Сапонины. Анализ ЛРС, содержащего сапонины

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Уметь: проводить качественное химическое и хроматографическое обнаружения сапонинов в ЛРС.

2. Знать: химический состав, действующие вещества, их формулы; методы выделения, очистки, количественного определения сапонинов в ЛРС; медицинское применение ЛРС и препаратов, содержащих сапонины.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Определение понятия «сапонины».

2. Распространение сапонинов в растительном мире, локализация по органам и тканям.

3. Химическая структура сапонинов и их классификация.

4. Физико-химические и биологические свойства сапонинов.

5. Методы выделения сапонинов из ЛРС и способы их очистки.

6. Методы обнаружения и количественного определения сапонинов в ЛРС.

7. Фрмулы: a- и b-амирин, олеаноловая и урсоловая кислоты, глицирризиновая кислота, диосгенин, даммаран.

8. Применение ЛРС и препаратов, содержащих сапонины.

ЛИТЕРАТУРА

1. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991 г, с. 251-266, 271-272, 275-277, 281-284, 483-484, 418-419.

2. Фармакогнозия. Атлас. Под ред. Гринкевич Н.И., Ладыгиной Е.Я. М., 1989, с. 295-331.

3. Химический анализ лекарственных растений. М., 1983, с. 41-56.

4. Долгова А.А., Ладыгина Е.А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М., 1977, с. 118-128.

5. Коноплёва М.М. " Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества ". - Витебск: ВГМУ, 2002, с.

6. Фармакогнозия. /Под. ред. проф. Шелюто В.Л., Витебск: ВГМУ, 2003, с. 181 - 196.

 

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Провести качественные реакции и хроматографическое обнаружение сапонинов в ЛРС.

1) Реакция, основанная на биологических свойствах сапонинов.

Гемолиз эритроцитов

Приготовить извлечение: взять плоскодонную колбу на 30 мл, по­местить в нее 0, 5 г измельченного сырья. Добавить 10 мл изотонического раствора хлорида натрия. Нагреть на кипящей водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения профильтровать через ватный тампон.

К 1 мл извлечения добавить 1 мл 2% взвеси эритроцитов в изотоническом растворе. Раствор становится прозрачным, ярко-красным.

2 ) Реакция, основанная на физических свойствах сапонинов.

Приготовить извлечение: взять плоскодонную колбу на 30 мл, по­местить в нее 0, 5 г измельченного сырья. Добавить 25 мл дистиллированной воды. Нагреть на кипящей водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения профильтровать через ватный тампон. Использовать для качественных реакций и количественного определения.

Проба пенообразования

В 2 пробирки одинакового диаметра и высоты внести по 0, 5 мл извлечения № 2. В одну пробирку прибавить 1 мл 0, 1 н р-ра HCl, в другую - 1 мл 0, 1 н р-ра NaOH, затем пробирки сильно встряхнуть. В обеих пробирках образуется стойкая пена (сапонины).

Реакции, основанные на химических свойствах сапонинов.

Осаждение сапонинов

· К 0, 5 мл извлечения прибавить 3 капли насыщенного раствора среднего ацетата свинца. Образуется осадок (тритерпеновые сапонины).

· К 0, 5 мл извлечения прибавить 3 капли насыщенного раствора основного ацетата свинца. Образуется осадок (стероидные сапонины).

Реакция окрашивания

К 1 мл извлечения прибавить равный объем хлороформа и 6-8 капель концентрированной серной кислоты. Нижний слой окрашивается в желтый цвет.

Обнаружение сапонинов в ЛРС методом хроматографии в тонком слое.

Поместить в пробирку 0, 2 г измельченного сырья, добавить 3 мл 70 % этанола, нагреть до кипения на спиртовке и после настаивания в течение 10 минут отфильтровать.

· На стартовую линию хроматографической пластинки " Силуфол" нанести капилляром спиртовое извлечение и рядом " свидетель" (спиртовой р-р чистого сапонина). Пластинку поместить в хроматографическую камеру с системой растворителей:

АЦЕТОН: ЭТАНОЛ: ВОДА: ГИДРОКСИД АММОНИЯ (20: 7: 2: 6).

· Хроматографирование вести 60 мин (пробег растворителя 13 см), затем хроматограмму высушить на воздухе под тягой.

· Хроматограмму обработать 25 % спиртовым раствором фосфорно-молибденовой кислоты и прогреть в сушильном шкафу при температуре 105-110⁰ С в течение 5 минут.

· Отметить характер окраски пятен, рассчитать величины Rf и сравнить их со свидетелем.

Хроматограмму зарисовать и результаты записать в протокол.

Задание 2. Провести количественное определение сапонинов в сырье (определение пенного индекса).

Приготовить разведения исходного раствора от 1: 100 до 1: 1000000. Взять 4 пробирки, пронумеровать их. В первую поместить 5 мл исходного извлечения (полученного в п. «реакция, основанная на физических свойствах») и 5 мл воды, аккуратно перемешать. В остальные поместить по 9 мл дистиллированной воды. Из пробирки №1 взять 1 мл извлечения, перенести в пробирку №2, аккуратно перемешать. Повторить операцию 2 раза.

Интенсивно встряхивать все пробирки одновременно в течение 15 секунд. Оставить в штативе на 15 минут. Оценить наличие пены и высоту ее столбика в каждой из пробирок. Отметить разведения, в которых пена отсутствует. Наибольшее разведение из тех, в которых реакция пенообразования положительна, составит пенный индекс.

Сделать заключение о доброкачественности сырья.

 

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 15

Сапонины. ЛР и ЛРС, содержащие сапонины

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Уметь:

· определять ЛР по внешним признакам на гербарных образцах и отличать их от возможных примесей;

· определять подлинность сырья макро- и микроскопическим методами анализа и давать заключение о качестве сырья с использованием НД;

2. Знать: латинские названия, географическое распространение, условия местообитания, районы культуры; сроки, приемы сбора, сушки и хранения ЛРС; химический состав, действующие вещества, их формулы; медицинское применение ЛРС и препаратов, содержащих сапонины.

ОБЪЕКТЫ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ:

солодка голая, аралия маньчжурская, солодка уральская, заманиха высокая, синюха голубая, женьшень, астрагал шерстистоцветковый, диоскорея ниппонская, конский каштан, рапонтикум сафлоровидный (левзея сафлоровидная), якорцы стелющиеся.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Определение понятия «сапонины».

7. Латинские и русские названия ЛРС, производящих растений и семейств всех объектов изучаемой темы.

8. Морфологическая характеристика растений, их ареал, места обитания и районы возделывания.

9. Сроки и рациональные приемы заготовки, первичной обработки, сушки и хранения ЛРС.

10. Внешние признаки ЛРС.

11. Диагностические микроскопические признаки порошок корня солодки.

12. Химический состав ЛРС, содержащего сапонины.

13. Применение ЛРС и препаратов, содержащих сапонины.

ЛИТЕРАТУРА

1. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991 г, с. 251-266, 271-272, 275-277, 281-284, 483-484, 418-419.

2. Фармакогнозия. Атлас. Под ред. Гринкевич Н.И., Ладыгиной Е.Я. М., 1989, с. 295-331.

3. Химический анализ лекарственных растений. М., 1983, с. 41-56.

4. Долгова А.А., Ладыгина Е.А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М., 1977, с. 118-128.

5. Правила сбора и сушки лекарственных растений. Сборник инструкций. М., 1985, с. 15, 21, 76, 89, 101, 232, 312.

6. ГФ РБ. - Молодечно: Типография «Победа», 2008, т.2, с. 303, 343, 367, 368, 421, 423.

7. Коноплёва М.М. " Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества ". - Витебск: ВГМУ, 2002.

8.Фармакогнозия. /Под. ред. проф. Шелюто В.Л., Витебск: ВГМУ, 2003, с. 181 - 196.

 

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Определить подлинность корня солодки.

1) Провести макроскопический анализ корня солодки.

2) Провести микроскопический анализ порошка корня солодки. Приготовить микропрепарат, окрашенный реактивом на одревесневшие элементы, отметить диагностические признаки и зарисовать их.

3) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ РБ и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним и анатомическим признакам.

Задание 2. Определить подлинность листьев левзеи сафлоровидной.

1) Провести макроскопический анализ листьев левзеи.

2) Провести микроскопический анализ листьев левзеи. Приготовить поверхностный препарат листа, изучить его при малом и большом увеличениях, зарисовать и обозначить диагностические признаки.

3)Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ РБ и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним и анатомическим признакам.

Задание 3. Определить подлинность корневищ с корнями синюхи.

1) Провести макроскопический анализ корневищ с корнями синюхи, выделить диагностические признаки.

2) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ ХI и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним признакам.

Задание 4. Изучить внешний вид ЛР по гербарным образцам: конский каштан, астрагал шерстистоцветковый, аралия маньчжурская, заманиха, женьшень, диоскорея ниппонская, якорцы стелющиеся.

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 16

⇐ Предыдущая234567891011Следующая ⇒

Поделиться: