Алгоритм лабораторной диагностики ТБ представлен на рис. 3.2.
|
|
|
|
|
|
|
| Мокрота
| Пациент прополаскивает рот и откашливает мокроту 3-5 раз
| Стерильный контейнер для мокроты
| 3-5 мл
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
1-3 дня
|
| Индуцированная мокрота
| Пациент ингалирует стерильный гипертонический раствор соли с использованием ультразвукового ингалятора
| Стерильный контейнер для мокроты
| 3-5 мл
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
1-2 дня
|
| Промывные воды бронхов (при бронхоскопии)
| Процедуру проводит врач во время бронхоскопии, в бронхи вводят 5-10 мл теплого физраствора, материал собирают в стерильную посуду
| Стерильный контейнер для мокроты
| 5-10 мл
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
1-2 дня
|
| Промывные воды желудка (для детей)
| До процедуры нельзя принимать пищу в течение 12 ч. Пациенту дают выпить 200 мл дистиллированной воды, после чего в желудок вводят зонд и отсасывают содержимое желудка в стерильную пробирку.
Детям после сна вводят назогастральный зонд и отсасывают 2-5 мл содержимого желудка, если содержимое желудка не удается получить, вводят 5-10 мл физраствора, который потом отсасывают, к образцу добавляют 8% содовый раствор в соотношении 1: 1.
| Стерильная пробирка
| Весь материал
| 30 мин, если не проведена нейтрализация кислотности желудочного сока
| Немедленная отсылка в лабораторию
|
| Моча
| Пациент подмывается с мылом, нельзя использовать дезинфицирующие средства
| Стерильный контейнер
| 50-100 мл
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
24 ч.
|
| Плевральные и иные пунктаты
| Проводят плевральную или иную пункцию
| Стерильная пробирка
| 5-10 мл
| Сразу после сбора
| Холодильник
+2-+8оС
24 ч.
|
| Ликвор
| Люмбальная пункция
| Стерильная пробирка
| > 5 мл
| Сразу после сбора, в течение 15 мин
| Холодильник
+2-+8оС
1-2 ч.
|
| Кал
| Деревянной или стеклянной палочкой берут материал из кала или из прямой кишки
| Стерильная пробирка
| 1 г
| 1-2 ч
| Холодильник
+2-+8оС
24 ч.
|
| Кровь
| Берут кровь из вены (место забора крови дезинфицируют 70% спиртом)
| Стерильная пробирка с гепарином или пробирка со специальной средой
| 3 мл
| 1-2 ч.
| Гемокультиватор
+37оС
24 ч.
|
| Гнойное отделяемое, менструальная кровь
| Берут материал стерильным шприцем или тампоном и помещают в стерильную пробирку
| Стерильная пробирка
| 1-5 мл
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
24 ч.
|
| Операционный и биопсийный материал
| Для исследования берут кусочек ткани из стенки патологического образования
| Стерильная посуда
|
| 1-2 ч.
| Холодильник
+2-+8оС
1-2 дня
|
Подозрение на наличие МЛУ-ТБ служит основанием для направления в лабораторию не менее двух образцов мокроты для бактериоскопического (мазок) и культурального (посев) исследований на наличие КУБ. Одна из двух полученных культур в последующем может использоваться для тестирования лекарственной чувствительности. Этот так называемый непрямой метод тестирования основан на исследовании культуры МБТ, выделенной из обработанного образца мокроты.
|
|
|
|
|
|
|
| Микроскопия
| Циль-Нильсен,
1 день,
cito 1 час
| Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минималь-ное кол-во 3 мл
| КУБ+
КУБ-
| Выявление и диагностика ТБ
| Отсутствие видоспецифичности
Нельзя отличить живые КУБ от неживых
Нельзя определить лекарственную чувствительность
|
| Флуоресцентный,
1 день,
cito 1 час
| Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минималь-ное кол-во 3 мл
| КУБ+
КУБ-
|
| Бактериологическое исследование
| На плотных средах Положительный результат для КУБ+ 28 дней, для КУБ- – 30 дней, отрицательный результат выдается после 8 недель
| Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минимальное кол-во 3 мл
| МБТ+
МБТ-
Количественное определение роста микобактерий
| Подтверждение диагноза ТБ
| Возможна контаминация культуры (допустимый уровень 2-5%)
Необходимо повторять посев
|
| В жидких средах (автоматизированные системы)
Положительный результат для КУБ+ 7 дней, для КУБ- – 18 дней, отрицательный результат выдается через 42 дня
| Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минимальное кол-во 3 мл
| МБТ+
МБТ-
|
| Определение ДНК МБТ и мутаций, ассоциированных с резистентностью к R
| Метод амплификации и детекции специфических последовательностей нуклеиновых кислот, проведение ПЦР в реальном времени, 1-2 дня, cito 3ч. от взятия образца
| Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала
| Выявление ДНК МБТ и мутаций в rpoB гене
| Диагностика ТБ и определение резистентности к рифампицину
| Нельзя отличить живые МБТ от неживых
|
| ТЛЧ
| ТЛЧ на плотных средах, результат через 28 дней после получения культуры
| Культура МБТ
| Определение чувствительности МБТ к ПТЛС
| Определение режима лечения
Определяется чувствительность к ПТЛС 1 и 2 рядов
| Низкая достоверность к PAS, Eto/Pto, Cs
|
| ТЛЧ на жидких средах в автоматизированных системах инкубации, результат через 14 дней
| Культура МБТ
| Определение чувствительности МБТ к ПТЛС
| Определение режима лечения
Определяется чувствительность к ПТЛС 1 и 2 рядов
| Низкая достоверность к PAS, Eto/Pto, Cs, Z
|
| Определение мутаций, ассоци-ированных с лекарственной устойчивостью МБТ
| Амплификация и обратная гибридизация на стрипе LPA результат через 1-2 дня
| Положительные образцы мокроты, индуцированной мокроты, культура МБТ
| Определение чувствительности МБТ к ПТЛС (выявление мутаций в генах inhA и katG (H), rpoB (R), gyrA (Fq) rrs (АГ/CР), embB (E))
| Ускоренная детекция лекарственной устойчивости
| Проводится не ко всем ПТЛС
|
| Генотипирование
| Сполиготипирование, полиморфизм длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ), MIRU-VNTR от 4 до 60 дней от момента получения культуры
| Культура МБТ
| Установление принадлежности штаммов к определенным семействам
| Эпидемиологические связи и контаминация лабораторных образцов
| -
|
Рис. 3.1. Алгоритм лабораторных исследований на ТБ
Использование быстрых методов для ранней диагностики МЛУ-ТБ крайне необходимо в первую очередь для всех начинающих повторный курс лечения.
