Серологические реакции: реакция связывания комплемента.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Знать назначение и уметь ставить и учитывать результаты реакции связывания комплемента для определения антител в сыворотке больного.

3. Знать назначение реакции гемолиза и ингредиенты этой реакции.

4. Уметь оценить и правильно зарисовать мазки с завершенным и незавершенным фагоцитозом.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Естественная невосприимчивость организма к инфекционным заболеваниям. «Наследственный иммунитет». Факторы естественного врожденного иммунитета.

2. Гуморальные факторы неспецифического иммунитета.

3. Молекулярные образы патогенов и образ-распознающие рецепторы. Система Toll-like-рецепторов.

4. Антигенпредставляющие клетки, их функции.

5. Система мононуклеарных фагоцитов, функции.

6. Фагоцитоз: стадии, механизмы, виды.

7. Система гранулоцитов, функция.

8. Естественные киллеры, механизмы активации, функция.

9. Система комплемента: характеристика, пути активации.

10. РСК: ингредиенты, механизм, назначение.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 20-33, 134-135.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Микроскопия и зарисовка мазков с завершенным и незавершенным фагоцитозом.

2.Постановка и учет РСК с целью серодиагностики и оформление протокола.

Ингредиенты	Разведения исследуемой сыворотки	Контроль
1: 10	1: 20	1: 40	1: 80	1: 160	1: 320	1: 640	ГС	АГ	К

Исследуемая сыворотка	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1
Антиген в рабочей дозе	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1		0, 1
Комплемент в рабочей дозе	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1	0, 1		0, 1	0, 1
Физ. раствор								0, 3	0, 1	0, 2
Инкубация	При 37^оС 1 час или при 4^оС 18-20 часов
Гемолитическая система рабочая доза	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2	0, 2
Инкубация	При 37^оС 1 час
Результат:
Заключение:

Начинают учет с контрольных пробирок 8, 9, 10, отмечая в графе результат наличие или отсутствие гемолиза, при учете опытных пробирок в результате отмечают РСК+ или РСК -.

ЗАНЯТИЕ №13

Тема: Динамика иммунного ответа. Генетический контроль иммунного ответа. Серологические реакции: агглютинации, РПГА, реакция Кумбса, нейтрализации.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Уметь ставить ориентировочную и развернутую реакцию агглютинации с целью определения вида микроба и оценивать результат.

3. Уметь ставить и оценивать результат РПГА с целью определения титра антител в сыворотке больного.

4. Знать назначение и способы получения препаратов: диагностикум, агглютинирующая выворотка, антитоксическая сыворотка, эритроцитарный диагностикум, анатоксин.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Динамика иммунного ответа: неспецифические механизмы защиты.

2. Специфический иммунный ответ на Т-независимые АГ.

3. Специфический иммунный ответ на Т-зависимые АГ: презентация, процессинг, индукция, эффекторная фаза.

4. Иммунный ответ против внутриклеточных микроорганизмов, опухолевых клеток.

5. Механизмы ограничения иммунного ответа.

6. Первичный и вторичный иммунный ответ. Иммунологическая толерантность.

7. Генетический контроль иммунного ответа.

8. Реакция агглютинации: ингредиенты, ее виды, назначение.

9. РПГА: ингредиенты, назначение.

10. Реакция Кумбса: ингредиенты, назначение.

11. Реакция нейтрализации: виды, ингредиенты, назначение.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 47-57, 58-66, 127-129, 130-132, 135-136.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка реакции агглютинации для определения вида микроба.

А) Ориентировочная реакция агглютинации на стекле.

Ингредиенты: 1. Неизвестная культура микроорганизмов.

2. Агглютинирующая сыворотка Е.coli 1: 5.

3. Физиологический раствор.

Зарисовать полученный результат и сделать заключение.

Б). Постановка и учет развернутой реакции агглютинации для определения вида микроба.

Ингредиенты Разведения диагностической сыворотки

1: 1000 1: 2000 1: 4000 1: 8000 1: 16000 К

Физ. раствор 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0

Агглютинирующая сыворотка 1: 500 Е.coli 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 -

Исследуемая культура по 3 капли во все пробирки

Термостат 18-20 часов

Результат:

Заключение:

Агглютинирующая сыворотка разводится до титра, указанного на этикетке. Титр сыворотки Е.coli – 1: 8000.

2. Постановка и учет РПГА для определения титра антител в сыворотке больного (серологический метод диагностики).

Ингредиенты Разведения сыворотки больного

1: 20 1: 40 1: 80 1: 160 К

Физ. раствор 0, 4 0, 4 0, 4 0, 4 0, 4

Сыворотка больного 1: 10 0, 4 0, 4 0, 4 0, 4 -

Диагностикум эритроцитарный 0, 4 0, 4 0, 4 0, 4 0, 4

Термостат 1 час

Результат:

Заключение:

ЗАНЯТИЕ №14

Тема: Оценка иммунного статуса. Серологические реакции: ИФА, РИА, РИФ, иммуноблотинг. Клеточные реакции.

⇐ Предыдущая 1 234 Следующая ⇒
Поделиться:

Последнее изменение этой страницы: 2017-05-11; Просмотров: 494; Нарушение авторского права страницы