Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ



Занятие № 2.3.3

КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

 

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

 

изучить биологические свойства возбудителя ВИЧ-инфекции и принципы вирусологической диагностики СПИДа.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

 

1. Характеристику биологических свойств возбудителя.

2. Основные симптомы ВИЧ-инфекции.

3. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм

передачи инфекции.

4. Принципы лабораторной диагностики ВИЧ. Иммуноблоттинг.

5. Основы профилактики ВИЧ-инфекции. Препараты для диагностики и

лечения.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

· составлять алгоритм лабораторного обследования больного ВИЧ-инфекцией;

· проводить учет и интерпретировать результаты вирусологических
исследований с целью диагностики ВИЧ;

· классифицировать препараты в соответствии с их назначением.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:

· методами оценки природных и медико-социальных факторов среды в развитии инфекционных болезней; основами профилактических мероприятий по предупреждению инфекционных болезней;

· алгоритмом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции; методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителя; навыками изучения научно-медицинской информации, отечественного и зарубежного опыта по данной теме.




Ситуационная задача

У пациента-наркомана длительная субфебрильная температура, потеря в весе, упорный кашель. Какой материал должен быть взят у пациента для исследования при подозрении на ВИЧ-инфекцию и какие методы лабораторного исследования необходимо провести для постановки диагноза?

Работа № 1. Схема лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции

Цель: изучить принципиальную схему лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.

Самостоятельная работа: отметить основные направления и этапы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции (см. теоретическую справку). Отметить необходимость и информативность используемых методов.

 

Исследуемый материал: лимфоциты, кровь, СМЖ, сперма, выделения женских половых органов, моча, слюна, слезная жидкость

      

   

Вирусоскопия
РИФ, ИЭМ
Вирусология
Заражение культур клеток лимфоцитов
Индикация вируса: ЦПД (синцитиообразование или лизис клеток)
Идентификация вируса: ИФА, ПЦР, ГНК
Серодиагностика
Материал от больного: сыворотка Методы: ИФА, иммуноблоттинг
К методам экспресс-диагностики, кроме микроскопии, относят ПЦР, МГ (выявление РНК вируса или ДНК провируса), ИФА (выявление антигена вируса)

 



Работа № 2. Строение вируса иммунодефицита человека

Цель: изучить морфологию ВИЧ. 

Самостоятельная работа: используя атлас, теоретическую справку, зарисовать строение ВИЧ, описать, сделать вывод.

 


                                                   

                                                           ВИЧ

Вывод: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________


ВИЧ

Таксономия возбудителя:

Семейство____________________________________________________________________

Подсемейство_________________________________________________________________

Тип__________________________________________________________________________

Структура вириона ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Антигенная структура ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и репродукция

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

 

Назовите биологические жидкости больного ВИЧ-инфекцией, содержащие высокие концентрации вируса: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Перечислите возможные пути передачи возбудителя. _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Какими методами лабораторной диагностики устанавливают наличие ВИЧ-инфекции? ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Какие патологии в полости рта возникают у ВИЧ-инфицированных?

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) __________________________________________________________________ Лечение (препараты) _______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Решить ситуационные задачи

1. У пациента-наркомана длительная субфебрильная температура, потеря в весе, упорный кашель. Какой материал должен быть взят у пациента для серологического исследования? Какая тестовая реакция применяется с целью серодиагностики? Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод. При иммунологическом исследовании выявлено соотношение Тh/Тs равно 0.8, количество Тh в 1 мл крови составило 400.

 

2. В инфекционную больницу поступил мужчина с жалобами на сильные боли в горле, увеличение лимфатических узлов, повышение температуры. Возникло подозрение на ВИЧ-инфекцию. При обследовании у пациента соотношение Тh/Тs равно 2.0, количество Тh в 1 мл крови составило 800.

ИФА поставлена с гликопротеинами 120 и 41 вируса иммунодефицита человека и сывороткой пациента. Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод. Какое дополнительное исследование должно быть проведено для подтверждения диагноза?

 

3. В иммунологическую лабораторию Центра по профилактике СПИДа обратились два человека с просьбой об­следовать их на ВИЧ-инфекцию. Было проведено серологиче­ское исследование путем постановки ИФА. Оценить результат исследования, оформить протокол и сделать вывод.

Для учета результатов исследования выделяется планшет с ИФА для серологической диагностики ВИЧ-инфекции.

 

  Диагностикум

Сыворотки

    обследуемого 1 обследуемого 2 положительная контрольная отрицательная контрольная
ВИЧ-1 - + + -
I вариант (gp 120) (отсутствие окрашивания) (окрашивание)    
ВИЧ-2        
I вариант (gp 125) - - + -
ВИЧ-1        
II вариант (gp 41) - + + -
ВИЧ-2 II вариант(gp 36) - - + -

Вопросы 1. У кого из обследуемых возникло подозрение на ВИЧ-инфекцию? По­чему?

2. Какие дополнительные исследования нужно провести для подтверждения либо исключения ВИЧ-инфекции?

 

4. Больной К. 32 года поступил в терапевтическое отделение больницы по поводу пневмонии. В последние полгода часто болеет: повторяется стоматит, обостряется фурункулез, опоясывающий герпес. Больной сильно похудел, отмечает нарастающую слабость. Имел гомосексуальные связи в течение 10 лет. Результаты лабораторного исследования: предварительный анализ на ВИЧ-инфекцию положительный (ИФА), выявлена пневмоцистная природа пневмонии. Предварительный диагноз: ВИЧ-инфекция. Какая стадия ВИЧ-инфекции у больного, что для нее характерно? Каков прогноз для данного больного? Какой материал необходимо взять у пациента, и какой метод лабораторной диагностики использовать для подтверждения диагноза?

 

Подпись преподавателя_________________________________________________________


Теоретическая справка

К работе № 2

Строение ВИЧ. Вирусный геном состоит из 9749 нуклеотидов и включает в себя 11 генов, которые осуществляют контроль за экспрессией регулирующих структур. Генетический материал ретровирусов представлен РНК (две одинаковых цепи). Согласно литературным данным, геном ВИЧ содержит 6 регуляторных генов. Они не только кодируют соответствующие белки, но каждый из них еще влияет на другие структурные и регуляторные гены (то есть на самих себя).

По отдельности или совместно регуляторные механизмы экспрессии генов ВИЧ определяют следующие варианты сосуществования клетки и вируса:

1) вспышка репликации вируса;

2) устойчивый умеренный уровень размножения вируса;

3) состояние покоя.

Gag -ген отвечает за синтез трех протеинов сердцевины (P 17, P 25, P 15).

Pol -ген кодирует синтез ферментов обратной транскриптазы (ревертазы).

Env -ген кодирует синтез двух гликопротеинов оболочки Gp-120 и Gp-41. Первый из них ответственен за связывание с CD4-рецепторами, второй – за образование мостиков между липидными оболочками вируса и зараженной клетки, вследствие чего сердцевина ВИЧ оказывается внутри клетки-мишени.

Tat -ген - положительный регулятор, активизирующий все гены, а также отвечает за синтез белка-трансактиватора. Способен повысить скорость репликации вирусов в 1000 раз путем активации других вирусных генов.

Rev -ген - избирательный регулятор, репрессирующий регуляторные гены, но активирующий структурные гены, отвечает за умеренную репликацию вирусных частиц. Осуществляет возможность перехода от скрытой инфекции к активной форме размножения вируса. В ходе репликации взаимодействие между генами Tat и Rev способно сдерживать размножение вируса, в результате чего устанавливается устойчивое равновесие между ними с умеренным воспроизводством ВИЧ. Ограниченная репликация ВИЧ позволяет ему длительно воспроизводиться, не убивая зараженные клетки. Следовательно, подобная форма генетической регуляции может быть адаптивным признаком ретровирусов, хозяевами которых являются виды с длительным сроком жизни (человек, приматы).

Vif -ген кодирует белок P 23, который отвечает за эффективное заражение вирусом других клеток, не несущих CD4-структуры (В-клетки, ЦНС) при его отпочковывании от клетки-хозяина.

Vpr -ген и Vpu -ген изучены недостаточно.

Nef -ген – негативный регулятор, угнетающий все гены, способен замедлять либо прекращать размножение вирусных частиц вплоть до полного покоя.

К работе № 1, 3

Клинические стадии болезни

• Общая продолжительность составляет в среднем 10 лет. В течение всего этого времени наблюдается постоянное снижение количества Тх в крови пациента, что в конечном итоге становится причиной смерти.

Инкубационный период (период от момента заражения до появления реакции организма в виде клинических проявлений «острой инфекции» и/или выработки антител к ВИЧ) - от 3-х недель до 3 мес., иногда до 1 года. Активное размножение ВИЧ. Диагноз ВИЧ-инфекции на данной стадии ставится на основании эпидемиологических данных и лабораторно должен подтверждаться обнаружением в крови пациента ВИЧ, его антигенов, нуклеиновых кислот ВИЧ.  

Острая фаза инфекции (первичная инфекция или острый ретровирусный синдром) - около 1 мес. Активная репликация ВИЧ в организме продолжается. Клинические проявления: субфебрильная температура, крапивница, стоматит, воспаление лимфатических узлов - они становятся увеличенными, мягкими и болезненными. Появляются признаки, имеющие сходство с инфекционным мононуклеозом или гриппом. Проявлениями острого ретровирусного синдрома являются лихорадка, боли в горле, головная боль, миалгии и артралгии, тошнота, рвота, диарея. Частые клинические симптомы ВИЧ в этой стадии болезни являются эритематозная или макулопапулезная сыпь на лице и туловище, иногда на конечностях. Неврологическая симптоматика может быть представлена в эту стадию менингоэнцефалитами, периферической нейропатией, параличом лицевого нерва, радикулопатией, психозами. Гематологические нарушения включают умеренную лейкопению, лимфопению, тромбоцитопению или относительный лимфоцитоз с появлением атипичных мононуклеаров. В этот период можно обнаружить транзиторное снижение CD4+ лимфоцитов. Уровень CD4+ клеток в последующем повышается, но не нормализуется. Уровень виремии в этот период очень высок. Выявление антител к ВИЧ в эту стадию не постоянно и часто совсем отсутствует. Более надежно определять р24 антиген ВИЧ. Максимальная концентрация вируса, антител появляется только в самом конце этого периода.

Латентный период - 5-10 лет и более, асимптомная инфекция (АИ): единственное проявление - стойкое увеличение лимфатических узлов (плотные, безболезненные) - персистирующая генерализованная лимфоаденопатия. Характеризуется медленным прогрессированием иммунодефицита, компенсируемого за счет избыточного воспроизводства CD4-клеток. В крови обнаруживаются антитела к ВИЧ, возможно выявление изолятов ВИЧ. В этот период, несмотря на инфицированность, человек остается клинически здоровым, у него отсутствуют признаки иммунодефицита, CD4+ остаются на уровне здорового человека. Длительность АИ зависит от многих причин, в первую очередь от исходного состояния иммунной системы человека, от наличия факторов, негативно влияющих на состояние здоровья инфицированного (наркомания, алкоголизм, низкий социо- экономический статус и др.).

Стадии манифестных проявлений:

ПреСПИД - 1-2 года. Продолжающаяся репликация ВИЧ, гибель CD4-клеток,      развитие на фоне иммунодефицита вторичных (оппортунистических) заболеваний, инфекционных и/или онкологических: часто рецидивирующий герпес - долго не заживающие изъязвления слизистой рта, половых органов, стоматит. Лейкоплакия языка (разрастание сосочкового слоя — «волокнистый язык»). Кандидоз слизистой рта, половых органов; рецидивирующие простудные, кожные, урогенитальными заболеваниями с незначительно или умеренно выраженными общими симптомами (лихорадка > 38, 5°С, или диарея продолжительностью более 1 месяца, снижение массы тела менее чем на 10%). У пациентов диагностируется клиническая категория В (классификация CDC) или 2, 3 клиническая категория (клиническая классификация ВОЗ, 2006).

Терминальная стадия - СПИД: имеющиеся у больных вторичные заболевания приобретают необратимое течение, и больной погибает в течение нескольких месяцев. Регистрируется существенное снижение антител в крови.

Характеризуется выраженным иммунодефицитом и/или манифестацией тяжелых оппортунистических инфекций и опухолей. У пациента определяются тяжелые атипично протекающие инфекции (токсоплазмоз головного мозга, кандидозный эзофагит, кандидоз трахеи и бронхов, криптококкоз, криптоспоридиоз, туберкулез, атипичный микобактериоз, ВИЧ-деменция, ВИЧ-ассоциированные опухоли: саркома Капоши, лимфомы и др.). Развивается выраженное истощение. У пациентов диагностируется клиническая категория С (классификация CDC) или 4 клиническая категория (клиническая классификация ВОЗ, 2006).

Выделяют следующие клинические признаки-индикаторы, позволяющие заподозрить ВИЧ-инфекцию:

• снижение на 10 % массы тела и более в течение нескольких месяцев без видимых причин;

• стойкая беспричинная лихорадка в течение 1 месяца и более;

• беспричинное увеличение более чем двух групп лимфатических узлов (исключая паховые) на протяжении более 2 месяцев;

• постоянное и необъяснимое ночное потоотделение;

• быстрая утомляемость, заставляющая все больше времени проводить лежа.

 

Профилактика:

Специфической профилактики нет

Перспектива создания вакцины – неопределенная из-за высокой скорости антигенной изменчивости ВИЧ (AIDSVAX, ALVAX, ДНК – вакцины, векторные вакцины, синтетические пептидные вакцины – созданы, но не показали ожидаемой эффективности).

Основное значение имеет неспецифическая профилактика:

1. Контроль донорской крови и ее препаратов.

2. Контроль используемых в медицине биологических жидкостей (грудное молоко, сперма, костный мозг и др.)

3. Тщательная стерилизация медицинского оборудования.

4. Применение одноразовых шприцев, игл.

5. Борьба с наркоманией, проституцией, гомосексуализмом.

6. Санитарное просвещение.

7. Отказ от «опасных» видов половых контактов, использование презервативов, наличие постоянного полового партнера.

           

Занятие № 2.3.3

КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

 

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

 

изучить биологические свойства возбудителя ВИЧ-инфекции и принципы вирусологической диагностики СПИДа.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

 

1. Характеристику биологических свойств возбудителя.

2. Основные симптомы ВИЧ-инфекции.

3. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм

передачи инфекции.

4. Принципы лабораторной диагностики ВИЧ. Иммуноблоттинг.

5. Основы профилактики ВИЧ-инфекции. Препараты для диагностики и

лечения.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

· составлять алгоритм лабораторного обследования больного ВИЧ-инфекцией;

· проводить учет и интерпретировать результаты вирусологических
исследований с целью диагностики ВИЧ;

· классифицировать препараты в соответствии с их назначением.

 

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:

· методами оценки природных и медико-социальных факторов среды в развитии инфекционных болезней; основами профилактических мероприятий по предупреждению инфекционных болезней;

· алгоритмом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции; методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителя; навыками изучения научно-медицинской информации, отечественного и зарубежного опыта по данной теме.




Ситуационная задача

У пациента-наркомана длительная субфебрильная температура, потеря в весе, упорный кашель. Какой материал должен быть взят у пациента для исследования при подозрении на ВИЧ-инфекцию и какие методы лабораторного исследования необходимо провести для постановки диагноза?


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-05-05; Просмотров: 510; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.06 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь