III. Биологически важные реакции a- аминокислот

1. Способность к образованию внутренних солей (биполярных, или «цвиттер» – ионов). Карбоксильная группа проявляет кислотные свойства, диссоциирует с отщеплением протона. Амино-группа, которая проявляет основные свойства, способна протонироваться по неподеленной электронной паре атома азота. В результате в водных растворах и в кристаллическом состоянии аминокислоты существуют в виде внутренних солей:

₊

NH₂-CH-COOH NH₃-CH-COO^-

½ ® ½

R R

 

Суммарный заряд молекулы зависит от строения радикала R и рН среды:

а) моноаминомонокарбоновая кислота:

 

OH^- ₊ H⁺ ₊

[NH₂-CH₂-COO^-] ^-1 ® [NH₃-CH₂-COO ^-]⁰ ®[ NH₃-CH₂-COOH]⁺¹

 

б) моноаминодикарбоновая кислота:

+ +

NH₂-CH-COO^{- -2} NH₃-CH-COO^{- -1} NH₃-CH-COO^- °

½ HO^- ½ Н⁺ ½

CH₂ ® CH₂ ® CH₂

½ ½ ½

COO^- COO^- COOН

 

2Н⁺

 

₊

NH₃-CH-COOH ⁺¹

½

CH₂

½

СOOH

в) диаминомонокарбоновая кислота:

NH₂-CH-COO^- ° ⁺ NH₃-CH-COO^{- +1 +} NH₃-CH-COOH ⁺²

½ HO^- ½ Н⁺ ½

(CH₂ )₄ ® ( CH₂ )₄ ® (CH₂)₄ ^- ½ ½ ½

⁺ NH₃ ⁺NH₃ ⁺NH₃

 

 

­¯ 2НО^-

NH₂-CH-COO^{- -1}

½

(CH₂)₄

½

NH₂

Свойство аминокислот изменять заряд при определенном значении рН, а следовательно, двигаться в электрическом поле к разным электродам лежит в основе метода электрофореза, который используется для разделения смесей аминокислот и белков.

Значение рН среды, при котором суммарный заряд молекулы равен нулю, называется изоэлектрической точкой (ИЭТ, или рН_i , или pI). В ИЭТ молекула теряет электрофоретическую подвижность, снижается растворимость белка в воде, он может выпадать в осадок.

2. Реакция декарбоксилирования:

 

in vivo

декарбоксилаза

CO₂ +

 

in vitro

t°, Ba(OH)₂

гистидин гистамин

 

 

 

СО₂ +

 

 

триптофан триптамин

 

В результате реакции декарбоксилирования a- аминокислот образуются биогенные амины, обладающие сильной физиологической активностью, многие из них являются аллергенами, большинство обладает сосудосуживающими свойствами (исключение – гистамин), участвуют в регуляции жизненно важных функций организма.

3. Реакции дезаминирования:

а) дезаминирование по Ван-Слайку in vitro:

NH₂-CH₂-COOH + HONO N₂­ + HO-CH₂-COOH + H₂O

глицин гликолевая кислота

По объему выделяющегося газообразного азота судят о количестве аминокислоты в растворе.

б) неокислительное дезаминирование in vivo протекает у низших организмов (бактерий, грибов):

-NH₃

HOOCCH-CH ₂ ®COOH HOOC –CH=CH-COOH

¯ фумаровая кислота

NH₂

аспарагиновая кислота

 

в) окислительное дезаминирование in vivo:

фермент, НАД⁺

HOOC – (CH₂)₂ – C H ^_ COOH HOOC-(CH₂)₂-C-COOH

½ -НАД^.H; -H⁺

NH ₂ NH

глутаминовая кислота

H₂O

HOOC-(CH₂)₂-C-COOH

-NH₃

O

a- кетоглутаровая кислота

Реакция протекает под действием фермента глутаматдегидрогеназы и кофермента

НАД⁺.

 

4. Реакция трансаминирования (переаминирования) in vivo:

фермент трансфераза

NH₂-CH-COOH +

½ пиридоксальфосфат

CH₃ (вит. В₆)

аланин a- кетоглутаровая

кислота

О=С-СOOH + НООС-СH-(СH₂)₂-СOOH

½ ½

CH₃ NH₂

пировиноградная глутаминовая

кислота кислота

 

5. Способность к образованию полипептидов. Карбоксильная группа одной аминокислоты может реагировать с аминогруппой другой аминокислоты с образованием пептидной связи:

-H₂O

NH₂-CH-C=O + H -NH-CH-C=O

½ ½ ½ ½

R ₁ OH R₂ OH

Дипептид

Последовательность аминокислот, соединенных между собой пептидными связями, является первичной структурой белков.

Процесс, обратный образованию пептида, называется гидролизом. Существуют три вида гидролиза белка: кислотный, щелочной и ферментативный. Результатом является образование смеси аминокислот, которые могут быть разделены и идентифицированы методами хроматографии или электрофореза.

Таким образом определяют аминокислотный состав белка.

 

Рассмотрим пример: Составить трипептид Глу-Асн-Про и дать ему полную

характеристику.

-2H₂O

+ +

 

 

 

глутамил-аспарагинил-пролин

 

В названии пептида окончания аминокислот меняются на «ил», кроме последней аминокислоты.

Характеристика пептида . 1. Реакция пептида на индикатор – кислотная, так как в пептиде две кислотные группы – СOOH и одна основная –NH₂

 

(группа – С=О не проявляет основных свойств – см. классификацию)

½

NH₂

2. Суммарный заряд пептида в водной среде:

 

^-1

 

⁺

 

 

3. Изменение суммарного заряда с изменением рН среды. Запишем пептид в упрощенном виде, выделив лишь заряженные группы и обозначив остальную часть пептида радикалом R: ₊

^{0 +1}

-1 H^{+ +} H⁺

⁺

 

OH^-

 

 

-2

 

 

4. Изоэлектрическая точка пептида (определение см. выше) лежит в слабокислой

среде.

5. Поверхностные свойства пептида зависят от соотношения гидрофильных и

гидрофобных боковых радикалов и концевых групп.

В пептиде содержатся 4 гидрофильные группы: 2-СOOH, -C=O, ⁺NH₃

и одна гидрофобная: радикал пролина ½

NH₂

Гидрофильных групп больше, поэтому поверхность пептида гидрофильна, он растворим в воде.

Пептиды являются продуктом частичного гидролиза белков. Но многие пептиды присутствуют в свободном состоянии в клетках и тканях и выполняют специфические биологические функции. К ним относятся гормоны, антибиотики и другие соединения, обладающие высокой биологической активностью.

Самостоятельное значение пептидов в процессах жизнедеятельности человеческого организма велико. В нервной ткани выделены нейропептиды, влияющие на функции нервной системы: энкефалины, эндорфины – «опиоидные» пептиды, аналогично морфину подавляющие боль; пептиды, действующие на сон; пептиды памяти и др.

Известны гормоны пептидной природы: окситоцин, вазопрессин (гормоны задней доли гипофиза), меланоцитстимулирующий гормон (выделяется средней долей гипофиза), адренокортикотропный гормон (АКТГ) (передней доли гипофиза), глюкагон (поджелудочной железы), гормоны желудочно-кишечного тракта и др.

К пептидам относятся токсины, выделенные из бледной поганки, токсины яда пчел, змей, скорпионов, морских позвоночных.

В медицине используются пептиды-антибиотики: грамицидин S, актиномицин и др.; пептиды-регуляторы иммунитета: тафцин; пептиды – заменители сахара: аспартам и т.д.

 

 

Строение пептидной связи

..

¾ ¾ N ¾

½

H

 

 

Атом углерода пептидной связи находится в sp² –гибридизации. Неподеленная электронная пара атома азота вступает в сопряжение с p- связью. Таким образом, пептидная связь представляет собой трехцентровую r, p- сопряженную систему.

 

В результате связь C-N приобретает характер двоесвязанности, становится «полуторной». Вращение вокруг этой связи затруднено. В большинстве природных белков и пептидов имеет место транс-конфигурация пептидной связи, что важно для стабилизации вторичной структуры.

Для пептидной связи характерно явление лактам-лактимной таутомерии:

OH

½

N ¾ ¾ C = N ¾

½

H

лактам лактим

 

За счет лактимной формы пептиды дают качественную цветную реакцию с ионами Сu²⁺ аналогично биурету – веществу, получаемому из 2 молекул мочевины:

 

+

-NH₃

 

мочевина биурет

 

 

 

лактамная форма биурета лактимная форма биурета

 

 

 

 

 

Эта реакция называется биуретовой. Она используется как качественная реакция для обнаружения пептидов и белков.

 

⇐ Предыдущая123456789Следующая ⇒

Поделиться: