Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Возбудитель холеры. Классификация, методы культивирования, основные свойства.



Морфология. Холерный вибрион имеет один полярный жгутик, часто напоминает запятую (запятая Коха). Важный диагностический признак - подвижность (определяют микроскопией по методу висячей или раздавленной капли). Морфологически изменчивы. Хорошо окрашиваются водным фуксином Пффейфера и карболовым фуксином Циля.

Культуральные свойства. Факультативный анаэроб. Холерный вибрион неприхотлив к питательным средам. Хорошо размножается на 1% щелочной (рН 8, 6 - 9, 0) пептонной воде, опережая бактерии кишечной группы (среда обогащения), образует нежную голубоватую пленку и муть. Для подавления роста протея и некоторых других микроорганизмов используют пептонную воду с добавлением теллурита калия.

На плотных средах холерный вибрион образует гладкие стекловидные, прозрачные с голубоватым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции. Используют щелочной агар, желчно - солевой агар, щелочной агар с кровью, наилучшей является TCBS - агар (агар с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой).

Биохимические свойства. Холерный вибрион сбраживает с образованием кислоты без газа многие углеводы (глюкозу, сахарозу, маннозу, маннит, лактозу, левулезу, гликоген, крахмал). По отношению к трем сахарам (триада Хейберга) - сахарозе, маннозе и арабинозе вибрионы делят на восемь биохимических групп, холерный вибрион относится к первой группе (разлагает сахарозу и маннозу).

Холерный вибрион разлагает желатин, казеин, свертывает молоко и разлагает белковые препараты до индола и аммиака.

Вид V. cholerae делят на биотипы, серогруппы и серовары. Основные биотипы - классический (V. cholerae asiaticae) и Эль - Тор (V. cholerae eltor). Серогруппы выделяют по структуре О- антигенов, в основной О1 группе холерных вибрионов выделяют серовары Огава, Инаба и Хикоджима.

Антигенная структура. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- антигены и термолабильные Н- антигены. По структуре О- антигенов выделено 139 серогрупп, биотипы Эль - Тор и классический объединены в 01 группу (типируются 01 - антисывороткой). Изоляты Эль - Тор отличаются гемолитическими свойствами (вызывают гемолиз эритроцитов барана), способностью агглютинировать куриные эритроциты, резистентностью к полимиксину, по чувствительности к фагам.

О- антиген 01 группы неоднороден и включает общий А- компонент и два типоспецифических - В и С. Соответственно их наличию серовар Огава имеет сочетание АВ, Инаба - АС, Хикоджима - АВС.

Холерный вибрион может переходить из S- в R- форму, не агглютинироваться О- сывороткой. В связи с антигенной структурой для идентификации V. cholerae используют О- сыворотку, OR- сыворотку ( для выявления OR - и R - диссоциантов), типоспецифические сыворотки Инаба (С) и Огава (В). В 90 - е годы выявлен новый серовар V. cholerae 0139 (Бенгал), неагглютинирующийся вышеуказанными сыворотками, по остальным свойствам мало отличающийся от холерного вибриона 01 группы.

Не типируемые основной 01 сывороткой (т.е. не относящиеся к 01 группе) вибрионы называются неагглютинирующими (НАГ) вибрионами - холероподобными или парахолерными. Они имеют общий с холерным вибрионом Н- антиген, но отличаются по О- антигену.

По Н- антигену выделяют группы А и В, холерные вибрионы входят в группу А. Вирионы группы В (биохимически отличающиеся от холерных) имеют неоднородную структуру О- антигена и подразделяются на шесть серологических подгрупп.

Факторы патогенности холерного вибриона.

1. Подвижность (жгутики) и хемотаксис.

2. Ферменты способствуют адгезии и колонизации, взаимодействию с эпителиальными клетками - муциназа (разжижает слизь), нейраминидаза (взаимодействие с микроворсинками, создание посадочной площадки), лецитиназа и другие.

3. Эндотоксин - термостабильный липополисахарид, схожий по структуре и свойствам с другими эндотоксинами грамотрицательных бактерий.

4. Экзотоксин - холероген - главный фактор патогенности, термолабильный белок. Синтез холерогена - важнейшее, генетически детерминированное свойство холерного вибриона. Молекула холерогена состоит из двух фрагментов А и В. Собственно токсическую функцию выполняет пептид А1 фрагмента А. Молекула холерогена распознает рецептор энтероцита, проникает в мембрану клетки, активирует аденилатциклазную систему, накапливающийся циклический АМФ вызывает гиперсекрецию жидкости, Na+, HCO3-, K+, Cl- из энтероцитов. Это приводит к характерной для холеры диарее, обезвоживанию и обессоливанию организма.

5. У многих вибрионов, в т.ч. не относящихся к 01 группе, имеются различные энтеротоксины.

6. В патогенезе проявлений холеры имеет значение также фактор, повышающий проницаемость капилляров.

Некоторые особенности эпидемиологии. Холера - кишечная инфекция. Основной источник - человек (больной или вибрионоситель), загрязненная вода. Способ заражения - фекально-оральный. Индивидуальная восприимчивость к холере чрезвычайно вариабельна. Характерно большое количество скрытых (стертых) форм, вибрионосительство. Обнаружение возбудителя в воде напрямую связано с наличием больных или бактерионосителей. Холерные вибрионы 01 группы могут длительно находиться в водных экосистемах в виде некультивируемых форм.

Лабораторная диагностика. Холера относится к группе особо опасных инфекций, культивирование ее возбудителя требует соблюдения особого режима биологической безопасности. Основной метод диагностики - бактериологический, включает выделение и идентификацию возбудителя.

Материал для исследования - испражнения и рвотные массы, секционные материалы от погибших, пробы воды и смывы с объектов окружающей среды, пищевые остатки.

Для посева используют жидкие среды обогащения, щелочной МПА, элективные и дифференциально - диагностические среды (лучше TCBS). В качестве транспортной среды наиболее удобна 1% пептонная вода. Подозрительные стекловидные, прозрачные колонии пересевают для получения чистой культуры, которую идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, подвижности, антигенным свойствам, фаготипируют.

Для ускоренной диагностики применяют иммунолюминесцентный метод, биохимическую идентификацию с набором индикаторных дисков, для обнаружения холерных вибрионов в первичных материалах - РНГА с антительным диагностикумом, для выявления некультивируемых форм - ПЦР, для определения вирулентности и синтеза холерогена - биопробы на кроликах - сосунках, ИФА, ДНК- зонды (выявление фрагмента хромосомы, несущего оперон холерогена).

Специфическая профилактика. Имеются различные вакцины - убитая из сероваров Инаба и Огава, анатоксин холерогена, химическая бивалентная вакцина. Вакцины применяют только по эпидемиологическим показаниям (низкая иммуногенность). Может проводиться антибиотикопрофилактика (превентивная терапия) тетрациклином и другими антибиотиками.

 


6. Задания для самостоятельной работы

Тест

ВАРИАНТ I


1. ЧУМНЫЕ БАКТЕРИИ

1) овоидные биполярно окрашивающиеся палочки

2) грамположительные палочки

3) монотрихи

4) образуют споры

5) перитрихи

Правильный ответ 1

2. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ ОТНОСИТСЯ К

1) вирусам

2) прионам

3) бактериям

4) грибам

5) актиномицетам

Правильный ответ 3

3. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

1) Corynebacterium diphtheriae

2) Bacillus anthracis

3) Klebsiella pneumoniae

4) Bacteroides fragilis

5) Pseudomonas aeruginosa

Правильный ответ 2

4. НАИБОЛЕЕ ВИРУЛЕНТНА ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА

1) Brucella canis

2) B. suis

3) B. melitensis

4) B. neotomae

5) B. abortus

Правильный ответ 3

 

5. ХОЛЕРА ОТНОСИТСЯ К

1) эндемичным инфекциям

2) особо опасным инфекциям

3) инфекциям, шшне представляющим особой опасности

4) сапронозам

5) трансмиссивным инфекциям

Правильный ответ 2

 

6. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЧУМНЫХ БАКТЕРИЙ

1) строгий анаэроб

2) растут только в бульоне

3) оптимум Т +45°С

4) колонии напоминают «кружевной платочек»

5) требуют значительного защелачивания среды

Правильный ответ 4

 

7. ОСНОВНОЙ СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТУЛЯРЕМИИ В ЭНДЕМИЧНЫХ ОЧАГАХ

1) дератизация

2) дезинсекция

3) вакцинация

4) запрет на посещение леса

5) приём антибиотиков

Правильный ответ 3

 

8. ОСНОВНОЙ ИСТОЧНИК ИНФЕКЦИИ ПРИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЕ

1) больной человек

2) грызуны

3) овцы и крупный рогатый скот

4) рыбы

5) бактерионоситель

Правильный ответ 3

 

9. С ПОМОЩЬЮ ПРОБЫ БЮРНЕ ОПРЕДЕЛЯЮТ

1) аллергическую перестройку организма

2) видовую принадлежность бруцелл

3) напряженность гуморального иммунитета

4) антигенную структуру бруцелл

5) неполные антитела

Правильный ответ 1

 

10.  ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН

1) активно подвижен

2) образует капсулу

3) неподвижен

4) образует спору

5) не устойчив в водной среде

Правильный ответ 1

 

11.  КОЛОНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ

1) напоминают «цветную капусту»

2) прозрачные S-формы

3) слизистые, выпуклые

4) напоминают «львиную гриву»

5) напоминают «кружевной платочек»

Правильный ответ 5

 

12.  ПОСТИНФЕКЦИОННЫЙ ИММУНИТЕТ ПРИ ТУЛЯРЕМИИ

1) малонапряженный, непродолжительный

2) напряженный, продолжительный

3) врождённый

4) трансплацентарный

5) нестерильный

Правильный ответ 2

 

13.  В БУЛЬОНЕ ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТЕТ В ВИДЕ

1) зернистого осадка

2) сталактитов

3) комочка ваты

4) мути

5) нежной серой пленки

Правильный ответ 3

 

14.  БРУЦЕЛЛЫ

1) строгие аэробы

2) строгие анаэробы

3) психрофилы

4) нетребовательны к питательным средам

5) время генерации 15-20 мин.

Правильный ответ 1

 

15.  ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ НА ХОЛЕРУ ОТ БОЛЬНОГО ЗАБИРАЮТ

1) кусочки органов

2) кровь

3) испражнения

4) ликвор

5) мочу

Правильный ответ 3

 


 

ВАРИАНТ 2


1. НАИБОЛЬШУЮ ОПАСНОСТЬ ПРЕДСТАВЛЯЮТ БОЛЬНЫЕ ЧУМОЙ ПРИ КЛИНИЧЕСКОЙ ФОРМЕ

1) бубонной

2) легочной

3) первично-септической

4) вторично-септической

5) кишечной

Правильный ответ 2

 

2. ЧУМА И ТУЛЯРЕМИЯ - ИНФЕКЦИИ

1) особо опасные

2) природно-очаговые

3) зоонозные

4) трансмиссивные

5) всё выше перечисленное

Правильный ответ 5

 

3. МОРФОЛОГИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

1) овоидные грамположительные палочки

2) мелкие грамотрицательные палочки

3) изогнутые грамотрицательные палочки

4) крупные с обрубленными концами грамположительные палочки

5) грамположительные палочки, имеющие форму веретена

Правильный ответ 4

4. ОСНОВНОЙ ФАКТОР ПАТОГЕННОСТИ БРУЦЕЛЛ

1) анатоксин

2) тейхоевая кислота

3) эндотоксин

4) пили

5) сидерофоры

Правильный ответ 3

5. ПО ГРАМУ ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН ОКРАШИВАЕТСЯ

1) грамположительно

2) грамотрицательно

3) вариабельно

4) биполярно

5) при холере метод не используют

Правильный ответ 2

6. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ

1) хорошо растет в обычных питательных средах

2) работа с возбудителем проводится в обычных баклабораториях

3) требует сложных питательных сред с яичным желтком

4) оптимум Т +20-25°С

5) растет чрезвычайно быстро

Правильный ответ 3

7. ОСНОВНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ФОРМА ЧУМЫ В ЭНДЕМИЧНОМ ОЧАГЕ

1) кожная

2) первично-легочная

3) вторично-легочная

4) бубонная

5) септическая

Правильный ответ 4

8. НА МПА БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТУТ В ВИДЕ

1) шероховатых R-колоний с волокнистой структурой («львиная грива»)

2) слизистых колоний в S-форме

3) нежных, прозрачных, голубоватых колоний

4) черных округлых колоний с металлическим блеском

5) вообще не растут

Правильный ответ 1

9. ТИПИЧНАЯ МОРФОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛ

1) палочки

2) овоиды

3) коккобактерии

4) кокки

5) вибрионы

Правильный ответ 3

 

10.  ДЛЯ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА ХАРАКТЕРНО

1) устойчив к желудочному соку

2) чувствителен к желчным кислотам

3) щелочелюбив

4) устойчив к высушиванию

5) неустойчив в водной среде с щелочным рН

Правильный ответ 3

 

11.  ИДЕНТИФИКАЦИЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ ПРОВОДЯТ С УЧЕТОМ

1) биохимических свойств

2) антигенных свойств

3) вирулентности для лабораторных животных

4) морфо-тинкториальных свойств

5) всего вышеперечисленного

Правильный ответ 5

 

12.  ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ ИСПОЛЬЗУЮТ

1) холодовое обогащение

2) заражение лабораторных животных

3) первичный посев в среду накопления

4) первичный посев методом секторных посевов

5) заражение культуры клеток ткани

Правильный ответ 2

 

13.  МЕТОД ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

1) микроскопический

2) бактериологический

3) биологический

4) иммунофлюоресцентный

5) серологический

Правильный ответ 4

 

14.  БРУЦЕЛЛЫ ИМЕЮТ

1) общий родоспецифический антиген

2) А-антиген

3) М-антиген

4) антигены, общие с антигенами возбудителей холеры, туляремии, иерсиниоза О9

5) все вышеперечисленное

Правильный ответ 5

 

15. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРУЦЕЛЛЕЗА

1) отсутствие роста при первичном посеве

2) особо медленный рост в первых генерациях

3) быстрый рост

4) рост на обычных средах

5) не культивируется in vitro

Правильный ответ 2

 

 


 

 

7. Рекомендуемая литература

Обязательная:

1. Поздеев, О. К. Медицинская микробиология: учеб. пособие / О.К. Поздеев – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 768 с.

Дополнительная:

1. Ярилин, А.А. Иммунология: учебник / А.А. Ярилин – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.

2. Гиллеспи, С.Х. Наглядные инфекционные болезни и микробиология / С.Х. Гиллеспи, К.Б. Бамфорд – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 136 с.

3. Хаитов, Р.М. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 528 с.

4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 1 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 448 с.

5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 2 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 480 с.

 

 

 

 

Омский государственный медицинский университет

 

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии

 

 

УТВЕРЖДАЮ

Зав.кафедрой ___________________

Н.В. Рудаков

 

«____»_____________ 20____года

 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-05-18; Просмотров: 553; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.098 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь