Лабораторно-практическое занятие

«Анализ веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом»

Задание 1. Провести выделение токсических веществ из биологического объекта.

Исследуемый объект (10 граммов) измельчают, смешивают в химическом стакане с небольшим количеством дистиллированной воды до образования густой кашицы, смесь через 1-2 часа фильтруют или центрифугируют, фильтрат (центрифугат) помещают в стеклянный цилиндр с натянутой целлофановой мембраной вместо дна, цилиндр помещают во внешний сосуд с налитой в него водой и подвергают диализу.

Диализ производится 2–3 раза по 4–6 часов. Слитые вместе диализаты выпаривают на водяной бане до объема 5 – 10 мл и исследуют на наличие кислот, щелочей и солей.

Исследование диализата на наличие кислот

1. 1 каплю диализата наносят на индикаторную бумагу красный Конго и наблюдают изменение цвета бумаги. Параллельно на индикаторную бумагу красный Конго наносят 2 капли хлористоводородной кислоты и наблюдают изменение окраски индикаторной бумаги до красного окрашивания. Окраска индикаторной бумаги с диализатом должна быть идентична окраске параллельного опыта.

2. К 2 каплям диализата добавляют 2 капли спиртового раствора диметиламиноазобензола и наблюдают изменение цвета диализата. Параллельно к 2 каплям хлористоводородной кислоты добавляют 2 капли спиртового раствора диметиламиноазобензола, наблюдается яркое малиновое окрашивание. Окраска диализата должна быть идентична окраске параллельного опыта.

Исследование диализата на наличие щелочей

1. К 2 каплям диализата добавляют 2 капли раствора тропеолина 00 и наблюдают изменение цвета диализата. Параллельно к раствору натрия гидроксида добавляют 2 капли раствора тропеолина 00, появляется ярко-красное окрашивание. Окраска диализата должна быть идентична окраске параллельного опыта.

2. К 2 каплям диализата добавляют 2 капли раствора индигокармина и наблюдают изменение цвета диализата. Параллельно к раствору натрия гидроксида добавляют 2 капли раствора индигокармина, появляется яркое зеленое окрашивание. Окраска диализата должна быть идентична окраске параллельного опыта.

3. К 2 каплям диализата добавляют 2 капли спиртового раствора фенолфталеина и наблюдают изменение цвета диализата. Параллельно к раствору натрия гидроксида добавляют 2 капли спиртового раствора фенолфталеина, появляется яркое малиновое окрашивание. Окраска диализата должна быть идентична окраске параллельного опыта.

Анализ диализата на наличие минеральных кислот.

В случае положительных испытаний диализата на наличие кислот (реакция среды кислая) возникает необходимость идентификации кислоты. Как правило, определение характера кислоты заключается в обнаружении свободной кислоты (в исходном состоянии), что может быть осуществлено лишь после процесса перегонки диализата.

Температуры кипения кислот достаточно высоки, поэтому применяется способ перегонки более летучих соединений, в которые восстанавливают кислоты (например, серную кислоту переводят в сернистую, летучую в виде ангидрида SO2, азотную кислоту – в окислы азота).

При простой перегонке из диализата свободной серной кислоты, из объекта исследования перегоняется хлористый водород, образующийся из-за постоянного присутствия хлоридов в объекте исследования, поэтому, для предотвращения переоткрытия хлористоводородной кислоты, исследование на наличие кислот необходимо начинать с серной кислоты.

Азотная кислота из диализата перегоняется не сразу, вначале отгоняется вода, затем – азотная кислота. По этой причине диализаты, содержащие азотную кислоту, отгоняют почти досуха. Добавление медных опилок к диализатам способствует перегонке кислоты.

Предварительные исследования диализата.

1. Испытания на сульфаты. К 1 мл диализата добавляют 0, 1 мл 10% раствора хлористоводородной кислоты и 1 мл 5% раствора хлорида бария.

2. Испытания на хлориды. К 1 мл диализата добавляют 0, 1 мл 10% раствора азотной кислоты и 0, 1 мл 1% раствора серебра нитрата.

3. Испытание на нитраты и нитриты. К 1 – 2 каплям диализата добавляют 1 каплю раствора дифениламина в концентрированной серной кислоте.

Основное исследование диализата на серную кислоту.

Отгонка серной кислоты. К части диализата добавить медные опилки и отогнать сернистую кислоту в приемник с раствором йода в йодиде калия. После добавления к отгону разбавленной хлористоводородной кислоты и удаления йода нагреванием (до обесцвечивания раствора) проводят качественное обнаружение серной кислоты в приемнике.

Качественное обнаружение серной кислоты (сульфат-иона).

1. Реакция с бария хлоридом. К 5 каплям дистиллята добавить 2 капли 5% раствора бария хлорида.

2. Реакция со свинца ацетатом. К 5 каплям диализата добавить 2 капли 3% раствора свинца ацетата.

3. Реакция с натрия родизонатом. На фильтровальную бумагу наносят по 1 капле 1% раствора бария хлорида и свежеприготовленного 0, 2% раствора натрия родизоната, наблюдается красное окрашивание, после нанесения на пятно 2 капель дистиллята, содержащего сульфат-ион, окраска пятна исчезает.

Количественное определение. 10 мл водного извлечения титруют 0, 1 М раствором натрия гидроксида в присутствии метилового оранжевого. Содержание серной кислоты указывают в г/100 г биообъекта.

1 2 345