Способы промышленного культивирования культур клеток

 

- культуры клеток;

- культуры органов и тканей (органные культуры).

Культуры клеток лишены структурной организации, теряют характерную гистиотипическую архитектуру и связанные с ней биохимические признаки и обычно не достигают равновесного состояния при отсутствии специальных условий. Клетки в культурах размножаются, что обеспечивает получение большой массы клеток, затем их идентифицируют (по фенотипическим признакам, путем выращивания в селективной среде, генотипически), разделяют на идентичные параллели и, если это необходимо, сохраняют.

Свежевыделенные культуры носят название первичных культур до начала пассирования или субкультивирования. Клетки первичной культуры обычно гетерогенны и характеризуются низкой пролиферацией. В них наиболее полно представлены типы клеток той ткани, откуда они были получены. Пассирование обеспечивает возможность продления существования культуры, возможность клонирования, исследования и сохранения свойств клеток. При этом получаются более однородные популяции, а также теряются специализированные клетки. После нескольких пересевов линия клеток либо гибнет, либо трансформируется и становится постоянной клеточной линией. Свойством "бессмертности" обладают в основном клетки, полученные из опухолей. Появление постоянной линии клеток констатируется по морфологическим изменениям (уменьшение размера клеток, снижение их адгезивности, округление, увеличение ядерно/цитоплазматического отношения, по увеличению скорости роста (время удвоения клеток в культуре снижается с 36 - 48 до 12 - 36 часов), по снижению зависимости от сыворотки, по увеличению эффективности клонирования, по снижению зависимости от субстрата, по увеличению гетероплоидности (хромосомные различия между клетками) и анеуплоидности и по увеличению опухолеродности. Нормальные клетки могут трансформироваться в постоянную линию, не становясь при этом злокачественными.

Мембранные методы разделения ультрафильтрация

Разделение твёрдой и жидкой фаз культурально йжидкости при пропускании ее через полупроницаемую мембрану

Мембрана – высокопористая или беспористая плоская или трубчатая перегородка

Без изменения продукта и воздействий

быстро изнашиваются

Это фильтрация, микрофильтрация, удльтрафильтрация, обратный осмос

Ультрафильтрация - 10^2 нм молекулы

Диализ и обратный осмос

обратный осмос — разделение жидких растворов путем проникновения через полупроницаемую мембрану растворителя под действием приложенного к раствору давления, превышающего его осмотическое давление диализ — разделение в результате различия скоростей диффузии веществ через мембрану, проходящее при наличии градиента концентрации

Мембранные методы микрофильтрация

Микрофильтрация использование в кач-ве фильтрующиъъ перегородок пластинчатых мембран с порами 0,1-10 мкс

32. Методы определения биологической концентрации

Количество КОЕ на единицу объема

Определяется культивированием на питат среде с подсчетом колоний

Флотация флотатор

Разделение фаз путем вспенивания культуральной жидк воздухом при этом взвешенный биоматериал адсорб н апов-ти раздела фаз и всплывает с пузырьками

Лиофильное высушивание

Метод включает быстрое замораживание с последующим высушиванием под низким давлением (сухая возгонка). Лиофильную сушку применяют для сохранения иммунобиологических препаратов (вакцин, сывороток), а также для консервирования и длительного сохранения культур микроорганизмов.

Снижается масса длит активность

1. Выбор криопреотектора

2. Расфасовка в ампулы и флаконы, определение эвтектических Т(жидк в тверд), предварит охлаждение

3. Сублимация и досушивние сушка и замораживание

4. Вакуумн или обычн укупорка после сушки

5. Контрль качества

 

Адсорбция и ионный обмен

Процесс опглощения одного или нескольких компонентов целевого продукта из газа или раствора адсорбентом

Ионообменные адс – иониты нерастворимые орг и неорг

⇐ Предыдущая123456Следующая ⇒

Поделиться: