Вирион, капсид, нуклеокапсид, тип симметрии, суперкапсид.

ВИРУСОЛОГИЯ

1. Вирусы относятся к живым, но их нельзя назвать орг-мами. Отличия от живых систем:

1) малые размеры;

2) очень простое строение вириона – геном (ДНК или РНК) и капсид (белковая оболочка);

3) нет клеточного строения – нет цитоплазмы, мембран, рибосом;

4) у вириона есть только 1 вид нуклеиновой к-ты – ДНК или РНК;

5) нет способности к росту и бинарному делению;

6) особая ступень паразитизма – вирусы паразитируют на молекулярном (генетическом) уровне – это отличие от гельминтов (паразитируют в орг-ме) и малярийных плазмодиев и гонококков (паразитируют в клетке);

7) способны объединять собственный геном с геномом клетки-хозяина;

8) не могут существовать без клетки-хозяина;

9) могут иметь фрагментированный геном.

Вирусы – облигатные паразиты, так как не могут существовать без клетки-хозяина, потому что его репродукция (увеличение численности вирусных частиц) возможна только в клетке хозяина. Вирусы не способны к росту и делению.

Вирион, капсид, нуклеокапсид, тип симметрии, суперкапсид.

Вирио́ н — полноценная вирусная частица, состоящая из нуклеиновой кислоты и капсида (оболочки, состоящей из белка и, реже, липидов) и находящаяся вне живой клетки.

Основной компонент вириона – капсид (белковая оболочка), кот-й содержит внутри нуклеиновую к-ту. Нуклеокапсид – нуклеиновая к-та, окружённая капсидом.

Капсиды построены из белковых субъединиц (капсомеров). Капсомер – молекула белка. У многих вирусов, кроме нуклеиновой к-ты, есть ещё специальные ферменты.

По типу строения вирионов выделяют:

1) спиральный тип симметрии – вирусы гриппа, парагриппа и др;

2) квазисферический – кубический или икосаэдральный тип симметрии;

3) смешанный у Т-чётных бактериофагов – головка в виде многогранников, хвост – спиралью.

Тип симметрии определяется только нуклеокапсидом, суперкапсид при этом не учитывают. Суперкапсид – это дополнительная оболочка, или пеплос.

Критерии современной классификации вирусов.

1.Нуклеиновая кислота: тип, число нитей, процентное содержание, молекулярный вес, содержание гуанина и цитозина.

2.Морфология: тип симметрии или псевдосимметрия, число капсомеров для вирусов с кубической симметрией, наличие внешней липопротеидной оболочки, форма, размеры вирионов.

3.Биофизические свойства: константа седиментации, плавучая плотность.

4.Белки: количество структурных белков и их локализация, аминокислотный состав.

5.Липиды

6.Размножение в тканевых культурах: особенности репликации.

7.Круг поражаемых хозяев: особенности патогенеза инфекционного процесса; онкогенные свойства.

8.Устойчивость к физическим и химическим факторам (гамма-лучи, термоинактивация при 37⁰и 56⁰, действие жирорастворителей и отдельных катионов).

9.Антигенные свойства.

4. Типы вирусных геномов

РНК-геномы

1.Одноцепочечная единая РНК, обладающая матричной активностью (позитивная РНК) - вирус полиомиелита и др.

2.Одноцепочечная единая РНК, не обладащая матричной активностью (негативная РНК). Вирион имеет транскриптазу - парамиксовирусы, рабдовирусы и др.

3.Одноцепочечная фрагментированная РНК, не обладающая матричной активностью (негативная РНК). Вирион имеет транскриптазу - ортомиксовирусы.

4.Двухцепочечная фрагментированная РНК. Вирион имеет транскриитазу - реовирусы.

5.Вирусы, геном которых представлен двумя идентичными нитями позитивной РНК (диплоидный геном). Вирионы имеют обратную транскриптазу- ретровирусы.

ДНК-геномы

6.Одноцепочечная линейная ДНК - парвовирусы.

7.Одноцепочечная кольцевая ДНК - фаги М13, Ø X174.

8.Двухцепочечная линейная ДНК - вирус герпеса и др.

9.Двухцепочечная кольцевая ДНК - паповавирусы, вирус гепатита В и др.

10.Двухцепочечная ДНК с ковалентносвязанным терминальным гидрофобным белком - аденовирусы.

11.Двухцепочечная ДНК, замкнутая на каждом конце ковалентной связью - вирус оспы.

5. Методы культивирования вирусов.

Вирусы размножаются только в живых клетках. Культивирование вируса происходит на уровне орг-ма подопытного животного и на уровне культуры клеток (то есть вне орг-ма). Вирусы имеют тканевую и типовую специфичность. Поэтому при выделении неизвестного вируса одномоментно заражают 3-4 культуры клеток. Чаще используют эмбриональные ткани (куриный эмбрион). Вирусы оспы хорошо размножаются в хорион-аллантоисной оболочке, вирус паротита – в амнионе, вирус гриппа – в амнионе и аллантоисе, вирус бешенства – в желточном мешке. Берут 12-дневные эмбрионы.

При невозможности выделить и идентифицировать вирус стандартными методами (на культуре клеток и куриных эмбрионах) инфекционный материал вводят лабораторным животным (мыши, кролики, обезьяны), после развития инфекционного процесса проводят повторное заражение чувствительных клеточных культур.

Заражение лабораторных животных.

Методы заражения животных разнообразны: внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, интраназальный, заражение в мозг и другие.

Заражение в мозг. (Метод применяют при работе с нейротропными вирусами). Для заражения чаще используют белых мышей. Левой рукой плотно прижимают мышь к столу, большим и указательным пальцами оттягивают кожу головы назад. Туберкулиновым шприцем с предохранительной муфтой на игле прокалывают лобную кость несколько латеральнее средней линии и вводят 0, 02-0, 03 мл материала. Игла вводится на глубину 1, 5-2 мм, при этом отчетливо ощущается " провал" в полость черепа.

При заражении новорожденных мышей (2-3-дневного возраста) их лучше брать руками в перчатках, чтобы после заражения мышата не имели постороннего запаха (пота, дезинфицирующих веществ, антибиотиков и т.д.), так как самка съедает мышат, имеющих посторонний запах. Материал вводят в количестве 0, 01 мл. Вытекающую жидкость удаляют сухим стерильным ватным тампоном без дезинфицирующих веществ. После заражения мышат помещают в отдельную банку (в свое гнездо), а через 20-30 минут подсаживают к ним самку.

Больных мышат самка также съедает. Поэтому надо уловить момент извлечения зараженных животных для завершения опыта. Первые два дня просматривают мышат 1-2 раза в день, а затем чаще. Через 3-4 дня здоровый мышонок в два раза больше зараженного.

Культуры клеток (тканей).

Культуры ткани - это клетки ткани выращенные вне организма на специальной питательной. среде. Клетки ткани в искусственных условиях сохраняю? присущи им обмен и восприимчивость к определенным вирусам. Для культивирования вирусов особенно пригодны клетки с быстрым ростом. По этой причине широко применяют эмбриональные ткани (фибробласты куриных эмбриовов, клетки человека к др., а также культуры тканей опухолей (клетки-Неla, Нер-2 и др.).

Кулътивирование клеток может призойти в специальных флаконах (колбы-матрацы, флаконы Карреля) и в пробирках. Культура клеток для роста должна иметь какую-либо опору, например, стенку пробирки.

В выросшую культуру ткани, которая покрывает стенку сосуда в виде однослойного клеточного пласта, засевают материал, содержащий вирус. Работу производят в стерильных условиях. Для подавления роста микрофлоры вируссодержащий материал предварительно обрабатывают антибиотиками, чаще пенициллином и стрептомицином. Питательной средой для культуры ткани могут быть различные растворы, сослав которых приближается к составу жидкости организма (синтетическая среда 199, солевой раствор Хенкса с сывороткой, гидролизат лактальбумина с сывороткой и другие).

9. Признаки размножения вирусов в курином эбрионе. " эффект карликовости" (замедление роста), мумификация, шарообразная форма зародыша и гибель на 3—6-й день после заражения.

Сущность метода бляшек.

В основе метода лежит появление в монослое зараженных вирусом клеток обесцвеченных участков, состоящих из дегенерированных клеток. Эти участки, получившие название бляшек, представляют собой колонии вируса, образующегося из одной вирусной частицы.

Метод заключается в следующем. В специальном флаконе на стенке монослой клеток, затем удаляют питательную среду. Клетки заражаю вирусом и заливают агаром, содержащим индикатор нейтральный красный. Там, где происходит рост клеток, среда изменится в кислую сторону и индикатор окрасится в розовый цвет. На тех участках, где клетки погибли под действием вируса, рН среды и, следовательно, цвет индикатора не изменяется. Такие островки неокрашенной среды имеют вид беловатых бляшек.

Типы вирусных инфекций.

1.Вирусы с непродолжит пребыванием вируса в организие

-острая; -бессимптомная; -абортативная инфекция

2. Вирусы с продолжит пребывание вируса в организме

-латентные; -Хронические; -медленные

Что такое вирогения?

(от вирусы и греч. -geneia — создание, происхождение), форма сосуществования вируса с клеткой, при к-рой геном вируса включается в хромосому клетки. При В. не происходит автономной репродукции вируса, а его нуклеиновая к-та реплицируется совместно с ДНК клетки-хозяина. Вирусы, обусловливающие В., наз. умеренными. К ним относятся бактериофаги. вызывающие лизогению, а также онкогенные вирусы, под действием к-рых в заражённых клетках наблюдаются наследств, изменения (трансформация), проявляющиеся в их неограниченном росте и делении. В трансформированных клетках геном вируса содержится в виде вирусной ДНК — про-вируса.

Основные классы плазмид.

КЛАСС	ФУНКЦИЯ
F-плазмиды	Донорные функции
R-плазмиды	Устойчивость к лекарственным препаратам
Col-плазмиды	Синтез колицинов
Ent-плазмиды	Синтез энтеротоксинов и факторов адгезии
Hly-плазмиды	Синтез гемолизинов
Биодеградативные плазмиды	Разрушение различных органических соединений

Что такое фаготипирование?

Фаготипирование (лизотипирование, фаготипаж) — это метод дифференциации бактерий при помощи бактериофагов. Микробы можно типировать путем изучения свойств их умеренных фагов и по чувствительности к набору специфических бактериофагов.
Наибольшее значение фаготипирование имеет для совершенствования эпидемиологического анализа и диагностики инфекционных заболеваний.