|
Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
|
|
Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ (ГЕПАТИТЫ В,С, D ). ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКАСтр 1 из 3Следующая ⇒
Занятие № 2.3.2 КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ (ГЕПАТИТЫ В,С, D ). ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
изучить биологические свойства возбудителей гепатитов В, С, D и принципы их вирусологической диагностики; классифицировать антимикробные препараты для идентификации, лечения и профилактики гепатитов В, С, D. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
1. Характеристику биологических свойств возбудителей. 2. Основные симптомы заболеваний, вызываемых вирусами гепатитов В, С, D. 3. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм передачи инфекций. 4. Принципы лабораторной диагностики гепатитов В, С, D. 5. Основы профилактики гепатитов. Препараты для диагностики, лечения и профилактики.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ: · составлять алгоритм лабораторного обследования больного гепатитом; · проводить учет и интерпретировать результаты вирусологических · классифицировать препараты в соответствии с их назначением.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:
Работа № 1. Строение вирусов гепатитов В, D ,С Цель: изучить морфологию вирусов гепатитов В, D, С. Самостоятельная работа: используя атлас, теоретическую справку, зарисовать строение вирусов гепатитов В, D, С, описать, сделать вывод.
В DС Вывод: 1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 2. Серологическая диагностика гепатитов А) Цель: определить титр антител в парных сыворотках пациента с помощью реакции непрямой гемагглютинации, поставленной с парными сыворотками больного с подозрением на вирусный гепатит В. В качестве диагностикума использовали эритроцитарныйHBs-Ag.Определить клиническую стадию болезни. Самостоятельная работа: учесть результат реакции непрямой гемагглютинации,сделать вывод. Описать реакцию по схеме. Направление:___________________________________________________________________ Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Механизм:
Постановка: Титры 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 КС КД
1-ая неделя
2-ая неделя
Результат:______________________________________________________________________ Вывод:________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) Цель:определить форму течения гепатита В. Решить ситуационные задачи. Задача 1 В клинику поступил больной с циррозом печени. У больного взята кровь на выявление НВе-Ag и HBs-Ag. Поставлена реакция ИФА. Самостоятельная работа: учесть готовый результат. Сделать вывод: при какой форме заболевания выявляются НВе-Ag и HBs-Ag. Направление:___________________________________________________________________ Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка Опыт Негативный контроль Позитивный контроль
HBs-Ag
НВе-Ag
Результат:______________________________________________________________________ Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ Задача 2 У больного взята сыворотка для выявления Ig М и IgG к НВс-аg вируса гепатита В. Поставлена реакция ИФА. Самостоятельная работа: учесть готовый результат. Сделать вывод о стадии заболевания. Направление:___________________________________________________________________ Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка: Опыт Негативный контроль Позитивный контроль
IgMкHBс-Ag
IgG к НВс-Ag
Результат:______________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________ Подпись преподавателя_________________________________________________________
Самостоятельная работа студента во внеурочное время: 1. Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).
Вакцина «Энджерикс» 2.____________________________________________________________________________ 3.____________________________________________________________________________ 4.____________________________________________________________________________ 5.____________________________________________________________________________ 6.____________________________________________________________________________
АНТИМИКРОБНЫЕ ПРЕПАРАТЫ Выявление HBeAg (сердцевинный антиген вируса гепатита В). HBеAg (антиген инфекционности) представляет собой сердцевинный белок, кодируется тем же геном, что и НBсoreAg. Обнаруживается в кровив период вирусемии, параллельно с HBsAg, начиная с конца инкубационного периода. В этом периоде с высокой вероятностью методом ПЦР обнаруживается HBV-DNA(ДНК ВГВ). Вероятность заражения здорового человека при попадании HBеAg "+" крови в десятки раз выше, чем в том случае, если сероконверсия наступила, HBeAg исчез и заменился anti-HBe. В крови циркулирует недолго, меньше, чем HBsAg, исчезает к концу желтушного периода (примерно к 9 неделе с начала болезни). Циркуляция антигена инфекционностиболее 2 мес является признаком хронизации гепатита В.Т.о. этот показатель может служить маркером контагиозности хронических НВsAg - носителей. При хроническом ВГВ с высокой репликативной активностью возможно обнаружение его в течение нескольких лет. Этот антиген циркулирует только в присутствии HBsAg, поэтому целесообразно обследовать именно HBsAg-позитивные сыворотки. В лабораторной диагностике, наряду с серологическим выявлением вирусных антигенов или антител, используется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), который делает возможным определение ДНК вируса ГВ в сыворотке крови и в гепатоцитах. Провирус ВГВ при хронической форме заболевания выявляется также с помощью поли-меразной цепной реакции. Чувствительность метода составляет 10-100 молекул ДНК ВГВ в 1 мл. С помощью метода встречного иммуноэлектрофореза антигены вируса выявляются в 70% случаев, а с помощью реакции преципитации в геле - в 55-60%. Основное место в диагностике гепатита В занимает ИФА, дающая положительный результат исследований в 90-95% случаев. В последнее время применяют метод микроиммунофильтрации, который используется для экспресс-диагностики. Принцип основан на селективной фильтрации микрочастиц. Окрашенные микрочастицы, покрытые антигенами или антителами, служат визуальным сигналом для учета результата реакции. Присутствие соответствующего антитела или антигена в образце исследуемой пробы приводит к агглютинации микрочастиц. Способность агглютинированных частиц задерживаться на фильтре указывают на положительный результат тестируемого образца.
Профилактические препараты: I. ВАКЦИНЫ против ВГВ: 1. Отечественная вакцина гепатита В рекомбинантная дрожжевая жидкая фирмы "Комбиотекс ЛТД". 2. Бельгийская вакцина - Engerix - В, фирмы "Смит КляйнБичем". 3. Американская вакцина - Recombivax НВ, производства фирмы "Мерк Шарп и Доум". 4. Кубинская -ДНК рекомбинантная вакцина против гепатита В (Rec-HBsAg). Наибольшее распространение получила вакцина "Энджерикс - В" (Engerix - В). Одна доза вакцины содержит 20 мкг HBs антигена, продуцируемого культурой дрожжевых клеток, полученных методом генной инженерии и имеющих ген, кодирующий формирование HBsAg ВГВ. Этот антиген очищается и адсорбируется на алюминии гидроксиде. Вакцина обеспечивает высокий уровень антител, а также обладает высокой эффективностью. Вакцинация проводится трехкратно с интервалом в 1 мес. Ревакцинацию проводят через 3-5 лет, т. е. вакцина создает надежный иммунитет в течение 5 лет. В первую очередь вакцинации подлежат лица группы риска. II. Иммуноглобулин человека против гепатита В применяется для пассивной профилактики болезни. Гепатит G. В 1966 годуврач-хирург перенес вирусный гепатит, возбудитель которого ещё не был отнесен ни к одному известному вирусу - возбудителю гепатитов. По инициалам врача он был обозначен GB-антигеном. Дальнейшие исследования показали неоднородность этого вируса, похожие, но не идентичные вирусы выделяли из крови сывороточным гепатитом, а выделенный возбудитель получил название HGV или GBV-С. Методом ПЦР установлено, что РНК вируса часто обнаруживается у лиц, которым производили переливания крови и парентеральные вмешательства, у больных гемофилией, хроническими гепатитами В, С и D, в образцах коммерческой плазмы, предназначенной для приготовления препаратов крови. Распространен везде. Частота обнаружения возбудителя в России составляет от 2%-до 8%. Гепатит G передается посредством крови, точно так же, как и гепатит С. В рядах наркоманов эта болезнь имеет широкое распространение. Заражение происходит также при парентеральных вмешательствах, гемотрансфузиях. Заразиться можно при половом контакте и от зараженной матери ребенку вертикальным путем. По клиническим проявлениям гепатит G очень схож с гепатитом С. Но для заболевания гепатита G совсем не характерно то, что присуще ГС, а именно, прогрессирующий инфекционный процесс с постепенным развитием ХГ, гепатокарциномы и цирроза печени. Обычно, инфекционный острый процесс проходит бессимптомно. Главным маркером, использующимся для диагностики гепатита G считается РНК HGV, которая выявляется методом ПЦР. В поздние сроки обнаруживаются Анти-HGV, тогда, когда РНК HGV исчезает из крови, и работают маркером выздоровления. Следствием острого ГG являются: формирование хронического гепатита с долгим обнаружением РНК HGV, персистирующей несколько лет с дальнейшим исчезновением впоследствии и синтезом анти-HGV; возможно выздоровление с элиминацией РНК HGV и возникновением анти-HGV; также, может быть формирование долгого носительства HGV. Максимальный срок обнаружения РНК HGV доходит до 9-12 лет. Надо сказать, частота, с которой выявляют анти-HGV, довольно велика, что подтверждает крайне редкое развитие хронизации при болезни гепатитом G, по сравнению с гепатитом С. Клиническое протекание хронической болезни «гепатит G», в основном, носит легкий характер с низким коэффициентом повышения активности АлАТ на протяжении долгого времени. Повышениеактивности гамма-глутамилтранспептидазы и щелочной фосфатазы говорит о том, что желчевыводящие протоки поражены. Морфологическая характеристика хронического Гепатита G схожа с изменениями, которые описаны для гепатита С. Внепеченочныхпроявлений гепатита G пока зарегистрировано не было. На сегодняшний день нет точных сведений, сможет ли персистенция ВГG "запускать" выборочно аутоиммунные механизмы. HCV/HGV-инфекцию можно наблюдать очень часто, для нее характерны цирозогенность и прогрессирование инфекционного процесса. Углубленное обследование больных с наличием РНК HGV и ее отсутствием не показало каких-либо различий в биохимических, морфологических и вирусологических показателях. Это еще раз подтверждает: HGV не оказывает никакого влияния на протекание HCV-инфекции. Гепатит F. Вирус гепатита f только начинает изучаться, поэтому сведений о нем в достаточном объеме пока не накоплено, а имеющиеся данные достаточно противоречивы. Всемирная организация здравоохранения еще в 1973 году приняла решение раздельно регистрировать вирусные гепатиты А и В. Так как ряд вирусов не подходил ни под одну, ни под другую группу, было решено гепатиты, вызываемые этими вирусами называть «ни А, ни В». Позже эти заболевания стали называться «ВГС и ВГЕ». На сегодняшний день хорошо изучены пять видов гепатита: А, В, С, D и E. Однако в результате клинических исследований был выявлен факт, что кровь некоторых людей, явно перенесших гепатит после переливания крови, остается серонегативной по отношению ко всем известным маркерам вирусного гепатита, что дает возможность предположить о существовании других его видов. В разных странах количество таких людей достигает 15-20%. Кроме этого некоторые лица, перенесшие лабораторно подтвержденные гепатиты хорошо изученных групп и выработавшие к ним иммунитет, вновь заболевали желтухой, которую невозможно было связать с группами A, B, C, D, E и G. Таким образом, на сегодняшний день к группе вирусов, вызывающих гепатит F, относят два различных вируса. Один из них был выделен из донорской крови и обладал следующими свойствами: · не растворялся в жирах;
· заражение обезьян, не имеющих иммунитет к гепатиту С, не вызывало появление к нему антител. Второй вид вируса был выделен из фекалий больного гепатитом, возникшим в результате гемотрансфузии. Свойства вируса были такими: · он имел способность размножаться в монослойных культурах клеток; · вызывал гепатит у макак-резусов; · по своим свойствам напоминал аденовирус. Симптомы: клиника этого заболевания сходна с клиникой других вирусных посттрансфузионных гепатитов. Органом мишенью для вируса f является печень. В результате разрушения ее клеток, нарушается функция, что приводит к поражению всего организма. Можно выделить следующие фазы течения болезни: · инкубационная;
· остаточных явлений. Длительность каждой фазы зависит от дозы возбудителя, способа его проникновения в кровь, индивидуальных особенностей и генетической предрасположенности человека, наличием или отсутствием сопутствующих заболеваний, адекватностью и своевременностью лечения и т.д. Симптомы гепатита F включают желтуху, лихорадку, асцит, увеличение печени и селезенки, изменение показателей крови (повышение уровня билирубина и печеночных ферментов), изменения в моче и кале, а также признаки общей интоксикации. Лечение: комплекс лечебных мероприятий должен быть направлен на борьбу с интоксикацией, на восстановление клеток печени и улучшение ее работы, на поддержание других органов и систем. Используется щадящая диета, прием витаминов, гепатопротекторов, симптоматическая терапия. Эффективное этиологическое лечение гепатита F, т.е. непосредственно направленное на борьбу с этим вирусом, пока не разработано. Применяются препараты из группы интерферонов. Вирус TTV (transfusiontransmittedvirus, Torquetenovirus) был открыт в 1997 в сыворотке крови японского пациента с инициалами Т.Т. с посттрансфузионным гепатитом неясной этиологии. TTV - это небольшой вирус без оболочки, содержащий циклическую ДНК. Это простоустроенный вирус, имеющий икосаэдрический тип симметрии. Размер вириона 30-50 нм. Содержит кольцевую однонитевую минус ДНК. Капсид состоит из белка VP1. Различают более 10 генотипов вирусов. Репродукция вирусов происходит, очевидно, в ядрах гомопоэтических клеток. Вирионы собираются в цитоплазме и выходят при лизисе клеток. Предположительным резервуаром клеток является печень. По геномной организации TTV схож с патогеном животных CAV (chickenanemiavirus) из семейства Circoviridae. Таким образом, TTV является первым цирковирус-подобным вирусом, обнаруженным у человека. На сегодняшний день вирус отнесен к новому роду Anellovirus. Родственные TTV вирусы были найдены у кур, свиней, коров, овец, собак, тупайи и приматов, включая человекообразных обезьян. Устойчив к факторам внешней среды. Предполагают, что TTV можно рассматривать как представителя нормальной микрофлоры человека. TTV-вирусемия распространена среди здоровых людей. Возможно участие вируса в поражениях печени (гепатит). В результате высокой изменчивости вируса, одновременного наличия в организме различных вариантов TTV происходит «ускользание» вируса от защитных факторов организма человека. TTV вызывает долгую, практически пожизненную виремию у большинства людей независимо от возраста, состояния здоровья и других параметров. Инфекция носит персистирующий характер, реплицирующийся вирус присутствует в самых разных участках организма, включая костный мозг, лимфоидную ткань, легкие и печень. Фактически от 70% до 90% всей мировой популяции человека являются носителями вируса TTV, и пока что вирус не был с уверенностью ассоциирован с каким-либо заболеванием, похоже обладая замечательной способностью приспосабливаться к своему хозяину. Интересно, что повышенная вирусная нагрузка отмечена у пациентов с тяжелой идиопатической воспалительной миопатией, раком или волчанкой. Активная репликация вируса также была обнаружена у детей с острыми респираторными заболеваниями. Пациенты с гемофилией имеют высокий риск инфицирования GBV-C/HGV и TTV. Основной путь передачи вируса - парентеральный, но не отрицается возможность фекально-орального распространения вируса и возможность передачи вируса половым путем. В группе риска находятся реципиенты компонентов крови, наркоманы, сексуальные партнеры, существует риск передачи вируса через бытовые контакты.
Занятие № 2.3.2 КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ (ГЕПАТИТЫ В,С, D ). ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
изучить биологические свойства возбудителей гепатитов В, С, D и принципы их вирусологической диагностики; классифицировать антимикробные препараты для идентификации, лечения и профилактики гепатитов В, С, D. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
1. Характеристику биологических свойств возбудителей. 2. Основные симптомы заболеваний, вызываемых вирусами гепатитов В, С, D. 3. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм передачи инфекций. 4. Принципы лабораторной диагностики гепатитов В, С, D. 5. Основы профилактики гепатитов. Препараты для диагностики, лечения и профилактики.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ: · составлять алгоритм лабораторного обследования больного гепатитом; · проводить учет и интерпретировать результаты вирусологических · классифицировать препараты в соответствии с их назначением.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ: |
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-10; Просмотров: 260; Нарушение авторского права страницы