Подсчет количества лейкоцитов

    Цель работы: познакомится с принципом и методикой подсчета лейкоцитов. Подсчитать их количество в крови у одного из студентов.

    Необходимо для работы: испытуемый, микроскоп с окуляром 10 или15, счетная камера Горяева, шлифованное покровное стекло, штатив с маленькой пробиркой, бюретка или мерный цилиндр на 3-5 мл с делениями в долях мм, капилляр Сали с резиновой трубкой и маленькой грушей, смеситель для лейкоцитов, стеклянная палочка, стерильные скарификатор и пинцет, спирт, йод, вата, 5%-ный р-р уксусной кислоты, окрашенный метиленовым синим.

П р о в е д е н и е р а б о т ы:

1. Кровь из пальца набрать в смеситель до метки 0,5 и сюда же добавить р-р уксусной кислоты до метки 11. Зажав двумя пальцами отверстия, меланжер тщательно встряхнуть.

2. При пробирочном разведении в чистую и сухую пробирку точно отмерить 0,4 мл р-ра уксусной кислоты. Набрать с помощью капилляра Сали 20 мм³ крови и осторожно выпустить ее на дно пробирки. Промыть этим же раствором из верхнего слоя капилляр и, осторожно встряхнуть пробирку, тщательно перемешать содержимое. Полученное разведение 1:21 можно принять за 1:20.

3. Далее, провести опыты как описано в пп.5-8 работы №2

4. Техника подсчета. Сосчитать количество лейкоцитов в 25 больших квадратах под малым увеличением, пользуясь правилом Егорова.

5. Рассчитать количество лейкоцитов при разбавлении крови в 20 раз по формуле:  

 

Л=С_лх20 _х 4000,  где С_л – сумма подсчитанных лейкоцитов.

   400

 

6. В протоколе кратко описать ход работы, внести полученные данные и сделать выводы (соответствие физиологической норме).

РАБОТА №4

Определение количества гемоглобина

    Цель работы: ознакомиться с колориметрической методикой определения количества гемоглобина по методу Сали и определить его количество в крови у одного из студентов.

    Необходимо для работы: испытуемый, гемометр Сали, стерильные скарификатор и пинцет, спирт, йод, вата, 0,1 N р-р соляной кислоты, дистиллированная вода.

П р о в е д е н и е р а б о т ы:

1. Набрать в градуированную пробирку гемометра Сали 0,2 мл (до нижнего кругового кольца) децинормального раствора соляной кислоты. Кислоту набирать обычной пипеткой, имеющейся в приборе (рис.2)

2. Проколоть палец и набрать капилляром Сали 20 мм³ крови.

3. Кровь желательно взять у того же студента, у которого определяли количество эритроцитов.

4. Погрузив кончик капилляра в раствор HCl, выпустить кровь на дно градуированной пробирки под кислоту, а из верхнего слоя раствора промыть два-три раза капилляр (следить за тем, чтобы не образовалась пена).

5. Встряхивая пробирку легкими ударами пальца по ее дну, быстро перемешать содержимое, чтобы предотвратить образование сгустка на дне.

6. Вставить градуированную пробирку в корпус гемометра, оставить на пять минут до полного гемолиза и образования соляного гематина (темно-коричневый цвет).

7. Пипеткой добавлять по каплям дистиллированную воду до выравнивания цвета полученной смеси с цветом стандартных растворов. Каждый раз после добавления воды содержимое пробирки тщательно перемешивать стеклянной палочкой. Сравнивать цвета следует в проходящем дневном свете, держа гемометр в вытянутой руке.

8. Определить количество гемоглобина в исследуемой крови в граммах по показаниям шкалы градуированной пробирки на уровне нижнего мениска окрашенного раствора.

9. Рассчитать количество гемоглобина в относительных единицах Сали. Пересчет произвести с учетом того, что в стандартном растворе 166,7 г/л (16,67%) гемоглобина соответствуют отн. ед. Сали.

10. В протоколах кратко описать ход работы, внести полученные результаты и сделать выводы о соответствии физиологической норме.

 

 

Рис. 2. Схема гемометра Сали: 1 - пробирки со стандартным раствором хлорида гематина; 2 – пробирка для определения количества гемоглобина; 3 – пипетка для крови; 4 - пипетка для воды; 5 – палочка для размешивания.

 

РАБОТА №5

⇐ Предыдущая1234567Следующая ⇒

Поделиться: