ТЕМА: Серологический метод лабораторной диагностики. Серологические реакции: реакция агглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция преципитации. Диагностикумы и диагностические сыворотки.

II. Вопросы для проверки исходного (базового) уровня знаний:

1. Что такое иммунитет?

2. Каково строение иммунной системы?

3. Что такое иммунокомпетентные клетки?

4. Что такое антигены, их химический состав?

5. Что такое эпитоп антигена?

6. Что такое гаптен?

7. Антитела, определение, строение, классификация

8. Формы иммунного ответа.

II. Целевые задачи:

Студент должен знать: •Серологический метод лабораторной диагностики. •Серологические реакции. •Серодиагностика, сероиндикация (сероидентификация). •Диагностикумы, их получение •Диагностические сыворотки, получение, классификация. •Реакция агглютинации, цель, механизм, разновидности, способы постановки. •Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РПГА), компоненты, механизм. •Реакция торможения гемагглютинации (РТГА), компоненты, механизм. •Реакция преципитации, компоненты, механизм, способы постановки.

Литература: 1. Иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. Хаитова Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. – М., 2000. 2. Иммунодефицитные состояния / Под ред. Смирнова В.С., Фрейдлин И.С. Санкт-Петербург, 2000. 3. Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. Г. Лолора-младщего, Т. Фишера, Д. Адельмана. – М., 2000. Основная литература: 1. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. / Под ред. А.И. Коротяева, С.А. Бабичева. – Санкт –Петербург, 1989. 2. Микробиология с вирусологией и иммунологией / Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой – М., 1994. 3. Микробиология и иммунология. / Под. ред. А.А. Воробьева. -М., 1999. 4. Медицинская микробиология. / Под ред. акад. РАМН В.И. Покровского. – М., 2001. 5. Микробиология. / Под. Ред. А.А. Воробьева, А.С. Быкова, Е.П. Пашкова, А.М. Рыбаковой. – М., Медицина, 2003. Дополнительная литература: 1. Клиническая иммунология. / Под ред. А.В. Караулова. – М., 1999. 2. Иммунология для врача. / Под ред. С.А. Кетлинского, Н.М. Калининой. – СПБ., 1998.

Студент должен уметь: •Поставить ориентировочную реакцию агглютинации на предметном стекле •Поставить развернутую реакцию агглютинации •Поставить реакцию кольцепреципитации •Поставить реакцию пассивной гемагглютинации

Литература: 1.Иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. Хаитова Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. – М., 2000. 2. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. / Под ред. Л.Б. Борисова. –М., 1984. 3. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. /Под. Ред. В.В. Теца, 2002. 4. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Лебедева – М., 1980.

 

Восполнить недостающие знания поможет изучение специальной литературы, указанной выше.

 

III. Задания для самостоятельной работы по изучаемой теме:

Укажите классификацию диагностических сывороток?

__________________________________________________________________________________________________________________________

 

Заполните таблицу:

Серологические реакции	Компоненты	Механизм	Способы постановки
Реакция агглютинации
Реакция преципитации

 

Заполните таблицу:

Серологические реакции	Компоненты	Механизм	Зарисовать характер осадка
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РПГА)
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

 

Решите задачи:

а) У больного подозрение на хроническую стафилококковую инфекцию. Какой метод лабораторной диагностики наиболее эффективен в этом случае?

б) Для обнаружения количества агглютининов в сыворотке больного брюшным тифом какую серологическую реакцию необходимо поставить?

5. Продолжите высказывания:

Антиген-это

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Основные свойства антигена:

1._________________________________________2.________________________________________________3._____________________________

Иммуногенность-

__________________________________________________________________________________________________________________________

Специфичность-__________________________________________________________________________________________________________________________

 

6. Ответьте на вопросы:

1. Для какой цели используют реакции АГ+АТ? ______________________

_____________________________________________________________

 

2. Что такое серодиагностика? ____________________________________

_____________________________________________________________

 

3. Что такое сероиндикация (серотипирование)? _____________________

_____________________________________________________________

 

 

7. Допишите недостающие сведения в нижеследующем тексте:

•При постановке реакции агглютинации с целью сероиндикации (серотипирования) диагностическим препаратом является

____________________________________________________,

она содержит известные_________________________________________

 

•Адсорбированная агглютинирующая сыворотка

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

•Неадсорбированная агглютинирующая сыворотка

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

8. Составьте схему получения адсорбированной агглютинирующей сыворотки методом истощения (адсорбции) по Кастеллани.

 

9.Ответьте на вопросы:

• Какие ингредиенты используются при серодиагностике сыпного тифа?

Исследуемый материал ____________________________________

содержит_______________________________

Диагностический препарат________________________________

содержит_______________________________________

• Какие фазы выделяют в реакциях АГ+АТ. Охарактеризуйте эти фазы.

 

 

10.Продолжите высказывания:

•Реакция преципитации

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

•В первой фазе реакции преципитации происходит

__________________________________________________________________________________________________________________________

•Во второй фазе реакции преципитации происходит

__________________________________________________________________________________________________________________________

•Антиген, участвующий в реакции преципитации

________________________________________________________________________________________________________________________

•Преципитирующие сыворотки получают

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

САМОКОНТРОЛЬ:

Укажите один правильный ответ:

1.Какие компоненты являются обязательными для всех серологических реакций?

А. Антигены и антитела;

Б. Комплемент;

В. Эритроциты.

 

2. Какой антиген участвует в реакции агглютинации?

А. Растворимый;

Б. Нерастворимый;

В. Мелкодисперсный.

 

3. Какой антиген участвует в реакции преципитации?

А. Растворимый;

Б. Нерастворимый;

В. Корпускулярный.

 

4. Крупнохлопчатый осадок образуется, если в реакции агглютинации участвуют:

А. Подвижные бактерии;

Б. Неподвижные бактерии;

В. Вирусы.

 

5. Мелкозернистый осадок образуется, если в реакции агглютинации участвуют:

А. Подвижные бактерии;

Б. Неподвижные бактерии.

 

6. Что такое серодиагностика?

А. Обнаружение неизвестных антител в сыворотке обследуемого;

Б. Обнаружение неизвестных антигенов в исследуемом материале;

 

7. Чем отличается серологическая реакция от иммунологической?

А. Серологическая реакция проводится in vivo;

Б. Серологическая реакция проводится in vitro;

В. Серологическая реакция не является специфической;

Г. Серологическая реакция является специфической.

 

8. Для какой цели используется диагностическая сыворотка?

А. Для серодиагностики;

Б. Для сероиндикации;

В. Для обнаружения антител.

 

9. Для какой цели используется диагностикум?

А. Для серодиагностики;

Б. Для сероиндикации;

В. Для обнаружения антигенов.

 

10. Сколько компонентов участвует в реакции торможения гемагглютинации (РТГА)?

А. 2;

Б. 3;

В. 4.

Г. 5.

 

11. Сколько компонентов участвует в реакции преципитации?

А. 2;

Б. 3;

В. 4;

Г. 5.

 

12. Сколько компонентов участвует в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)?

А. 2;

Б. 3;

В. 4;

Г. 5.

 

13. Сколько компонентов участвует в реакции агглютинации?

А. 2;

Б. 3;

В. 4;

Г. 5.

 

14. Какая диагностическая сыворотка участвует при постановке реакции агглютинации с целью сероиндикации?

А. Преципитирующая;

Б. Лизирующая;

В. Гемолитическая;

Г. Агглютинирующая.

 

15. Какая диагностическая сыворотка участвует при постановке реакции преципитации с целью сероиндикации?

А. Преципитирующая;

Б. Лизирующая;

В. Гемолитическая;

Г. Агглютинирующая.

 

ЗАНЯТИЕ №18

ТЕМА: Комплементзависимые серологические реакции. Реакции иммунного лизиса (бактериолиза, цитолиза, гемолиза). Реакция связывания комплемента. Современные серологические и несерологические методы диагностики. Иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммунный анализ (РИА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

I. Вопросы для проверки исходного (базового) уровня знаний:

Что такое серологическая реакция? Чем отличается серологическая реакция от иммунологической?

Какие компоненты участвуют в серологических реакциях?

Что такое серодиагностика?

Что такое сероиндикация (серотипирование)?

 

II. Целевые задачи:

Студент должен знать: •Реакции иммунного лизиса, компоненты, механизм, разновидности реакции иммунного лизиса. •Реакция связывания комплемента (РСК), компоненты, механизм, цель использования. •Серологические реакции с использованием меченых антител или антигенов (реакция иммунофлюоресценции, иммуноферментный анализ, радиоиммунный анализ). •Полимеразная цепная реакция.

Литература: 1.Иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. Хаитова Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. – М., 2000. 2.Иммунодефицитные состояния / Под ред. Смирнова В.С., Фрейдлин И.С. Санкт-Петербург, 2000. 3.Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. Г. Лолора-младщего, Т. Фишера, Д. Адельмана. – М., 2000. Основная литература: 1.Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. / Под ред. А.И. Коротяева, С.А. Бабичева. – Санкт-Петербург, 1989. 3.Микробиология с вирусологией и иммунологией / Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой – М., 1994. 4.Микробиология и иммунология. / Под. ред. А.А. Воробьева. -М., 1999. 5.Микробиология. / Под. Ред. А.А. Воробьева, А.С. Быкова, Е.П. Пашкова, А.М. Рыбаковой. – М., Медицина, 2003.   Дополнительная литература: 1.Клиническая иммунология. / Под ред. А.В. Караулова. – М., 1999. 2.Иммунология для врача. / Под ред. С.А. Кетлинского, Н.М. Калининой. – СПБ., 1998.

Студент должен уметь: Поставить и учесть реакцию гемолиза Поставить и учесть реакцию связывания комплемента Учесть результаты иммуноферментного анализа, реакции иммунофлюоресценции.

Литература: 1.Иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. Хаитова Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. – М., 2000. 1.Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. / Под ред. Л.Б. Борисова. –М., 1984. 2.Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. /Под. Ред. В.В. Теца, 2002. 3.Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Лебедева – М., 1980.

 

Восполнить недостающие знания поможет изучение специальной литературы, указанной выше.

 

III. Задание для самостоятельной работы по изучаемой теме:

1. Заполните таблицу:

Серологические реакции	Компоненты	Механизм	Разновидности
Реакции иммунного лизиса

 

2. Заполните таблицу:

Серологическая реакция	Цель использования	Компоненты	Механизм	Результат
Реакция связывания комплемента (РСК)

 

3. Заполните таблицу:

Серологические реакции	Цель использования	Компоненты	Метка	Механизм	Результат
Реакция Иммунофлюоресценции
Иммуноферментный анализ
Радиоиммунный анализ

4. Заполните таблицу:

Несерологическая реакция	Принцип метода	Этапы метода	Преимущества метода
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

 

5. Решите задачу:

Известно, что выделение чистой культуры возбудителей туберкулеза занимает несколько недель, а микроскопия исследуемого материала достаточно мало эффективна. Какой метод лабораторной диагностики позволяет поставить диагноз с наиболее высокой точностью и через несколько часов?

 

6. Какие задачи решают при серодиагностике инфекционного заболевания? _________________________________________________________

_____________________________________________________________

 

 

7. Составьте схему постановки прямого и непрямого методов реакции иммунофлюоресценции:

Прямой метод:

 

 

Непрямой метод:

 

 

8. Составьте схему постановки прямого и непрямого методов иммуноферментного анализа:

Прямой метод:

 

 

Непрямой метод:

 

 

9. Составьте схему постановки прямого и непрямого методов радиоиммунного анализа:

Прямой метод:

 

Непрямой метод:

 

10.Решите задачу.

При проведении непрямого иммуноферментного анализа с целью серодиагностики сифилиса какие используются ингредиенты?

Исследуемый материал

____________________________________содержит______________

Диагностические препараты:

1._____________________________________содержит_______________

2._____________________________________содержит_______________

 

САМОКОНТРОЛЬ:

Укажите один правильный ответ:

1.Сколько ингредиентов участвует в реакциях иммунного лизиса?

А. 2;

Б. 3;

В. 4;

Г. 5.

 

2. Какие антитела участвуют в реакции связывания комплемента (РСК)?

А. Агглютинины;

Б. Преципитины;

В. Лизины;

Г. Опсонины.

 

3. Индикаторной системой при постановке реакции связывания комплемента является:

А. Агглютинирующая;

Б. Гемолитическая;

В. Преципитирующая.

 

4. Кто является донором комплемента при постановке РСК?

А. Кролик;

Б. Морская свинка;

В. Человек;

Г. Белые мыши.

 

5. Как получить кроличью гемолитическую сыворотку?

А. Путем иммунизации кролика эритроцитами кролика;

Б. Путем иммунизации барана эритроцитами барана;

В. Путем иммунизации кролика эритроцитами барана;

Г. Путем иммунизации барана эритроцитами кролика.

 

6. Какая метка используется при постановке иммуноферментного анализа (ИФА)?

А. Радиоизотоп;

Б. Фермент (пероксидаза);

В. Флюорохром.

 

7. Какая метка используется при постановке радиоиммунного анализа (РИА)?

А. Радиоизотоп;

Б. Фермент (пероксидаза);

В. Флюорохром.

 

8. Какая метка используется при постановке реакции иммунофлюоресценции (РИФ)?

А. Радиоизотоп;

Б. Фермент (пероксидаза);

В. Флюорохром.

 

9. Какая реакция относится к несерологическим?

А. ИФА

Б. РИФ

В. ПЦР

Г. РИА

 

10. Что такое бактериолиз?

А. Лизис эритроцитов;

Б. Лизис бактерий;

В. Лизис клеток.

 

11. Что такое цитолиз?

А. Лизис эритроцитов;

Б. Лизис бактерий;

В. Лизис клеток.

 

12. Что такое гемолиз?

А. Лизис эритроцитов;

Б. Лизис бактерий;

В. Лизис клеток.

 

13. Какой компонент в реакции связывания комплемента считается неспецифическим?

А. Гемолитическая сыворотка;

Б. Эритроциты барана;

В. Комплемент;

Г. Сыворотка обследуемого.

 

14. Как получить кроличью антиглобулиновую сыворотку?

А. Путем иммунизации кролика эритроцитами барана;

Б. Путем иммунизации кролика человеческими иммуноглобулинами;

В. Путем иммунизации кролика иммуноглобулинами кролика.

 

15. Антиглобулиновая сыворотка, меченая флюорохромом, используется для постановки:

А. Иммуноферментного анализа, прямого метода;

Б. Иммуноферментного анализа, непрямого метода;

В. Реакции иммунофлюоресценции, прямого метода;

Г. Реакции иммунофлюоресценции, непрямого метода;

Д. Радиоиммунного анализа, непрямого метода.

⇐ Предыдущая123456789

Поделиться: