РАБОТА № 1. ТЕСТ ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЛЮКОЗЕ

⇐ ПредыдущаяСтр 5 из 7Следующая ⇒

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: тест толерантности к глюкозе (нагрузка глюкозой или сахарная нагрузка) проводят с целью углубленного исследования углеводного обмена в организме человека при подозрении на недостаточную эндокринную функцию поджелудочной железы (скрытая форма сахарного диабета) или нарушение гликогенообразовательной способности печени.

ХОД ИССЛЕДОВАНИЯ: натощак (утром, через 8 – 10 часов после приема пищи) забирают кровь из пальца (1-я проба). Пациент после этого (в течение 5 мин) выпивает раствор глюкозы в 200 мл воды, из расчета 1 г/кг массы тела (сахароза 1, 5 г/кг). Через 30 минут от времени забора первой пробы забирают 2-ю пробу и через каждые 30 минут забирают пробы в течение 2, 5 часов. На практике достаточно осуществлять следующий забор проб: натощак, затем через 30 минут, 1 час и 2 часа после нагрузки. В каждой из проб определяют концентрацию глюкозы и строят график, откладывая на оси ординат содержание глюкозы, а на оси абсцисс - время забора проб. Полученный график называется сахарная кривая.

У здоровых людей максимальное значение содержания глюкозы в крови наблюдается между 30-й и 60-й минутами. В норме оно не превышает 180 мг% (9, 9 ммоль/л) и к 2-м часам снижается до исходного уровня. При нарушении утилизации углеводов сахарные кривые отличаются от нормальной.

ХОД РАБОТЫ:

на лабораторных занятиях необходимо провести определение содержания глюкозы в трех пробах крови, полученных от пациентов. Первая проба – кровь, взятая натощак; вторая – через 1 час после углеводной нагрузки; третья – через 2 часа после нагрузки. Методика количественного определения глюкозы изложена в работе «Количественное определение глюкозы в крови. Энзиматический (глюкозооксидазный метод».

По результатам определения следует построить график и определить тип сахарной кривой.

РЕЗУЛЬТАТ:

ВЫВОД:

Дата: ________________

ЗАНЯТИЕ № 21

РАБОТА № 1. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПИРОВИНОГРАДНОЙ КИСЛОТЫ В МОЧЕ

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: пировиноградная кислота (ПК) образуется в тканях организма в значительных количествах и является важным метаболитом углеводного обмена. Пути превращения ПК представлены на схеме:

ПРИНЦИП И ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА: ПК в щелочной среде реагирует с 2, 4-динитрофенилгидразином (2, 4-ДНФГ) с образованием 2, 4-динитрофенилгидразона ПК, имеющего коричнево-красный цвет. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации ПК.

ХОД РАБОТЫ: взять две пробирки: контроль и опыт

ПРОБА отмерить	ОПЫТ	КОНТРОЛЬ
Моча Н₂О КОН (25 % спиртовой раствор) Раствор 2, 4-ДНФГ (0, 1 %)	1, 0 мл - 1, 0 мл	- 1, 0 мл 1, 0 мл
Перемешать содержимое обеих пробирок одновременно, 1 минуту.
0, 5 мл	0, 5 мл
Перемешать, инкубация 15 минут при 18^оС ФЭК, синий светофильтр, кювета 5 мм Определяют экстинкцию против контрольной пробы.

РЕЗУЛЬТАТ: Δ Е =.

Расчет проводят по калибровочному графику. Полученный результат (…… мкг) умножают на переводной коэффициент.

С = …. Х 11, 366 = мкмоль/сут.

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

У здоровых людей при сбалансированном пищевом рационе за сутки с мочой выделяется 114-284 мкмоль (10-25 мг) ПК. Содержание ПК в крови в норме составляет 56, 8 - 113, 6 мкмоль/л.

Содержание пировиноградной кислоты увеличивается в крови и моче при авитаминозе и гиповитаминозе В₁, при сахарном диабете, сердечной недостаточности, гиперфункции гипофизарно-адреналовой системы.

ВЫВОД:

Дата _________________

ЗАНЯТИЕ № 22

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ АУДИТОРНАЯ РАБОТА

ПО ТЕМЕ «ОБМЕН И ФУНКЦИИ УГЛЕВОДОВ»

Дата: _________________

ЗАНЯТИЕ № 24

РАБОТА № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩИХ ЛИПИДОВ

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: определение количества общих липидов в сыворотке крови дает информацию о состоянии метаболизма липидов в организме. Общие липиды крови включают: триглицериды, фосфолипиды, холестерин, свободные жирные кислоты, липопротеины.

ПРИНЦИП МЕТОДА: липиды экстрагируются из сыворотки крови смесью спирта и эфира (смесью Блюра). При взаимодействии экстракта липидов с раствором серной кислоты образуется стойкая мелкодисперсная эмульсия, оптическую плотность которой измеряют нефелометрически, по степени мутности смеси.

ХОД РАБОТЫ: взять одну центрифужную пробирку

ПРОБА Отмерить	ОПЫТ
Смесь Блюра (этанол: эфир, 2: 1) Сыворотка крови (без гемолиза) Н₂SO₄ 1%	2 мл 0, 1 мл
Водяная баня, 60 –70^о С, осторожно подогреть пробу до закипания содержимого пробирки. Охладить. Центрифугировать 10 минут при 1500 об/мин. Центрифугат перелить в сухую пробирку.
3 мл Интенсивно размешать, инкубация 10 минут при 18º С. ФЭК, λ = 630 нм, кювета 10 мм. Определить экстинкцию пробы против Н₂О.

РЕЗУЛЬТАТ: Е =

Содержание общих липидов находят по калибровочному графику.

С = г/л.

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Нормальное содержание общих липидов в сывортке крови 4 – 8 г/л.

Повышение общих липидов в крови ( гиперлипемия ) как физиологическое явление наступает через 1-4 часа после принятия пищи, а также наблюдается при ожирении, сахарном диабете, атеросклерозе, гиперлипопротеинемиях, ишемической болезни сердца, гипотиреозе, липоидном нефрозе, циррозе печени, панкреатите. Понижение общих липидов в крови ( гиполипемия ) наблюдается при голодании.

ВЫВОД:

Дата: __________

ЗАНЯТИЕ № 25

РАБОТА № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО ХОЛЕСТЕРИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

(энзиматический метод)

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: в организм человека холестерин поступает с пищевыми продуктами (0, 3 - 0, 5 г) и постоянно синтезируется в печени, почках, надпочечниках, слизистой оболочке тонкого кишечника, стенке артерий, коже. Содержание холестерина в крови увеличивается при нарушении липидного обмена.

ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА:

пероксидаза

Хинониминовый краситель (окисленный) окрашенный

Хинониминовый краситель (восстановленный) бесцветный

Н₂О₂ +

+ 2Н₂О.

Интенсивность окраски красителя прямо пропорциональна концентрации холестерина в пробе.

ХОД РАБОТЫ: взять три пробирки

Проба Отмерить	Опыт	Стандарт	Контроль
Сыворотка крови	0, 02 мл	-	-
Стандарт	-	0.02 мл	-
Дист. вода	-	-	0, 02 мл
Рабочий реактив	2, 0 мл	2, 0 мл	2, 0 мл

Пробы перемешать и инкубировать 15 минут при температуре 20 – 25⁰С или 10 минут при 37⁰С.

Фотометрия против контроля при l = 490-520 нм, кювета 5 мм.

РЕЗУЛЬТАТ: Е_о =

Е_ст=

С_ст = 5, 17 ммоль/л

_·

Ест

РАСЧЁТ:

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Содержание общего холестерина в крови у взрослых составляет 3, 64 - 6, 76 ммоль/л.

Повышение концентрации холестерина в крови ( гиперхолестеринемия ) наблюдается при атеросклерозе, сахарном диабете, механической желтухе, нефрозе, гипотиреозе, гиперлипопротеинемии II-IV типа. Понижение холестерина в крови ( гипохолестеринемия ) наблюдается при гипертиреозе, голодании, анемии, туберкулезе, раковой кахексии, лихорадочных состояниях, паренхиматозной желтухе, циррозе печени.

ВЫВОД:

Дата: ________________

ЗАНЯТИЕ № 26

⇐ Предыдущая 1 2 3 456 7 Следующая ⇒

Последнее изменение этой страницы: 2017-03-15; Просмотров: 328; Нарушение авторского права страницы