Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Микробиология спирохетозов.Стр 1 из 4Следующая ⇒
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ к практическому занятию № 18
по теме: « Микробиология микобактериозов - туберкулёза, проказы. Микробиология спирохетозов.
по программе дисциплины «Микробиология, вирусология» по специальности - 31.05.01. «Лечебное дело» (уровень специалитета)
курс 3, семестр 5
Владивосток - 2016 Тема занятия. Микробиология микобактериозов - туберкулёза, проказы. Микробиология спирохетозов 2. Мотивация изучения темы. Туберкулез - глобальная антропозоонозная инфекция. При туберкулезе могут быть поражены любые органы и ткани человеческого тела. Социально-экономические, геополитические, демографические и медико-биологические факторы последних десятилетий существенно обострили проблему туберкулеза. Усугубляет ее и увеличение числа лиц с ассоциированными заболеваниями, сопровождающимися нарушениями иммунитета, формированием иммунодефицитных состояний. Отмечается рост лекарственно-устойчивых форм микробов, являющихся одной из причин неэффективности лечения больных. Расширяется спектр патогенных микобактерий, недостаточно изучена микробиология проказы. Вторая часть занятия посвящена антропонозным (сифилис, эпидемический возвратный тиф), зоонозным и зооантропонозным (лептоспироз) инфекциям, возбудители которых отличаются от прочих микроорганизмов своеобразными морфологическими, структурными, тинк-ториальными, культуральными свойствами, моно- (сифилис), а при ряде инфекций - по-липатогенностью (возвратные тифы, лептоспирозы). Последние во многом предопределя-ют клинико-эпидемиологические особенности инфекционных заболеваний, вызываемых представителями семейства Spirochaetaceae. В связи с этим понятна необходимость изучения указанной темы, знания основных положений которой нужны как для последующего обучения на кафедрах эпидемиологии, терапии, инфекционных, глазных, кожно-венерических болезней, так и в будущей врачебной работе. Цели занятия. 3.1. Общая цель: изучение темы направлено на формирование компетенций по ФГОС-03 по специальности 31.05.01 – Лечебное дел о: формировать способность и готовность использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОПК-9), формировать умение работать с научной литературой, анализировать информацию, вести поиск, выделять основные положения, делать выводы, развивать личностные качества (ОПК-9, ПК-22). Активно использовать современные достижения науки, особенно подчеркивая роль отечественных ученых в разработке данной темы (ОК-3, ПК-31). 3.2. Конкретные цели и задачи. Познакомиться с морфологией, биологическими свойствами возбудителей микобактериозов и спирохетозов патогенезом, микробиологической диагностикой, иммунопрофилактикой инфекций. При этом задачами дисциплины являются: - приобретение студентами знаний по классификации, морфологии и физиологии возбудителей туберкулеза, проказы, сифилиса, лептоспироза, боррелиозов; изучение их биологических и патогенных свойств, влияния на организм человека; - обучение студентов рационально выбирать материал для исследования в зависимости от характера течения заболевания, забору, направлению его в лабораторию, выбору методов лабораторной диагностики, способам расшифровки результатов лабораторных исследований. Ознакомление со способами, принципами, средствами профилактики и лечения, алгоритму постановки микробиологического диагноза изучаемых инфекций; -на основе изучения учебного материала инициировать самообразовательную деятельность студентов: формировать умение сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества, научить стремиться использовать современные достижения науки. После изучения темы студент должен: I уровень - «иметь представление» - о морфологии (дать ее качественное описание), о биологических свойствах возбудителей микобактериозов и спирохетозов, о патогенезе; обучающиеся должны уметь идентифицировать объект, объяснить микробиологическую диагностику, иммунопрофилактику. II уровень - «знать» - сформировать современное представление об этиологии, биологических свойствах возбудителей, таксономической характеристике, изменчивости микобактерий и спирохет формах существования микробов, их физиологии, генетики, устойчивости, патогенезе, характерных особенностях клинического течения и иммунитета заболеваний. Изучить основы биотехнологических процессов создания вакцин и диагностических тестов. III уровень - «Уметь» - соотносить результаты лабораторных исследований с этапами формирования инфекционного процесса и достигать решения конкретных клинико-лабораторных задач по индикации возбудителей, их профилактике и принципам лечения. Уметь выбрать методы диагностики и их выполнять, правилам сбора материала для лабораторного исследования и условиям его транспортировки, оформлению сопроводительных документов, использовать современные достижения науки. Знать состав и назначение диагностических препаратов. Уметь оценивать результаты исследований. Уметь выбрать препараты для специфической терапии и профилактики инфекций. IV уровень - «Владеть» - умением сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества. Стремиться использовать современные достижения науки, отечественных ученых.
4. Этапы проведения практического занятия.
5. Ориентировочная основа действия (ООД) по проведению практического занятия (лабораторного, семинара). 1. Проверить материалы по самоподготовке (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия). 2.Сформулировать цель занятия. 3.Контроль исходного уровня знаний. 4. Выполнить самостоятельное решение тестовых заданий, ситуационных задач в соответствии с алгоритмом: 5. Выполнить практическую часть занятия (демонстрация практических навыков, см. п.6). 6. Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию: 1. Характеристика возбудителя туберкулеза, таксономия, морфология, структура, особенности химического состава, тинкториальные и культуральные свойства, изменчивость (формы), антигенный состав, факторы патогенности. 2. Резистентность микобактерий туберкулеза к лекарственным веществам и во внешней среде. 3. Эпидемиология туберкулеза (источник, пути и факторы передачи, входные ворота инфекции, контингенты повышенного риска). 4. Патогенез заболевания и клинические проявления (локализация возбудителя в организме, динамика инфекционного процесса, его формы и особенности у детей). 5. Ассоциированные инфекции при туберкулезе. 6. Лабораторная диагностика. - материал для исследования, правила забора, транспортировки, подготовка к исследованию, комплексная схема его проведения, режим. - микроскопический (по Циль-Нильсену и люминесцентный), бактериологический (в т.ч. ускоренные методы), серологический, молекулярно-генетический. - комплексная оценка результатов исследования. 7. Основные особенности и механизмы иммунитета, роль аллергии, особенности при ассоциации с ВИЧ – инфекцией. 8. Принципы этиотропной терапии, ее обоснование, методы, оценка чувствительности возбудителя к лекарственным средствам. 9. Профилактика (общая, специфическая), препараты. 10. Общая характеристика атипичных форм микобактерий (фотохромогенных, скотохромогенных, нефотохромогенных и быстрорастущих атипичных микобактерий), их дифференциация и роль в патологии. 11. Проказа – особенности по п. 1 – 10. 12. Таксономия возбудителей (классификация) спирохетозов. 13. Биологические свойства возбудителей спирохетозов: морфо-тинкториальные, культуральные, биохимические, антигенные, факторы патогенности. 14. Краткие клинико-эпидемиологические сведения: устойчивость возбудителя во внешней среде, источники инфекции и пути распространения, факторы и условия передачи, контингент повышенного риска, специфическая локализация возбудителя в организме (по фазам). 15. Иммунитет и его основные механизмы, напряженность, длительность, перспективы специфической профилактики и терапии. 16. Принципы лабораторной диагностики: исследуемый материал, правила его сбора, транспортировки, анализ; микроскопический метод выявления возбудителей в материале от больного сифилисом, возвратным тифом, лептоспирозом; возможность и целесообразность выделения чистых культур возбудителей перечисленных заболеваний; биологический метод диагностики, сущность, назначение; серодиагностика, методы: РА, РСК, РИФ, РНИФ, ИФА, РИТ и др., комплексная оценка результатов исследования. 17. Этиотропная и патогенетическая терапия (принципы, средства). Специфическая профилактика при лептоспирозе
Задания для СРС во внеучебное время 1. Составить алгоритм микробиологической диагностики туберкулеза, проказы 2. Составить таблицу препаратов для специфической профилактики, лечения и диагностики инфекций. Указать состав: АГ или АТ, способ получения, показания к применению, механизм действия.
Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время. Ситуационные задачи. 1. На приеме у врача пациент предъявляет жалобы на кашель с выделением слизисто-гнойной мокроты в течение 3-х недель, ухудшение аппетита, повышенную потливость Вопросы: 1. Какое заболевание должен заподозрить врач? 2. Какие методы лабораторного исследования необходимо назначить? 3. Вид диагностического материала.
2. Ребенку 5 лет, при рождении привит вакциной БЦЖ. Оценить реакцию Манту: диаметр реакции на туберкулин через 72 часа - 15 мм. Инфильтрат хорошо очерчен, ярко-красного цвета, возвышается над поверхностью кожи. Диаметр инфильтрата год назад составлял 5 мм. Вопросы: 1. Как оценить данную реакцию? 2. Дальнейшая тактика.
3. Ребенку 7 лет, реакции на пробу Манту нет – отсутствие инфильтрата и гиперемии. Вопросы: 1. Как оценить данную реакцию? 2. Дальнейшая тактика. 4. Получены результаты пересева штамма М. tuberculosis в пробирки со средой Левенштейна–Йенсена содержащей критические концентрации противотуберкулезных препаратов: изониазид (1 мкг/мл) - обнаружен рост М. tuberculosis более 20 КОЕ рифампицин (40 мкг/мл) – рост более 20 КОЕ этамбутол (2 мкг/мл) – отсутствие роста стрептомицин (10 мкг/мл) - рост более 20 КОЕ Вопросы: 1. Какое свойство М. tuberculosis изучалось 2. Интерпретируйте результат исследования Эталоны ответов 1. Туберкулез. Первый и обязательный для всех медицинских учреждений метод – микроскопия мокроты по Циль-Нильсену. Необходимо собрать от больного 3 порции мокроты в течение 2 - 3 дней. Углубленное исследование проводиться в противотуберкулезном учреждении: микробиологическое (микроскопия и посев), аллергологическое (туберкулинодиагностика). В качестве дополнительных методов – молекулярно-генетические и серологические. 2. Наличие у ребенка изложенных выше характеристик туберкулиновых реакций позволяет врачу сделать предположение об инфицировании микобактериями туберкулеза. Необходимо дальнейшее наблюдение у фтизиатра. 3. Вышеизложенная реакция на туберкулин – отрицательная. Учитывая возраст ребенка (7 лет), необходимо провести ревакцинацию. 4. Изучалась лекарственная чувствительность М. tuberculosis. Выявлена множественная лекарственная устойчивость, т.е. одновременная устойчивость к изониазиду и рифампицину, а так же к стрептомицину. К этамбутолу чувствительность сохранена. 8. Оснащение практического занятия: 8.1. Наглядные пособия: а) таблицы: 1.Морфология М. tuberculosis 2. Окраска М. tuberculosis по Циль-Нильсену 3. Тинкториальные свойства возбудителя лепры б) схемы, стенды, витражи, альбомы: 1.Схема культивирования аэробов в) слайды (диапозитивы): 1. Клинические проявления проказы (4 слайда) 2.Окраска по Циль-Нильсену Г) фильм – техника окраски по Циль-Нильсену 8.2. Технические средства обучения: (лабораторное оборудование, микроскопы (бинокуляры), микроском с видео насадкой, оверхет, компьютер, мультимедийный проектор.
9.Учебно-материальное обеспечение: 9.1. Литература: а) обязательная 1. Лекция 2. Методическая разработка 3. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. В 2-х томах / под ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 448 с.: ил. 4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник для студентов мед.вузов / под ред. А.А. Воробьева. - 2-е изд., исправ.и доп. - М.: Медицинское информационное агентство, 2006. - 704 с. 5. Руководство по организации и проведению практических занятий по медицинской микробиологии / под ред. О.В. Бухарина. Екатеринбург: УрО РАН, 2009. 399 с. 6. Руководство по медицинской вирусологии / Под ред. Д. К. Львова. — М., 2008. 7. Пособие к практическим занятиям по общей микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов медицинских вузов. Шаркова В.А. с соавт. Владивосток: ИПК МГУ им. адм. Г.И. Невельского, 2010. 144 с. б) дополнительная 1. Атлас-руководство по микробиологии, иммунологии и вирусологии/ под ред. Академика РАМН, проф. А.А. Воробьева и проф. А.С. Быкова.- М.: МИА. – 2003, 2005. – 563с. 2. Поздеев Щ.К. Медицинская микробиология / Под ред. В.И. Покровского. М., 2008. С. 662. 3. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология/ Под ред. Л.В. Борисова, 2008. 4. Микробиология, вирусология иммунология/ под ред. В.Н. Царева.- М., 2009. 5. Шаркова В.А., Забелина Н.Р., Воропаева Н.М. с соавт. Учебно-методическое пособие к практическим занятиям по общей микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов медицинских вузов. Владивосток: Медицина ДВ, 2011. 179 с. 6. Оттен Т.Ф., Васильев А.В. Микобактериоз.- СПб: Медицинская пресса.- 2005.- 220 с. 7. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования (пол ред. Биргера М.О.). М., 1982. С. 303. 8. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. СПб: ЭЛБИ-СПб, 2002. 266 с. 10. Социально-значимые инфекции: (в 2-х ч.) / В. В. Нечаев, А. К. Иванов, А. М. Пантелеев; М-во здравоохранения и социал. развития РФ, С.-Петерб. гос. мед. акад. им. И.И. Мечникова. - СПб.: Береста, 2011. Ч. 1: Моноинфекции: туберкулез, ВИЧ-инфекция и вирусные гепатиты. - 2011. - 439 с.: ил. 11. Методические рекомендации по проведению микробиологических исследований на туберкулез. Для бактериологических лабораторий уголовно-исполнительной системы Министер-ства юстиции Российской Федерации. Москва, 2004. 12. Голышевская В.И., Шульгина М.В. Учебное пособие «Культуральные методы диагностики туберкулеза». Учебное пособие. Москва, 2007.
9.2. Программное обеспечение и Интернет-ресурсы базы данных, информационно-справочные и поисковые системы: 1.Реферативная база данных Медицина ВИНИТИ. http: //www2.viniti.ru/ 2. Электронные каталоги библиотеки. http: //lib.vgmu.ru/catalog/ 3. База данных компании EBSCO Publishing Medline, Medline with Full Text, Health Source Nursing/Academic Edition, Health Source Consummer Edition, Green FILEhttp: //web.ebscohost.com/ 4. Электронная библиотека Российской национальной библиотеки: фонд авторефератов диссертаций. http: //leb.nlr.ru/search/ 5. ЭБС «Университетская библиотека on line». http: //www.biblioclub.ru/ 6. ЭБС «Консультант студента». http: //www.studmedlib.ru/ 7. КонсультантПлюс.http: //www.consultant.ru/ 8. Тихоокеанский медицинский журнал – электронная версия. http: //lib.vgmu.ru/journal/? name=pmj 9. Сводный каталог периодики и аналитики по медицине MedArt. http: //ucm.sibtechcenter.ru/ 10. Электронный каталог «Российская медицина». Библиографическая база данных Центральной научной медицинской библиотеки. http: //www.scsml.rssi.ru/ 11. Электронные учебники CD и DVD диски 12. www.cardiosite.ru 15.http: //consilium-medicum.com/media/consilium/07_01/4.shtml 16. Интернет-библиотека IQlib on-line доступ: http: //www.iqlib.ru/ 17. Электронные книги по медицине on-line доступ: http: //www.medbook.net.ru http: //www.medtext.ru/pafiledb/index.php http: //www.medliter.ru/ http: //www.knigafund.ru/
Приложение 1 Характеристика микобактерий и родственных таксонов.
Приложение 2 Культуральные признаки комплекса M. tuberculosis
Тесты для дифференциации микобактерий комплекса M. tuberculosis
Микобактерии | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
M. tuberculosis | Нетуберкулезные медленнорастущие | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Основные биохимические тесты на наличие: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Никотиновой кислоты | + | —* | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Нитратредуктазы | + | ± | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Термостабильной каталазы | — | + | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Рост на среде с натрием салициловокислым (1000 мкг/мл) | — | +/± | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Дополнительные тесты: рост на средах, содержащих: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Паранитробензойную кислоту (500 мкг/мл) | — | + ** | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Натрия хлорид 5% | — | +*** |
* — За исключением M. simae
** — За исключением M. gastri
*** — За исключением M. marinum, M. terrae
Приложение 3
Тесты для дифференциации отдельных видов микобактерий комплекса
Mycobacterium tuberculosis
Тесты для дифференциации |
Приложение № 8 Материал и его отбор 1. Отделяемое из твердого шанкра (берут в специализированных лабораториях, в клиническом отделении). Для получения необходимо: - тщательно промыть язву или эрозию ваткой (избегать сильного растирания и кровотечения), смоченной стерильным физиологическим раствором (0, 85% NaCl); - очищенную поверхность осторожно растираем прокаленным и остуженным металлическим шпателем (можно снимать край шанкра пинцетом); - отделяемое (оно появляется не сразу), набрать в пастеровскую пипетку и далее использовать для микроскопического исследовании; - при наличии инфильтрата без язвы – пунктат шприцом. 2. Пунктат лимфатических узлов. 3. Отделяемое или соскоб с кожных поражений сыпных элементов при вторичном сифилисе. 4. Спинномозговая жидкость (пунктат). 5. Кровь (брать натощак, не менее 2-х мл) в сухие чистые пробирки для серологических проб, направляют в закрытых пробкой пробирках в специализированную лабораторию.
Серодиагностика Для скрининга используется реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, которую называют ЭДС – экспресс-диагностика сифилиса. Материал: Сыворотка крови, ликвор С визуальной оценкой реакций: Оценка реакций при микроскопии Схема постановки опыта
Примечание: Спинномозговую жидкость не инактивируют, но если она содержит кровь, то её прогревают при + 56о С 30 минут. Мутную жидкость центрифугируют.
4. Реакция иммобилизации бледных трепонем (PИБT):
Принцип: угнетение движения бледных трепонем антителами сыворотки крови в присутствии комплемента. Ингредиенты реакции: - трепонемы - получают из яичка кролика, зараженного экспериментальным сифилисом. Яичко измельчают в специальной среде, не угнетающей подвижность спирохет; - комплемент (сыворотка крови морской свинки); - сыворотка обследуемого больного; - сыворотка заведомо здорового человека. Реакцию выполняют в меланжерах для лейкоцитов по Н. М. Овчинникову, который усовершенствовал методику Нельсона-Мауэра.
Схема постановки опыта:
Концы меланжера закрыть резиновой трубочкой (прекратить доступ воздуха). Поместить в термостат при + 35° С на 18 - 20 часов, после чего учитывать результаты: - на оба края предметного стекла наносят по капле хорошо перемешанных смесей сыворотки с активированным и инактивированным комплементом; - капли покрывают покровным стеклом 20 х 20 мм2. - с помощью микроскопа (темнопольного) определяют количество подвижных и неподвижных трепонем, сначала в капле с активным, потом с инактивированным комплементом; - процент специфически иммобилизированных спирохет в и опыте определяют по формуле: Х = Tк-То x 1000, где
Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом); То - число подвижных трепонем в опыте (с активным комплементом). Результат считают положительным, если процент иммобилизации выше 50, слабоположительным - от 31 до 50, сомнительным - от 21 до 30, отрицательным - ниже 30. Лиса.
Иммуноферментный анализ. Материал для исследования – сыворотка крови. Для постановки анализа применяется готовая тест-система, в состав которой входит полистироловый планшет с иммобилизованным специфическим спирохетозным антигеном. Тест-система позволяет определить не только наличие специфических антител, но и определить класс иммуноглобулинов. Нахождение иммуноглобулинов класса М говорит о свежем заражении сифилисом, нахождение иммуноглобулинов класса G – о текущем процессе или ранее перенесенной инфекции.
Постановка полимеразной цепной реакции – ПЦР позволяет определить наличие бледной трепонемы в любом биологическом субстрате: отделяемом твердого шанкра, отделяемом половых органов, сыворотке крови, ликворе.
Приложение № 9 Приложение№ 10 МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ к практическому занятию № 18
по теме: « Микробиология микобактериозов - туберкулёза, проказы. Микробиология спирохетозов.
по программе дисциплины «Микробиология, вирусология» по специальности - 31.05.01. «Лечебное дело» (уровень специалитета)
курс 3, семестр 5
Владивосток - 2016 |
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-09; Просмотров: 638; Нарушение авторского права страницы