Количественное определение кислоты фолиевой

4.2.1 Обратное алкалиметрическое титрование.

Метод основан на образовании натриевых солей за счет незамещенных карбоксильных групп. Титрант нейтрализует карбоксильную группу в γ -положении:

Для проведения определения навеску порошка растертых таблеток фолиевой кислоты массой 0, 5 г (точная навеска) растворяем в избытке 0, 1 М раствора гидроксида натрия (25 мл), а затем медленно титруем несвязавшееся количество щелочи 0, 1 М раствором хлороводородной кислоты в присутствии индикатора тимолфталеина:

NaOH + HCl → NaCl + H₂O

В КТТ синий раствор индикатора обесцвечивается (рис. 10).

На титрование избытка щелочи израсходовано соляной кислоты (К=1, 01):

1) 24, 2 мл;

2) 24, 2 мл;

3) 24, 1 мл,

что в среднем дает

Титр раствора натрия гидроксида (К=0, 98) по фолиевой кислоте:

Рисунок 10. Окраска индикатора тимолфталеина.

 

Для определения средней массы одной таблетки фолиевой кислоты (Р) взвешиваем на аналитических весах 20 таблеток и делим полученное значение на 20:      

При использовании метода заместительного титрования содержание кислоты фолиевой (Х, г) в расчете на одну таблетку найдем по формуле:

где V₁ и V₂ – соответственно объемы титрованных растворов, взятого в избытке и пошедшего на титрование, мл;

К₁ и К₂ – поправочные коэффициенты титровальных растворов;

Т – титр раствора по определяемому веществу, г/мл;

Р – средняя масса одной таблетки, г;

 – навеска лекарственного вещества, взятая на анализ, г.

Подставляем значения:

 

4.2.2. Фотоколориметрическое  определение.

Количественное определение содержания фолиевой кислоты в препарате проводили на фотоколориметре модели  APEL AP-101 фирмы Медтехкор, Санкт-Петербург, РФ (рис. 11).

Рисунок 11. Фотоколориметр APEL AP-101

Около 1 г порошка растертых таблеток (точная навеска) помещаем в мерную колбу емкостью 100 мл, прибавляем 50 мл воды, 2 мл концентрированного раствора аммиака и  перемешиваем. После этого доводим объём раствора водой до метки и фильтруем, отбрасывая первые 15 мл фильтрата. 10 мл полученного фильтрата помещаем в мерную колбу емкостью 100 мл, доводим объём до метки 3%-ным раствором гидрофосфата калия и перемешиваем.

Параллельно готовим стандартный раствор фолиевой кислоты. Для этого около 0, 05 г стандартного образца фолиевой кислоты (точная навеска) растворяем в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака в мерной колбе ёмкостью 100 мл. Доводим объем раствора водой до метки и перемешиваем. 1 мл полученного раствора помещаем в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем раствора до метки 3%-ным раствором гидрофосфата калия.

В две пробирки наливаем по 5 мл стандартного раствора фолиевой кислоты (пробирки 1 и 2). В две другие пробирки наливаем по 5 мл испытуемого раствора (пробирки 3 и 4). В 5-ю пробирку наливают 5 мл 3%-ного раствора гидрофосфата калия.

В пробирки 1 и 3 наливаем по 1 мл 0, 4%-ного раствора перманганата калия, а в пробирки 2, 4 и 5 - по 1 мл воды. Содержимое пробирок перемешиваем и оставляем на 3 мин.

При этом в пробирках 1 и 3 протекают реакции окислительного гидролиза с образованием птерин-6-карбоновой кислоты и n-аминобензоилглутаминовой кислоты:

 

Затем во все пробирки приливаем по 1 мл 2%-ного раствора нитрита натрия и по 1 мл 25%-ного раствора хлористоводородной кислоты, хорошо перемешиваем и оставляем на 2 мин. При этом происходит образование сои диазония:

Во все пробирки приливаем по 1 мл 5%-ного раствора сульфамата аммония и осторожно перемешивают до прекращения выделения пузырьков газа:

Во все пробирки приливаем по 1 мл 0, 1%-ного раствора N-(1-нафтил)-этилендиамина дигидрохлорида, перемешивают и оставляют на 10 мин. В результате происходит образование азокрасителя:

Измеряем оптическую плотность растворов на фотоколориметре при длине волны 550 нм в кювете толщиной 1 см относительно контрольного раствора (пробирка 5).

Содержание фолиевой кислоты в одной таблетке, г, вычисляем по формуле:

где D₁, D₂, D₃, D₄ – оптические плотности растворов в пробирках 1, 2, 3. 4;

С – концентрация стандартного раствора фолиевой кислоты, мг/мл;

а – навеска препарата, г;

Р – средняя масса таблетки, г.

При расчетах использовали полученные значения оптической плотности исследуемых растворов:

D₁ = 0, 889;

D₂ = 0, 441;

D₃ = 0, 883;

D₄ = 0, 440.

Концентрация стандартного раствора фолиевой кислоты равна 0, 05/100/50 = 0, 00001 г/мл.

На основание полученных значений находим содержание кислоты фолиевой в таблетке (г):

5. Заключение, выводы, рекомендации

Важным свойством фолиевой кислот является се способность к окислительно-восстановительным превращениям. Это свойство позволяет ей выполнять определенные биологические функции в организме (участие в обмене одноуглеродных радикалов) и может быть использовано в анализе препаратов, ее содержащих.

В результате проведенного исследования, нами были изучены методы синтеза препаратов, являющихся производными птерина, их классификация и фармакологическое применение. Из производных птерина витаминной активностью обладает только фолиевая кислота и кальция фолат, используемые для профилактики авитаминоза и предотвращения негативных последствий применения метотрексата.

Быль проведен литературный обзор с целью изучения классических, методов анализа производных птерина, и новых альтернативных разработок.

Химические методы идентификации отличаются простотой выполнения и хорошей наглядностью, но несколько уступают в простоте методу УФ-спектроскопии. Методы количественного определения, при чем как химические, так и физико-химические, являются достаточно трудоемкими.

 Химический метод алкалиметрического титрования, будучи относительно простым в выполнении, не обладает высокой точностью, что еще усугубляется невысоким содержанием фолиевой кислоты в одной таблетке. Спектрофотометрическое определение дает более точные результаты, но требует большой затраты времени и расхода реактивов.

На основании проведенного исследования можно сделать выводы:

1) Исследуемый препарат является фолиевой кислотой.

2) Содержание кислоты фолиевой в одной таблетке соответствует требования ФС (0, 9-1, 1 мг).

3) Качество фармацевтического препарата «Фолиевая кислота» Борисовского ЗМП (Беларусь) удовлетворяет требованиям НД.

6. Источники:

1. Абакшонок А.В., Еремин А.Н., Агабеков В.Е. Взаимодействие фолиевой кислоты с наночастицами серебра. // Известия Национальной Академии наук Беларуси. – Мн., 2014. № 2, С. 19-26.

2. Абдуева Ф. М., Бычкова О. Ю., Бондаренко И. А. Терапевтическая фармакология: Практическое пособие для студентов и врачей. Харьков: ХНУ им. В.Н. Каразина 2011.

3. Арзамасцев Л. П. Фармацевтическая химия: Учеб. Пособие. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004.

4. Бауэр Г., Энгельгард Х., Хеншен А., Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии: Пер. с англ./Под ред. А. Хеншен и др.—М.: Мир, 1988.

5. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. – М.: МЕДпресс-информ, 2007.

6. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998.

7. Венгеровский А.И. Лекции по фармакологии, М.: Физико-математическая литература, 2007

8. Витамины и минеральные вещества: Полная энциклопедия. Сост.: Т.П.Емельянов. – СПб. 2001.

9. Горбачев В.В., Горбачева В.Н. Витамины, микро- и макроэлементы. Справочник. — Мн.: Книжный Дом; Интерпрессервис, 2002.

10. Государственная фармакопея СССР. X-е издание. – М.: медицина, 1968.

11. Ерина О.В., Хохлов В.Ю., Селеменев В.Ф. Спектрофотометрическое определение рутина, аскорбиновой, никотиновой и фолиевой кислот в их смесях. // «Заводская лаборатория. Диагностика материалов». № 8, 2011. Том 77. С. 20-23.

12. Зыков А.В. Экстракция витаминов группы В и их определение в фармацевтических препаратах. Автореф. дис. канд. хим. наук. – Воронеж, 2013.

13. Иванова А.А. Влияние модифицированных витаминов с антиоксидантным действием на эффективность и токсичность противоопухолевой терапии в эксперименте. Автореф. дис. канд. мед. наук. – Томск, 2009.

14. Крыльский Д.В., Сливкин А.И., Брежнева Т.А. Практикум по фармацевтической химии. – Воронеж: Издательско-полиграфический центр Воронежского государственного университета, 2008.

15. Кулешова М. И. и др. Анализ лекарственных форм, изготовляемых в аптеках/М. И. Кулешова, Л. Н. Гусева, О. К. Сивицкая. – Пособие. 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Медицина, 1989.

16. Кухта В.К., Морозкина Т.С., Таганович А.Д. Биологическая химия. – М.: Медицина, 2008.

17. Лифляндский В. Г. Витамины и минералы. – М: ОЛМА Медиа Групп; 2010.

18. Масякова Е. Н. Спектрофотометрический анализ смесей водорастворимых витаминов с применением хемометрических алгоритмов. Автореф. дис. канд. хим. наук. – Томск, 2009.

19. Международная Фармакопея. 3-е издание, том 2. Спецификация для контроля качества лекарственных препаратов. – Женева: ВОЗ, 1983.

20. Морозкина Т. С. Витамины. Краткое рук. для врачей и студентов мед., фармацевт. и биол. Специальностей /Т. С. Морозкина, А. Г. Мойсеёнок. — Мн.: ООО«Асар», 2002.

21. Патент № 2497825 РФ, МПК⁷ C07F5/00. Конъюгат фолиевой кислоты и способ его получения / Павич Т.А., Воробей А. В., Соловьев К. Н.

22. Племенное В. В. Введение в химию природных соединений. Казань, 2001.

23. Ровбуть Т.И. Показатели витаминной обеспеченности и окислительного стресса у детей Гродненской и Гомельской областей Беларуси. Автореф. дис. канд. мед. наук. – Минск, 2007.

24. Салахов И.А. Унифицированные подходы к анализу метаболитов, химиотерапевтических, анальгезирующих и противовоспалительных лекарственных средств методом ВЭЖХ Автореф. дис. канд. мед. наук. – Казань, 2010.

25. Сирицо С.И. Обращено-фазовая изократическая ВЭЖХ для аналитического контроля водорастворимых витаминов в многокомпонентных рецептурах. Автореф. дис. канд. хим. наук. – Москва, 2008.

26. Сливкин А. И., Селеменев В. Ф., Суховерхова Б. А. Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств: Учеб. пособие / Под ред. В. Г. Артюхова, А. И. Сливкина. — Воронеж: Издательство Воронежского государственного университета, 1999.

27. Смирнов В.А., Климочкин Ю.Н. Витамины и коферменты: Учеб. пособие – Самара: Самар. гос. техн. ун-т, 2008.

28. Солдатенков А. Т., Колядина Н.М., Шендрик И.В. Основы органической химии лекарственных веществ. – М: Химия, 2001.

29. Тыжигирова В.В., Филиппова С.Ю. Применение ИК– и УФ– спектроскопических методов в фармацевтическом анализе. Учебное пособие по фармацевтической химии. ГОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет РОСЗДРАВА РФ, 2010.

30. Челнакова Н.Г. Экспериментальное обоснование и практическая реализация программы коррекции массы тела с использованием фактора питания (БАД). Автореф. дис. канд. тех. наук. – Кемерово, 2014.

31. Шаповалова Е.М. Механизмы гемостатических сдвигов при отсутствии, дефиците и избытке витаминов с антиоксидантными свойствами в рационе питания. Автореф. дис. канд. биол. наук. – Челябинск, 2010.

32. Шелеметьева О.В. Определение витаминов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в премиксах, биологически активных добавках и пищевых продуктах. Автореф. дис. канд. хим. наук. – Томск, 2009.

33.  Материалы сайта http: //www.provisor.com.ua.

34. Материалы сайта http: //ribeyebar.ru.

35. Материалы сайта https://ru.wikipedia.org.

⇐ Предыдущая12

Поделиться: