Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии |
Качественные показатели спермы
Подвижность неразбавленной спермы быка определяют при температуре 40 °С. На теплое предметное стекло наносят каплю спермы и 2—4 капли 3%-ного раствора цитрата натрия, перемешивают, накрывают покровным стеклом и просматривают не менее трех полей зрения. Поскольку оценка спермиев по подвижности достаточно субъективна, то для контроля в необходимых случаях можно определять количество живых и мертвых спермиев. При оценке спермы на густоту и подвижность спермиев применяют комплексное обозначение, позволяющее удобно отражать ее качество. На пример, Г-10 баллов означает, что исследуемая сперма густая и 100 % спермиев обладают головным прямолинейным движением; Г-9 баллов означает 90%, 8-80, Г-7-70% подвижных спермиев и т. д. Концентрацию сперми-е в (количество в 1 мл эякулята) наиболее точно определяют в счетной камере Горяева или другого автора (см. Практикум по акушерству). Это один из основных показателей качества спермы, на который ориентируются при разбавлении эякулята. Определение количе- ства мертвых спермиев. В. А. Морозов предложил использовать красители, которые окрашивают спермиев только мертвых и с колебательными движениями. Самый простой способ окраски спермы быков следующий. Исследуемая сперма должна иметь концентрацию спермиев 0,2—0,4 млрд/мл, при более высокой концентрации эякулят разбавляют 3%-ным раствором цитрата натрия до указанного показателя. Готовят 1—5%-ный раствор эозина водорастворимого на 3%-ном растворе лимоннокислого натрия. На чистое обезжиренное теплое (35 + 2 °С) предметное стекло наносят каплю спермы, добавляют 2—3 капли краски, подогретой до 30 "С, смешивают 2—4 с и делают три тонких мазка, которые высушивают. В каждом препарате подсчитывают 100— 150 спермиев, отдельно учитывая количество с окрашенными и неокрашенными головками. Определение содержания патологических форм спермиев и включений спермы у быков проводят в мазках, окрашенных азур-эозином или другими красителями, где подсчитывают 100—200 спермиев и различные включения. Среди нормальных спермиев всегда находится более или менее значительное количество патологических форм. Чаще аномалии выявляются в хвостовой части спермиев, основании головки и шейки. С возрастом к моменту физиологической зрелости производителя количество аномальных спермиев уменьшается. Могут встречаться самые различные патологические формы спермиев: гигантского размера или карликовые, спермии с дву-мя-тремя головками, но общим хвостом, с двумя хвостами, с укороченным хвостом, его деформацией или отсутствием, с цитоплазматической капель кой, слишком большой или маленькой головкой и другие формы. Иногда встречаются спермии, лишенные головки, но способные двигаться (рис. 29). Л. А. Черномаз отмечает как признак патологических спермиев слабо выраженный перфораторий или его отсутствие. Нарушение структуры перфора-тория и оболочки спермия — признак начальных изменений спермиев при их хранении. Большое количество патологических спермиев свидетельствует о нарушении спермиогенеза, о вредном влиянии патологически измененных секретов придаточных половых желез и мочевых путей или, наконец, указывает на нарушение правил получения спермы и ее хранения во внешней среде от выделения до исследования. В качестве конкретных причин образования уродливых форм спермиев отмечают: слабо развитые семенники; поражения семенника и придатка (гигантские и карликовые спермии); длительные промежутки между коитусами, обусловливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные головки, изолированные хвосты); половое истощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недостаточного кормления (спермии с цито-плазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста — незрелые спермии). Чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермии. Большое значение в образовании патологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функции мошонки. Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавителей, попадание воды). При микроскопическом исследовании спермы выявляются следующие включения: клетки плоского, переходного эпителия, клетки семенных канальцев (зернистые); форменные элементы крови — эритроциты и лейкоциты; гиалиновые шары, круглые или овальные, иногда слоистые и напоминающие зерна крахмала, амилоидные тельца, сильно блестящие — лецитино-вые зернышки, кристаллы спермина и др. Если примесей в сперме мало, это считается нормой. Если примесей много, необходимо выявить их источник и причину. Предельные количества патологических спермиев показаны в таблице 6. Содержание патологических форм спермиев (Nn) в процентах, коэффициент (индекс) патологии (Кn) и содержание включений спермы (Nb) в процентах вычисляют по формулам: Nn = П*100/(П+Н) Кn = П/Н Nb = В*/(П+Н) где П— количество патологических форм спермиев; Н— количество нормальных форм спермиев; В— количество включений спермы. Значительное количество патологических спермиев следует безусловно расценивать как признак наступающей импотенции. Дегидрогеназная активность спермы быка определяется скоростью обесцвечивания метиленовой сини в капиллярах или в пробирках (метод Н. П. Шер-гина). Первый вариант получил более широкое распространение в практике. На предметное стекло, подогретое до 30—37 "С, наносят каплю спермы и добавляют теплой пипеткой каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, подогретого до 30 °С. Капли тщательно перемешивают и набирают смесь в теплую (30—37 °С) стеклянную трубку длиной 5—6 см с внутренним диаметром 0,8—1 мм, чтобы высота столбика была 2—3 см. Заполненную смесью трубочку кладут горизонтально на лист белой бумаги в термостат с температурой 37 ± 0,5 °С. Записывают время начала исследования и окончания обесцвечивания метиленовой сини. Дегидрогеназ-ную активность спермы (Да) в условных единицах вычисляют по формуле: Да = ПctC/10 где Пс — подвижность спермиев, баллы; t—время обесцвечивания метиленовой сини в опыте, мин; С — концентрация спермиев, млрд/мл; 10 — постоянный коэффициент. Все исследования спермы проводят при строгом соблюдении действующих стандартов и инструкций по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. В результате исследования могут быть установлены следующие недостатки: асперматизм (Азм) — отсутствие спермы; олигосперматизм (Озм) — малый объем эякулята; аспермия (А) — отсутствие в сперме спермиев; олигоспермия (О) — недостаточное число спермиев в эякуляте; некроспермия (Н) — мертвые спермин; тератоспермия (Т) — патологические спермин и др. Производителя можно использовать для естественного или искусственного осеменения, если его сперма отвечает требованиям действующей инструкции по осеменению животных. Биологическая проба спермы. Решающее значение для оценки спермы имеет определение оплодотворяющей способности спермиев. Установлено, что она может быть выявлена только в отношении определенной группы самок, находящихся при конкретных условиях существования и времени осеменения. Оплодотворение зависит от степени родства самки и производителя, состояния их здоровья, упитанности, качества кормления и др. Поэтому для определения оплодотворяющей способности спермы лучше всего использовать здоровых ремонтных телок. Правильно поставленная биологическая проба спермы на здоровых животных — самый надежный критерий ее оценки. Все другие методы являются только косвенными, т. е. они позволяют лишь условно судить об оплодотворяющей способности спермы. Сперма считается нормальной, если оплодотворяемость от первого осеменения составляет не менее 70—75 %. Быки с пониженной оплодотворяющей способностью спермы дают маложизненное потомство, и их нельзя использовать ни при искусственном, ни при естественном осеменении. Наблюдения показали, что даже всестороннее лабораторное исследование спермы иногда не отражает ее качеств. От некоторых жеребцов с прекрасными лабораторными показателями спермы оплодотворяемость кобыл оказывалась низкой, если интервалы между садками были больше 48 ч. Осеменение кобыл через 24—36 ч этими же производителями давало резкое повышение плодовитости. Этот факт X. И. Животков объясняет неодинаковой выживаемостью спермиев отдельных производителей в половом аппарате матки и предлагает применять у ценных производителей «биологическую пробу», заключающуюся в осеменении кобыл через различные промежутки времени. На основании учета итогов этих осеменений устанавливают индивидуальную нагрузку. |
Последнее изменение этой страницы: 2019-04-11; Просмотров: 603; Нарушение авторского права страницы