Работа 27. Определение всхожести семян по Нелюбову

Этот метод основан на способности мертвой протоплазмы интенсивно окрашиваться индигокармином в синий цвет, в то время как протоплазма живых клеток совершенно не красится. 0, 2%-ный индигокармин готовится на дистиллированной воде. Ввиду того, что краска плохо проникает через семенную кожуру, окрашивается выделенный зародыш.

ХОД РАБОТЫ

Опыт проводится с набухшими семенами пшеницы, сосны и акации. Зародыш пшеницы, расположенный на конце семени, легко отделить пинцетом и препаровальной иглой.

Зародыш сосны находится в середине семени. Осторожно нажимая ланцетом на шов, с острого конца семени иглой раздвигают оболочку и извлекают зародыш.

У семян акации ланцетом делается надрез, расположенный противоположно корешку. Надрез сделать так, чтобы захватить не только семенную кожуру, но и находящуюся под ней прозрачную оболочку. Затем тупым концом ланцета разрезанная кожура раздвигается и осторожно снимается, избегая повреждения кончика корня зародыша.

По 100 зародышей каждого вида семян погружается в раствор краски. Через 2 часа краска сливается, семена несколько раз промываются водой и учитываются результаты окрашивания. У мертвых невсхожих семян весь зародыш окрашивается в синий цвет. Кроме того, встречаются зародыши с локальной окраской корешка или семядолей. Такие семена прорастают, но дают ослабленные проростки. Их относят к жизнеспособным семенам. Количество семян трех различных категорий позволяет установить процент жизнеспособных семян в образце.

 

Количество зародышей	Неокрашенных	Окрашенных локально	Интенсивно окрашенных	% жизнеспособных

 

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ

1) 0, 2% раствор индигокармина; 2) семена различных растений; 3) ланцет; 4) препаровальная игла.

ПРИЛОЖЕНИЕ

РАЗМНОЖЕНИЕ РАСТЕНИЙ ЧЕРЕНКАМИ

Не все растения обладают одинаковой способностью к образованию корней при черенковании. Стимуляторы роста вызывают корнеобразование многих трудноукореняющихся растений и ускоряют процесс образования корней у легкоукореняющихся видов. Деревянистые черенки заготовляют осенью после листопада, реже зимой, еще реже весной до начала сокодвижения. Лучше укореняются черенки с молодых побегов. Чем длиннее и толще черенок, тем большую корневую систему он развивает. Нижний косой срез делается под самой почкой, а верхний срез - на некотором расстоянии от почки, чтобы неизбежное отсыхание верхушки черенка не коснулось прорастающей почки. Зеленые черенки одних растений (например, вишни, сливы, липы, сирени, лоха) лучше всего укореняются, когда их режут с растущих побегов. Черенки других растений (лимона, розы, азалии, дуба, клена, жимолости, туи, тиса) лучше всего образуют корни когда их берут с побегов оканчивающих или только что закончивших рост. Некоторые декоративные растения (например, хризантема, гвоздика и др.) размножаются травянистыми черенками. Их подготавливают и обрабатывают также как и зеленые черенки. Для обработки черенков рекомендуются следующие стимуляторы роста: гетероауксин или калиевая соль гетероауксина, индолилмасляная и нафтилуксусная кислоты.

Раствор стимуляторов роста приготовляют на питьевой воде, в концентрациях, указанных в таблице. Гетероауксин, или индолилуксусная кислота, индолилмасляная и α -нафтилуксусная кислоты плохо растворяются в холодной воде и хорошо растворяются только в горячей воде.

 

 

Примерные концентрации и сроки обработки стимуляторами роста черенков различной степени одревеснения

Стимулятор роста	Для травянистых черенков	Для зеленых черенков	Для деревянистых черенков
концент­рация, мг на 1 л воды	время обработки черенков, ч	концент­рация, мг на 1 л воды	время обработки черенков, ч	концент­рация, мг на 1 л воды	время обработки черенков, ч
Гетеро- ауксин или калиевая соль гетеро­ауксина	50-70	6-8	150-200	8-12	200-250	18-24
Индолил-масляная кислота	20-25	6-8	30-50	8-12	50-70	18-24
α -нафтил-уксусная кислота		5-7	25-30	8-10		18-24

 

РЕЦЕПТЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ОСНОВНЫХ

РАСТВОРОВ И РЕАКТИВОВ

Раствор нейтрального красного. Приготовить 0, 1%-ный раствор путем растворения 0, 5 г краски в 250 мл дистиллированной воды. Раствор профильтровать и хранить в стеклянной банке из темного стекла. Перед употреблением развести водопроводной водой в 10 раз.

Хлоркобальтовая бумага. Приготовить 5%-ный раствор хлорида кобальта и погрузить в него на несколько минут куски белой фильтровальной бумаги размером 8x10 см. Просушить розовую бумагу между листьями сухой фильтровальной бумаги, а затем на солнце или над электроплиткой до появления голубого цвета. Хранить хлоркобальтовую бумагу следует в эксикаторе над хлоридом кальция.

Стандартный раствор Гетри для определения хлорофилла. Приготовить на дистиллированной воде три раствора: 1) 1%-ный CuSO₄× 5H₂O (брать только синие кристаллы, после растворения профильтровать), 2) 2%-ный К₃Сr₂О₇, 3) 7%-ный аммиак. Перенести в мерную колбу на 100 мл 3-го раствора, довести до метки дистиллированной водой, перемешать и перелить в чистую сухую склянку с притертой пробкой. Раствор Гетри по окраски эквивалентен раствору хлорофилла концентрации 85 мг/л.

Раствор йода в йодиде калия (I в KI). Растворить 2 г KI в 5 мл дистиллированной воды, добавить 1 г металлического йода, после полного растворения последнего долить 295 мл воды. Хранить реактив в темной склянке с притертой пробкой.

Хромовая смесь. Растворить в большой колбе 6 г К₃Сr₂О₇ в 100 мл воды. Добавить 100 мл концентрированной серной кислоты (прилить осторожно малыми порциями, перемешивая и охлаждая колбу струей водопроводной воды). После полного охлаждения перелить в толстостенную склянку. После мытья посуды жидкость сливать обратно в ту же склянку. После долгого употребления раствор приобретает зеленую окраску - такая смесь непригодна для дальнейшего использования.

Раствор едкого бария.Перед тем как приготовить раствор едкого бария, дистиллированную воду необходимо прокипятить. Для приготовления раствора берем навеску 7 г едкого бария, который растворяется в 1 л воды. Реактив приготовляется под тягой. Раствор хранится в герметической закрытой склянке.

Фенолфталеин. 0, 5 г растворяется в 50 см³ спирта и прибавляется затем 5 см³ воды. Пределы рН: 8, 3 -10, 0.

Реактив Фелинга. Готовится из двух растворов, которые хранятся отдельно и только перед употреблением смешиваются в равных количествах: 1-й раствор - 40 г медного купороса в 1 л воды, 2-ой раствор - 200 г сегнетовой соли и 150 г КОН в 1 л воды.

Крахмальный агар. Поместить в колбу 2 г мелко нарезанного агар-агара, прилить 100 мл воды и осторожно прокипятить до полного растворения агара, 2 г крахмала размешать стеклянной палочкой с 10 мл холодной воды, вылить в кипящий раствор агара и вновь довести до кипения. Горячую смесь разлить в чашки Петри.

Раствор краски Судан III. Растворить в фарфоровой чашке 0, 2 г краски Судан III в 20 мл 96-ного спирта, добавить 20 мл глицерина, тщательно размешать и профильтровать.

Спиртовой раствор гвояколовой смолы. 1 г гвояковой смолы растворить при нагревании в водяной бане в 70 мл этилового спирта, профильтровать и добавить 30 мл дистиллированной воды. Хранить в плотно закрытой посуде в холодильнике.

Раствор β -индолилуксусной кислоты (ИУК). Для стимуляции корнеобразования. Растворить 100 мл ИУК (гетероауксина) в 10-15 мл горячей воды и долить холодной воды до 1 л. Раствор пригоден для употребления только в течении нескольких часов.

Ланолиновая паста с ИУК. Растворить 10 мг ИУК в 50 мл горячей воды. Вылить 5 мл раствора в фарфоровую чашку с 5 г (чайной ложкой) ланолина расплавленного на кипящей водяной бане. Ланолин – высокоочищенный жир из овечьей шерсти, обычно применяемый в косметике. Размешивать стеклянной палочкой не менее 10 минут до получения кремообразной эмульсии. Если к пасте добавить каплю масляной кислоты, то равномерное распределение ИУК происходит быстрее: паста становится мягче, легче стирается и более эффективно проникает в растительные ткани.

Контрольная (водяная) паста готовится также путем растирания 5 г расплавленного ланолина с 5 мл воды: если в ростовую пасту добавляли масляную кислоту, то ее добавляют и к водяной пасте. Хранить пасты следует на холоде.

Приготовление обезвоженного CaCl₂. CaCl₂ необезвоженный прокаливают на железной сковороде, насыпая слой не более 1-2 см. Прокаливают при сильном нагревании. Сначала он плавится с выделением кристаллической Н₂О. Затем с испарением воды обращается в рыхлые комочки. Их дополнительно прокаливают и еще теплыми помещают в герметичный сосуд.

Абсолютный спирт. Обычный спирт-ректификат имеет 96° крепости. Растираем небольшое количество CuSO₄ и прокаливаем его в тигле до перехода в белую окраску. Охлаждаем в эксикаторе и высыпаем в спирт. Если последние порции купороса не синеют – значит, в спирте воды нет, т.е. мы получили абсолютный спирт.

 

Пётр Арамаисович Иконников

Анна Алексеевна Белозерова

 

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ

Учебно-методический комплекс

Практикум для студентов

специальности 020803.65 «Биоэкология» и

направления 020200.62 «Биология» (бакалавр)

Часть III

 

Подписано в печать __________ г. Тираж _______экз.

Объем _______ п.л. Формат 60х84/16 Заказ № ________

Издательство Тюменского государственного университета

625003, г. Тюмень, Семакова, 10

 

⇐ Предыдущая1234

Поделиться: