Замораживание спермы быков в форме гранул

(Из тетр)- Сперму разбавляют с расчетом,чтобы в 1-ой дозе (0,2 мл) было не менее 15 млн подвижных сперматозоидов после оттаивания спермы.

Сперму накапывают на поверхность сухого льда (-76 градус.)

2)твердой двуокоси углерода

3)второпластовая пластина-предварительно опускают ее в жидкий азот -196 град., затем после вскипания жидкого азота,поднимаеют пластину над поверхностью жидкого азота на 5 см и выдерживают на штативе (-76 градус.) – 5 минут. Через 5 мин. Опускают в жидкий азот для хранения. В хозяйствах хранят в сосудах Дюара. Оттаивание производят:достают гранулу из жидкого азота и помещают в емкость с 1 мл физ. Ра-ра(например:лимонно кислого натрия 2,9%), подогрев. До t38-40 градус., исп-т после оттаивания не позднее чем через 5 мин. (мы делали с водой)Предварит-но сперму разбавляют синтетической средой, разбавителем:

Разбавитель для замораживания спермы быка при т -196 град. В форме гранул: Лактоза,г 11,5 Желток, мл 20,0, глицерин, мл 5,0, спермосан-3тыс.ед.50,0 Вода дистил, мл 100,0.

После разбавления спермы ее помещают в бытовой холодильник при t (+2(-4)). Выдерживают в теч. 4 ч.-эквилибрация,(ее делают для того чтобы сперма постепенно замерзала, чтобы внутрь сперматозоида поступал глицерин).После производят накапывание спермы на сухую, второпластовую пластину. (глицерин замерзат при t-46,7 град,глицерин-это 3-х атомный спирт)

35.      Замораживание спермы быков в пайетах: Сперма замараж-ся с таким расчетом, чтобы в конечном объеме пайеты (0,2-0,25 мл) было не менее 15 млн подвижных спермиев,после оттаивания спермы.

Расфасовываем пайеты спермы и размещаем их в холодильнике (-2, +4) для эквилибрации(ее делают для того чтобы сперма постепенно замерзала) 4 ч, после помещаем над жидким азотом на медную пластину (-125 град, (не меньше,т.к. при 120 град. –рекристализация-сперматозоиды погибают.) и выдерж. В теч. 5 мин.,после кассеты с пайетой замораживают в жидк.азоте -196 градус. Предварительно разбавляем: Лактоза 80,5 г, фруктоза 12г, раффиноза пятиводная 19,5 г, магний сернокислый 0,1 г, глицерин 50 мл, спермосан 3500-750 тыс.ед., желток 200 мл, вода 1000 мл.Оттаиваем перед осемен. В теплой воде(38-40 градус)

34. Оттаивание гранул и осеменение коров.производят:достают гранулу из жидкого азота и помещают в емкость с 1 мл физ. Ра-ра(например:лимонно кислого натрия 2,9%), подогрев. До t38-40 градус., исп-т после оттаивания не позднее чем через 5 мин.(ß из тетр)

Оттаивание спермы в гранулах. Гранулы бывают трех видов: необлицованные малого объема 0,1-0,2 мл (с высокой концентрацией спермиев при разбавлении дозы перед осеменением изотоническим раствором лимоннокислого натрия); необлицованные большого объема 0,5-1,0 мл (со средней концентрацией спермиев, не требующей при оттаивании разбавления дозы раствором цитрата натрия); облицованные в полимерную оболочку объемом 0,25 мл.

Для оттаивания гранул объемом 0,1-0,2 мл необходимо иметь: стеклянные стерильные флаконы из-под пенициллина, 2,9%-ный раствор лимоннокислого натрия промышленного производства, расфасованного по 1 мл в ампулах вместимостью 3 мл; водяную баню вместимостью не менее 1 л; мерные стеклянные пипетки на 5-10 мл (по одной); пинцет анатомический длиной 25-30 см.

Для оттаивания гранул объемом 0,1-0,2 мл берут 1-2 ампулы или флакона с раствором лимоннокислого натрия и ставят в водяную баню (38°С) на 2-3 мин. Быстро (за 4-5 с) подтягивают к горловине сосуда Дьюара канистру (со стаканом) или матерчатый мешочек с гранулами, извлекают стерильным и охлажденным в жидком азоте пинцетом нужное число их и опускают в подготовленные флаконы или ампулы с раствором лимоннокислого натрия.

Ампулы или флаконы с гранулами спермы оттаивают 8-10 с и сразу же вынимают из водяной бани, не допуская дальнейшего нагревания спермы, вытирают насухо полотенцем или марлевой салфеткой и ставят в штатив. У подогретой до 18-25°С спермы определяют качество. От оттаивания до введения спермы животному должно проходить не более 10-15 мин.

Оттаивание гранул объемом 0,5-1,0 мл проводят без добавления раствора лимоннокислого натрия. Флакон погружают в водяную баню, подогревают до температуры воды 38°С, выдерживают 2-3 мин, затем в него вносят 2 гранулы замороженной спермы и дают постоять до перехода их в жидкую фазу. Флакон со спермой извлекают из водяной бани, вытирают насухо наружную поверхность и оценивают качество спермы.

Сперму в облицованных гранулах объемом 0,25 мл оттаивают следующим образом. Облицованную гранулу извлекают из сосуда Дьюара пинцетом с широкими браншами, быстро помещают в водяную баню с температурой 38°С и оттаивают в течение 8-10 с. Затем насухо протирают гранулу стерильной салфеткой и проверяют ее на герметичность путем легкого сжатия между двумя пальцами. После этого сперму оценивают на подвижность.

Осеменение:Визоцервикальный способ ИО коров и тёлок. При этом способе оплодотворения подготовленную семенную жидкость вводят коровам непосредственно в шейку матки
Процедура осеменения:

1. Обработка НПО. Фурацили 1:5000, ватным тампоном или салфеткой протирают кожу.

2. Проводят фламбирование влагалищого зеркала. Остужают, чтобы ладонь терпела.орошают тёплым физиологическим раствором или цитратом натрияю. Вводят. Раскрывают.

3. Вводят шприц-катетер в канал шейки матки вниз изгибом. Проводят ИО.

4. Обработка влагалищного зеркала, обработка шприца.

Цервикальное осеменение коров и тёлок с ректальной фиксацией шейки матки. Визоцервикальный способ некоторые считают более сложным. Заключается он в том, что оператор-осеменитель сначала вводит во влагалище животного специальное смотровое зеркало с осветителем (предварительно обеззараженное и прогретое).
Необлицованные гранулы:

Полистироловые пипетки, муфта-перехондник, пластиковый шприц. Все одноразовое. Пятипалая полиэтиленовая одноразовая перчатка.

Порядок работы аналогично.

1. Собирают инстурмент.

2. Оттаивают гранулу, набирают в инструмент.

3. Сначала вводят пипетку во влагалище, затем освобождают прямую кишку от содержимого – чтобы сперма не замёрзла.

Облицованные гранулы – зоошприц.

Маноцервикальный (ручношеечный) способ осеменения коров или крупных тёлок

Возможно использование только облицованных или необлицованных гранул.

Перчатка, ампулы, катетер. Всё одноразовое, стерильное.

1. Готовят инструмент. Обязательно наличие ножниц. Обрабатывают бранши ножниц, в руки берут катетеры в патронташе, у катетера 2 конца, один расширенный, второй суженный. Берут пакет с ампулами, обрабатывают угол, протыкают полиэтилен ампулой и достают её. Кладут на подставку. Берут катетер, полиэтиленовую оболочку используют как чехол. ТАМ, де колечко, присоединяется ампула. Берут ножницы, отстригают 3-4 мм от ампулы, присоединяют к катетеру.

2. Оттаивают гранулы.

3. Набирают сперму в катетер, засовывают обратно в чехол.

4. Обрабатывают НПО, высушивают салфеткой, надевают перчатку, при этом катетер в кармане халата. Орошают перчатку физиологическим раствором. 1-2 минуты массируют шейку матки. Извлекают руку до основания ладони, снимают чехол с катетера, берут в руку, которая во влагалище, вводят в канал шейки матки. Приподнимают вверх, сдавливают стенки ампулы, не разжимая пальцев извлекают из канала шейки матки, располагают на дне влагалища, снова делают массаж шейки матки.

5. Перчатку выворачивают, инструмент остаётся внутри перчатки, выкидывают.

С облицованными гранулами

Зоошприц.

1. Оттаивание гранул.

2. Извлечение корпуса, фланца и толкателя из пакета.

3. Берут гранулу, проводят оценку активности. Протирают гранулу салфеткой, засовывают в шприц, проталкивают толкателем, прокалывают иглой. Иглу извлекают.

4. Дальше сова массаж, вводят в канал шейки матки, давят на толкатель, достают, массаж, выкидывают с перчаткой.

37. Оттаивание пайет и осеменение коров.- перед осеменением в теплой воде (38-40 градус) (ß из тетр)

Оттаивание спермы в соломинках. Правой рукой поднимают крышку сосуда Дьюара и кладут рядом, а левой - поднимают пластмассовый стакан из канистры (со спермой нужного быка) до нижнего края горловины емкости. Правой рукой берут пинцет и концы его охлаждают в жидком азоте до прекращения кипения. Охлажденным пинцетом вынимают одну соломинку, быстро и энергично стряхивают отатки жидкого азота и немедленно переносят в воду для оттаивания. Канистру с оставшимися соломинками опускают на дно сосуда, который сразу же закрывают крышкой.

Оттаивание спермы в соломинках проводят в водяной бане при 38°С в течение 10 с. Затем соломинку вынимают, насухо протирают стерильной салфеткой. Одновременно оттаивают не более 2 доз при условии немедленного их использования (в течение 10-15 мин). Размеры водяной бани должны соответствовать размерам соломинок (высота не менее 150 мм, ширина 100-120 мм).

Осеменение- Если используют соломинки Визоцервикальный способ ИО коров и тёлок. При этом способе оплодотворения подготовленную семенную жидкость вводят коровам непосредственно в шейку матки
Процедура осеменения: Осеменительный инструмент состоит из толкателя и корпуса. Диаметр соломинки должен подходить к диаметру толкателя. Диаметры соломинок могут быть разными. Чехлы: защитное средство и упорное.

1. Оттаивается соломинка.

2. Собирается инструмент: устанавливают инстурмент на эбонитовой подставке, в руки берут оттаявшую пайету, ножницы(бранши обрабатывают спиртом). отстригают 2-3 мм со стороны спайки (если шарики только с одной стороны). Соломинку располагают внутрь корпуса (той стороной, где шарики).

3. Извлекают чехол из пакета, углубляют пайету в корпус, надевают чехол.

4. Берут влагалищное зеркало, готовят.

5. Вводят инструменты, давят на толкатель.

Доза для ИО коров и тёлок: 0,25 или 0,33 мл, концентрация 10-15 млн., активность 4

Цервикальное осеменение коров и тёлок с ректальной фиксацией шейки матки

1. Собирают инстурмент.

2. Оттаивают пайету

3. Сначала вводят пипетку во влагалище, затем освобождают прямую кишку от содержимого – чтобы сперма не замёрзла.

Пайеты – инструмент для осеменения. Всё аналогичн что и в визоцервикальном способе.

Маноцервикальный способ исп-ся только при исп-ии гранул.

⇐ Предыдущая6789101112131415Следующая ⇒

Поделиться: