КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ

1. Качественная реакция на присутствие глюкозы при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест».

Реактивная бумага «Глюкотест» применяется для экспресс – анализа содержания глюкозы в моче и представляет собой полоску бумаги, имеющую

на конце полоску светло-желтого цвета, пропитанную раствором фермента и

красителя. С помощью бумаги «Глюкотест» можно определить содержание

глюкозы в моче как качественно, так и полуколичественно (от 0, 1 до 2%).

Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы; образовавшаяся при этом перекись водорода разлагается вторым ферментом пероксидазой и окисляет добавленный краситель. Изменение окраски красителя при окислении свидетельствует о присутствии глюкозы в моче. Примечание:

1. Не дотрагиваться пальцами до цветной полосы.

2. При содержании глюкозы в моче более 2 % интенсивность окраски цветной полосы не меняется.

3. Рекомендуют исследовать свежесобранную мочу, взятую до приема пищи.

ПРОБА ГАЙНЕСА

Принцип: реакция основана на свойстве глюкозы восстанавливать в щелочной среде гидрат окиси меди в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).

Реактив: реактив Гайнеса

Ход определения: к 3 - 4 мл реактива прибавляют 8-12 капель мочи, кипятят и ставят в кипящую водяную баню. В присутствии глюкозы появляется желтая или красная окраска жидкости и осадок.

Модификация: 1 капля мочи + 9 капель реактива доводят до кипения. При отсутствии глюкозы цвет реактива не меняется (синий). Или 6-8 мл мочи + несколько капель реактива до бледно-голубого Цвета, смешивают, нагревают верхнюю часть пробирки до кипения (не кипятить). Нижняя часть пробирки - контроль. В присутствии глюкозы появляется желтая окраска в верхней части пробирки.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ

Колориметрический метод Альтгаузена

Принцип: используется цветная реакция, получаемая от нагревания раствора глюкозы со щелочью.

Реактив: 10 %-ный раствор гидроокиси натрия.

Ход определения: к 4 мл мочи приливают 1 мл 10 %-ного раствора щелочи. Кипятят 1 минуту. Через 10 минут цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой.

Колориметрический метод

Принцип: основан на цветной реакции, получаемой при нагревании мочи, содержащей глюкозу с раствором щелочи.

Оборудование: ФЭК.

Посуда: пробирки, пипетки.

Ход определения: 4 мл мочи смешивают с 1 мл 10 %-ного раствора едкого натрия. Ставят в кипящую водяную баню на 3 минуты. Через 10 минут колориметрируют на ФЭКе. Светофильтр зеленый, кювета 5 мл, контроль - вода.

Расчет: Количество глюкозы находят по калибровочной кривой.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВЫХ ТЕЛ

Кетоновые тела - это ацетон, ацетоуксусная и β -оксимасляная кислоты. В норме с мочой выделяется минимальное количество кетоновых тел, которые не обнаруживаются обычными качественными пробами.

Кетонурия - выделение с мочой большого количества кетоновых тел.

УНИФИЦИРОВАННАЯ ПРОБА ЛАНГЕ

Принцип метода: нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.

Реактивы:

а) нитропруссид натрия (раствор готовят перед употреблением);

б) уксусная кислота концентрированная;

в) 25 %-ный аммиак водный (NH₄OH).

Ход определения: исследуют мочу в первые 3 часа после мочеиспускания. В пробирку к 3-5 мл мочи приливают 5-10 капель раствора нитропруссида натрия -10 %, свежеприготовленного, 0, 5 мл концентрированной уксусной кислоты, смешивают, а затем осторожно по стенке пробирки пипеткой наслаивают 2-3 мл водного раствора аммиака.

Пробу считают положительной, если в течении 3 минут на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо.

МОДИФИЦИРОВАННАЯ ПРОБА РОТЕРЫ

Принцип метода: нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.

Реактивы:

а) нитропруссид натрия - 50 г/л;

б) аммония сульфат;

в) 25 %-ный водный раствор аммиака.

Ход определения: 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия. Тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь осторожно наслаивают 10-15 капель водного раствора аммиака. При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3-5 минут образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет судить ориентировочно о концентрации кетоновых тел в моче. При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8-10-й минуте.

ЭКСПРЕСС АНАЛИЗ «ЛЕСТРАДЕ»

Ход определения: На полоску фильтровальной бумаги помещают таблетку, на которую наносят 2 капли исследуемой мочи. Через 2 минуты окраску таблетки сравнивают с цветной шкалой. Наличие ацетона вызывает фиолетовое окрашивание разной интенсивности, согласно шкале, реакцию оценивают, как слабоположительную, положительную и резко положительную.

Нормальные величины: в норме с мочой выделяется 20-50 мг кетоновых тел за сутки.

Клиническое значение: кетонурия наблюдается при диабете, что является критерием правильности подбора пищевого режима, если количество вводимых жиров не соответствует количеству усваиваемых углеводов, то увеличивается количество кетоновых тел. При уменьшении введения углеводов кетонурия не наблюдается. Таким образом, обнаружение кетоновых тел в моче больных сахарным диабетом необходимо для регулирования диеты.

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться: