Cем.: Brassicaceae (Крестоцветные)

Стандартизация ФС 42-1566-80

Внешние признаки. Сырье состоит из стеблей с листьями, цветками, изредка с незрелыми плодами. Стебли ребристые до 30 см. Листья очередные, продолговато-линейные или линейно-ланцетные, цельнокрайние или редкозубчатые длиной 3-6 см и шириной около 0, 5 см, постепенно переходят в короткий черешок. Соцветие – рыхлая кисть с бледно-желтыми четырехлепестковыми цветками. Плод – четырехгранный стручок. Все растение сероватое-зеленое от прижатых волосков. Запах слабый. Вкус не определяется (! ).

Химический состав. Содержит карденолиды, производные строфантидина: эризимин, эризимозид и др. Кроме того, трава содержит флавоноиды.

Биологическая активность 1 мл консервированного спиртом сока должна составлять не менее 150 ЛЕД.

Заготовка. Заготавливают от культивируемых растений на втором году жизни. Траву скашивают косилками во время цветения на высоте не ниже

10 см, укладывают в открытые ящики и корзины и доставляют на фарм. завод не позднее чем через 48 ч после сбора, где подлежит немедленной переработке.

Рис. 8 Желтушник раскидистый

Фармакологическое действие и медицинское применение

В настоящее время используется сок растения для производства препарата «Кардиовален». Препарат применяют при ревматических пороках сердца, кардиосклерозе с явлениями сердечной недостаточности и нарушением кровообращения I и Ш стадии, при стенокардии (без органических изменений сосудов сердца), вегетативных неврозах.

Bulbus Scillae

(Высушенные внутренние чешуи луковиц морского лука)

Urginea maritime= Scilla maritime (морской лук)

Сем.: Liliaceae (Лилейные)

 

Внешние признаки . Роговидные, желтовато-белые, согнутые кусочки чешуй луковицы, просвечивающие на свет, без запаха. Вкус не определяется.

Заготовка. Для медицинских целей используют только высушенные внутренние чешуи луковиц белой разновидности 8 – 10 летнего возраста. (У белой разновидности морского лука наружные чешуи луковицы сухие желто-бурые, внутренние сочные белые или слегка желтоватые.) Сырье заготавливают в мае – июне. Наружные желто-бурые сухие чешуи отбрасывают, отрезанное донце идет на посадку, а сочные внутренние чешуи разрезают на полоски и быстро сушат на солнце. При резке и сушке оберегают глаза, слизистые оболочки носа и кожные покровы, так как эфирное масло вызывает сильное раздражение и слезотечение.

Хранение. Список Б.Сырье сильно гигроскопично и требует плотной укупорки.

Химический состав. В луковицах белой разновидности найдено до 10 буфадиенолидов. Главный – гликосциллорен А, а смесь всех гликозидов обозначают как гликосцилларен В. Кроме того в чешуях находится горький гликозид сциллипикрин, обладающий мочегонным действием. Так же в луковицах много слизи – синистрина (до 30 %) и сахаров (до 20 %).

Фармакологическое действие и применение. Используют в форме водных настоев при сердечных заболеваниях, значительно усиливает диурез. Действие близко к строфанту.

Луковицы являются весьма сильным дератизационными средствами. Для этих целей используется преимущественно красная разновидность.

 

 

ТЕМА 3 (19) : КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО САПОНИНЫ

 

Цель занятия:

- изучить химическое строение сапонинов;

- овладеть методиками выделения и очистки сапонинов;

- овладеть методиками качественного анализа сапонинов;

- познакомиться с методами количественного определения сапонинов в лекарственном растительном сырье.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЮ

1. Дайте определение группе БАВ – «сапонины».

2. Перечислите классификацию сапонинов.

3. Перечислите физико-химические свойства сапонинов.

4. Перечислите способы получения сапонинов из растительного сырья.

5. Перечислите методы качественного и количественного анализов сапонинов в растительном сырье.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ НА ЗАНЯТИИ

Задание 1. Выделение суммы сапонинов из растительного сырья для проведения качественных реакций

Получите извлечение из растительного сырья, содержащего сапонины (по заданию преподавателя).

Для проведения качественных реакций готовят водные (1: 10) или водно-спиртовые растворы.

Приготовления водного извлечения.

1. Отвесьте 5, 0 г измельченного растительного сырья (по заданию преподавателя);

2. Поместите в коническую колбу, вместимостью 100мл и прилейте 50 мл воды;

3. Нагрейте содержимое колбы на водяной бане в течение 10 минут;

4. Полученное извлечение охладите и профильтруйте.

 

Приготовления водно-спиртового извлечения.

1. Отвесьте 5, 0 г измельченного растительного сырья (по заданию преподавателя);

2. Поместите в коническую колбу, вместимостью 100 мл и прилейте 50 мл 50 % спирта;

3. Нагрейте содержимое колбы на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 минут;

4. Полученное извлечение охладите и профильтруйте.

Задание 2. Качественные реакции на сапонины

Проведите качественные реакции, позволяющие обнаружить сапонины в извлечении из растительного сырья, и сделайте заключение о присутствии сапонинов в данном извлечении.

№	Качественные реакции	Результаты реакций
1.	Проба на пенообразование. 2-3 мл водного извлечения энергично встряхивают в течение 1 минуты (Это не только чувствительная проба, но и довольно характерная, т.к. других веществ, обладающих такой способностью к пенообразованию, в растениях не встречается)	Образуется обильная и стойкая пена
2.	Осаждение сапонинов солями бария (магния). В пробирку к 2 мл водного извлечения прибавляют несколько капель раствора соли бария	Образуется осадок
3.	Осаждение сапонинов ацетатом свинца. В пробирку к 2 мл водного извлечения прибавляют несколько капель 10% ацетата свинца	Образуется осадок
4.	Осаждение сапонинов холестерином. В пробирку к 1 мл спиртового извлечения прибавляют 1% спиртовой раствор холестерина	Образуется осадок
Цветные реакции. (реакции выполняются под тягой)
5.	Реакция Либермана-Бурхарда (характерна для стероидных сапонинов) Извлечение испаряют на водяной бане, полученный сухой остаток растворяют в ледяной уксусной кислоте, добавляют смесь уксусного ангидрида с концентрированной серной кислотой (50: 1)	Через некоторое время появляется окраска – от розовой до зеленой и синей
6.	Реакция с концентрированной серной кислотой. В пробирку к 2 мл водно-спиртового извлечения прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты	Появляется красное или красно-фиолетовое окрашивание
7.	Проба Лафона на сапонины. В пробирку к 2 мл водно-спиртового извлечения прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, несколько капель 10 % сульфата железа	Появляется зеленоватое или сине-зеленое окрашивание
8.	Реакция Сальковского. К 2 мл водного извлечения в пробирке прибавляют 1 мл хлороформа и несколько капель кислоты серной концентрированной. Не перемешивать слои!	Органический слой окрашивается в оранжевый цвет

Задание 3.Определение химической природы сапонинов

Проведите исследование и сделайте предположение о химической природе сапонинов.

Берут две пробирки одинакового диаметра и в одну из них наливают 5мл HCL, в другую - 5мл NaOH.

Добавляют в каждую из пробирок по 0, 5 мл исследуемого извлечения и встряхивают с одинаковой интенсивностью в течение 1 минуты.

При наличии стероидных сапонинов в пробирке со щелочью столб пены будет выше, чем в пробирке с кислотой.

При наличии тритерпеновых сапонинов образуется пена, примерно равная по объему и стойкости или в пробирке с кислотой столб пены будет выше, чем в пробирке со щелочью.

Задание 4. Определение пенного числа

Определите пенное число и отнесите исследуемое сырье к одной из трех групп.

- Свыше 5000 – высокое пенное число;

- 2000-5000 – среднее;

- меньше 2000 – низкое.

Пенное число – наименьшая концентрация сапонинов, вызывающая образование стойкой пены в течение 1 мин.

Методика проведения опыта:

1. Готовят 1% настой из сырья, содержащего сапонины:

1г порошкованного сырья заливают 100 мл воды. Настаивают на водяной бане 15 минут, охлаждают 45 минут и фильтруют. Затем доводят объем полученного раствора до 100 мл.

2. Проводят серию разбавлений полученного настоя:

- в 2 раза (берут 2мл исходного раствора и 2 мл воды);

- в 5 раз (берут 2 мл исходного раствора и 8 мл воды);

- в 10 раз (берут 1 мл исходного раствора и 9 мл воды);

- в 20 раз (берут 1 мл исходного раствора и 19 мл воды);

- в 30 раз (берут 1 мл исходного раствора и 29 мл воды);

- в 40 раз (берут 1 мл исходного раствора и 39 мл воды);

- в 50 раз (берут 1 мл исходного раствора и 49 мл воды); и т.д.

3. Отмеряют равные объемы разбавлений в пробирки с соответствующей маркировкой.

4. Энергично встряхивают каждую серию разбавлений в течение 1 минуты.

5. Наблюдают появление и стабильность пены в течение 1 минуты.

6. Определяют значение наименьшей концентрации настоя сапонинов, которая дает пену, не исчезающую в течение 1 мин. и рассчитывают пенное число.

Пример расчета. Исследуемый 1% раствор разбавили в 30 раз (1 мл первичного настоя и 29 мл воды). Общее разбавление составляет:

100 × 30 = 3000. Следовательно, пенное число – 3000.

Задание 5. Количественное определение глицирризиновой кислоты в корнях солодки

Методика определения глицирризиновой кислоты в корнях солодки приведена в ГФ X, ст.573, стр.582.

Выполните определение глицирризиновой кислоты в корнях солодки и сделайте вывод о соответствии сырья НД.

Ход работы

I. Извлечение глицирризиновой кислоты из корней солодки

1. Измельчите сырье до 0, 2 мм.

2. Отвесьте 2 г сырья и поместите в колбу (V = I00 мл)

3. Прибавьте 20 мл 3% ацетонового раствора азотной кислоты и оставьте на 1 час при частом и сильном взбалтывании.

4. Профильтруйте извлечение в цилиндр (V = I00мл).

5. Порошок с корнем промойте ацетоном и слейте фильтрат в тот же цилиндр (пока объем жидкости в цилиндре не достигнет 100 мл).

6. Жидкость из цилиндра перелить в химический стакан (V = 200 мл).

II. Осаждение глицирризиновой кислоты

7. По каплям при интенсивном перемешивании добавьте концентрированный раствор аммиака до появления обильного светло-желтого творожистого осадка (до рН 8, 3-8, 6 определяют по порозовению фенол-фталеиновой бумаги или по позеленению универсальной индикаторной бумаги)

8. Жидкость отфильтруйте и промойте фильтр 50мл ацетона в 3-4 приема.

III. Получение раствора глицирризиновой кислоты (получение исходного раствора – раствора А)

11. Осадок с фильтром перенесите в стакан и растворите осадок в 50 мл воды.

12. Полученный раствор количественно перенесите в мерную колбу (V = 250 мл), фильтр промойте водой, и присоедините ее к основному раствору.

13. Доведите объем раствора до метки (250 мл) (раствор А).

IV. Разбавление исходного раствора

14. 30 мл раствора А поместите в мерную колбу (V = 500 мл) и доведите объем раствора водой до метки (раствор Б).

V. Измерение оптической плотности полученного раствора

15. На спектрофотометре при длине волны 258 нм в кювете с толщиной слоя в 1 см. Измерьте оптическую плотность полученного раствора. Контрольным раствором является вода.

VI. Расчет содержания глицирризиновой кислоты сырье.

16. Содержание глицирризиновой кислоты в процентах (Х) вычисляют по формуле:

D— оптическая плотность раствора, а - навеска сырья, в граммах, b - количество раствора А, используемого для приготовления раствора Б, 822 - молекулярный вес глицирризиновой кислоты, 11000 - молярный показатель поглощения.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Дайте определение понятия «сапонины».

2. Приведите классификацию сапонинов.

3. Охарактеризуйте особенности химического строения сапонинов.

4. Напишите структурные формулы β -амирина, даммарана, панаксадиола, панаксатриола, кислоты глицирризиновой, аралозида, диосцина.

5. Перечислите физико-химические свойства сапонинов.

6. Назовите методы выделения и очистки сапонинов из ЛРС.

7. Перечислите качественные реакции обнаружения сапонинов.

8. Какие методы количественного определения сапонинов в ЛРС вы знаете?

9. Дайте определения понятия «гемолитический индекс». Перечислите недостатки количественного определения сапонинов этим методом.

10. Дайте определения понятия «пенное число», приведите методику его определения.

11. Перечислите этапы определения содержания глицирризиновой кислоты в корнях солодки.

СПРАВОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

Сапонины (от лат. sapo – мыло) – природные соединения тритерпеновой или стероидной природы, большинство из которых проявляют поверхностную или гемолитическую активность и токсичны для холоднокровных животных.

Сапонины преимущественно имеют гликозидную природу.

В зависимости от строения агликона (сапогенина) делятся на стероидные и тритерпеновые сапонины.

Стероидные сапонины относят к С₂₇ стеролам, производным циклопентанпергидрофенантрена; боковая цепочка их подверглась метаболическим изменениям с образованием спирокетальной системы спиростанолового (I) и фуростанолового (II) типов.

 

 

К стероидным относятся сапонины диоскореи ниппонской

Тритерпеновые сапонины с общей формулой С₃₀Н₄₈ делят на пентациклические и тетроциклические.

Среди тетрациклических сапонинов нами будут рассмотрены производные даммарана

Сапонины данного типа содержит корень Женьшеня.

 

Пентациклические сапонины можно разделить на 4 типа:

- ά -амириновый;

- β -амириновый;

- лупеоловый;

- фридериновый.

 

Наиболее широко в природе распространены производные β -амирина.

R=COOH – олеаноловая кислота

 

 

Примерами сапонинов, производных β -амирина, служат глицирризиновая кислота (из корней солодки голой), аралозиды (из корней аралии маньчжурской)

Корни Аралии маньчжурской

Название гликозида	R1	R2
Аралозид А	L-Арабиноза
Аралозид В	L-Арабиноза	L-Арабиноза
Аралозид С	D-Арабиноза	D-Ксилоза

 

 

 

 

Корни солодки голой

По количеству моносахаридов сапонины можно подразделить на монозиды, биозиды, триозиды, пентозиды и олигозиды, т.е. углеводная часть сапонинов содержит от 1 до11 моносахаридов и их производных. Наиболее часто встречаются D-глюкоза, D-галактоза, D- ксилоза, L-рамноза, L-арабиноза, D-галактуроновая и D-глюкороновая кислоты и др. Углеводная часть может быть линейной или разветвленной. Стероидные сапонины обычно имеют 1 – 5 сахаров и представляют собой 3 – О- гликозиды. Тритерпеновые сапонины могут иметь 2, (редко 3) углеводные цепи – в положении С₃ и С₂₈ (иногда в С₁₆). Углеводная цепочка тритерпеновых сапонинов содержать до 10 и более моносахаридов.

 

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться:

Популярное:

1. Cем.: Dioscoreaceae (Диоскорейные)