требуемые объёмы проб и реагентов, сохраняя пропорцию, и точно выдержать все интервалы времени.

 

Калибровка и вычисление

Концентрация HbA1c в тестируемых пробах определяется по калибровочной кривой с использованием соответствующей математической модели, такой как сплайн-аппроксимация. Калибровочная кривая строится по поглощениям 4 калибраторов различных концентраций и раствора NaCl (9 г/л), используемого для построения нулевой точки.

Стабильность калибровки составляет 6 суток.

 

Калибраторы и контроли

Для калибровки автоматических фотометров рекомендуется набор калибраторов DiaSys TruCal HbA1c. Номинальные значения калибраторов установлены согласно нормативным документам NGSP.

Для внутреннего контроля качества необходимо измерять в каждом пакете проб контрольные пробы DiaSys TruLab HbA1c.

	№ по каталогу	Фасовка
TruLab HbA1c, уровень 1	5 9750 99 10 073	2 × 0, 5 мл
TruLab HbA1c, уровень 2	5 9760 99 10 073	2 × 0, 5 мл

 

Рабочие характеристики

Диапазон измерений

Тест разработан для определения концентраций HbA1c в диапазоне измерения от 3 % до 15 % к общему гемоглобину.

Тест применим при концентрации общего гемоглобина от 6 до 23 г/дл.

 

Специфичность / Помехоустойчивость

Ввиду того, что в тесте DiaSys oneHb1Ac FS используются антитела, этот тест специфичен для человеческого Hb1Ac. Аскорбиновая кислота (до 50 мг/дл), Связанный и несвязанный билирубин (до 50 мг/дл), липемия (триглицериды до 2000 мг/дл), ревматоидный фактор (до 700 МЕ/мл), карбамилированный гемоглобин (до 7, 5 ммоль/л) и ацетилированный гемоглобин (до 5, 0 ммоль/л) не влияют на точность анализа.

Не наблюдалось также интерференции с уремией, лабильными интермедиатами (основания Шиффа) и видоизменёнными гемоглобинами HbS и HbA2.

Повышенные уровни HbF, тем не менее, могут привести к ложно заниженным результатам для HbA1c.

При алкоголизме и приёме больших доз аспирина может наблюдаться большой разброс результатов.

Чувствительность / Предел определения

Нижний предел определения составляет 1 % HbA1c.

Воспроизводимость

 

Внутрисерийная (n = 20)	Среднее, %	SD, %	CV, %
Образец 1	5, 02	0, 07	1, 48
Образец 2	8.04	0, 05	0, 68
Образец 3	11, 8	0, 1	086

 

 

Межсерийная (n = 20)	Среднее, %	SD, %	CV, %
Образец 1	4, 38	0, 08	1, 85
Образец 2	7, 88	0, 09	1, 17
Образец 3	11, 1	0, 12	1, 09

Сравнение методов

Сравнение между тестом DiaSys oneHbA1c FC (y) и другим иммунотурбидиметрическим тестом (x) на 100 образцах дало следующие результаты:

y = 1, 159 x – 0, 503 %; r = 0, 958.

Сравнение между тестом DiaSys oneHbA1c FC (y) и HPLC-тестом (x) на 100 образцах дало следующие результаты:

y = 1, 014 x + 0, 331 %; r = 0, 977.

Нормальные величины [4]

Каждой лаборатории рекомендуется самостоятельно установить пределы нормы для HbA1c на основании обследования местного населения, не страдающего диабетом. Норма для HbA1c обычно составляет 4 – 6 %. Уровень выше 7 % указывает на стойкую гипергликемию на протяжении последних 6 – 8 недель и, тем самым, на недостаточный контроль диабета.

Литература

1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 142-48.

2. Sacks DB. Carbohydrates. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3^rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1999 p. 790-6.

3. Hoelzel W, Weykamp C et al. IFCC Reference System for Measurement of Hemoglobin A1c in Human Blood and the National Standardization Schemes in the United States, Japan, and Sweden: A Method-Comparison Study. Clin Chem 2004; 50: 1: 166-74.

4. Dati F, Metzmann E. Proteins – Laboratory Testing and Clinical Use. Holzheim: DiaSys; 2005. p. 425-35.

 

⇐ Предыдущая1234567

Поделиться: