Работа № 1. Подсчет эритроцитов крови в камере Горяева.

Оборудование: микроскоп, счетная камера Горяева, 4 мл 3% раствора хлорида натрия, капилляр от гемометра Сали, скарификатор, вата, спирт.

Цель работы: научиться определять количество эритроцитов в крови человека, оценивать результаты.

Ход работы:

1. Покровное стекло притирают к стеклу камеры Горяева до появления ньютоновских колец.

2. В пробирку налить 4 мл 3% раствора хлорида натрия.

3. Набрать в капиллярную пробирку от гемометра Сали до метки крови (0, 02 мл).

4. Осторожно выдуть кровь в пробирку с 3% раствором хлорида натрия и ополоснуть капилляр этим же раствором. Содержимое пробирки тщательно перемешать.

5. Концом круглой стеклянной палочки взять из пробирки, наклонив ее каплю крови и заполнить камеру Горяева.

6. Поместить камеру на предметный столик микроскопа под малое увеличение, найти сетку счетной камеры и перевести тубус микроскопа на большое увеличение.

7. Подсчитать количество эритроцитов в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, которые расположены по диагонали сетки. При подсчете используют правило Егорова: “относящиеся к данному квадрату считаются эритроциты, лежащие как внутри квадратика, так и на его левой и верхней границах”.

8. Количество эритроцитов вычисляется по формуле:

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратиках,

1/4000 мм³ – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратиком,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратиков, в которых подсчитывают эритроциты.

Результаты:

Выводы:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЕМОГЛОБИНА

В КРОВИ МЕТОДОМ САЛИ

Определение количества гемоглобина в крови производится колориметрическим методом Сали. Для этого имеется специальный прибор колориметр. Определить количество исследуемого вещества в колориметре можно в тех случаях, когда имеется параллельная зависимость между концентрацией данного вещества в растворе и интенсивностью окрашивания. Простейший тип колориметра – гемометр Сали, которым обычно пользуются для определения Нb в крови. Он состоит из трех пробирок одинакового диаметра. Одна из них пустая, а в других, запаянных с обоих концов, содержится стандартный раствор солянокислого гематина, соответствующий высшему пределу нормы Нb 166, 7 г/л. Все три пробирки вставлены в небольшой штатив, задняя стенка которого сделана из стекла молочного цвета. К гемометру приложена пипетка ёмкостью 0, 02 мл (или 20 мм³).

Работа № 2. Определение количества гемоглобина в крови по способу Сали (гематиновый метод).

Оборудование: гемометр Сали, пипетка, скарификатор, 0, 1 н раствор хлористоводородной кислоты, вата, спирт.

Цель работы: научиться определять количество гемоглобина по способу Сали и оценивать результаты.

Ход работы: в среднюю пробирку гемометра наливают 0, 1 н раствор хлористоводородной кислоты до метки. Пипеткой от гемометра Сали набирают 0, 02 мл крови (до метки) и выдувают на дно пробирки. Содержимое пробирки перемешивают, оставляют на 5-10 минут для превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к содержимому пробирки добавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока цвет полученного раствора не будет одинаков с цветом стандарта (добавляя воду, раствор перемешивают стеклянной палочкой). Цифра, стоящая на уровне мениска полученного раствора, указывают на содержание гемоглобина в исследуемой крови в г%. Для перевода в г/л полученную цифру умножают на 10. В норме концентрация гемоглобина (абсолютное содержание) у мужчин – 130-160 г/л, у женщин – 120-140 г/л. Сравнить полученный результат с нормой, оценить результат.

Результаты:

Выводы:

РАСЧЕТ ИНДЕКСОВ ЭРИТРОЦИТОВ.

Цветовой показатель характеризует соотношение между количеством гемоглобина крови и числом эритроцитов. Цветовой показатель позволяет оценить степень насыщения эритроцитов гемоглобином. Цветовой показатель здорового человека равен 0, 85-1, 05. Если цветовой показатель выше нормы – гиперхромия. Если ниже нормы – гипохромия.

Работа № 3. Вычисление индексов эритроцитов.

Цель работы: определить степень насыщенности эритроцитов гемоглобином, оценить результат.

Ход работы:

1. Цветной показатель (ЦП) или (Fi) фарб-индекс (Farb – цвет, index – показатель) относительное содержание гемоглобина в эритроцитах, рассчитывается по формулам:

ЦП= __________3*Hb (г/л)___________________

3 первые цифры числа эритроцитов в млн.

В нормеЦП =0, 8-1, 0 (у новорожденных – 0, 9-1, 3; до 1 года – 0, 75-0, 8; после 1 года – как у взрослых).

2. Среднее содержание гемоглобина в эритроците – СГЭ (MCH, Нb_Е):

Вычисление СГЭ производится по формуле:

 

СГЭ= содержание гемоглобина(г/л)_

число эритроцитов в л

В норме 24-36 пг (10^-12г), (у взрослых – 30 пг; у новорожденных – 33, 3 пг; 5-6 мес. – 26, 1пг)

Результаты:

Выводы:

 

⇐ Предыдущая1234Следующая ⇒

Поделиться: