E. Luck , Compartmentalized dynamics of cytomegalovirus replication intreated congenital infection

 

Цитомегаловирус (ЦМВ) является наиболее распространенной врожденной инфекции в развитых странах. Asignificant число инфицированных младенцев развивать долгосрочные развития нервной системы и слуха impairmentirrespective о том, болезнь выявляется при рождении.

Исследования вирусной нагрузки и репликации динамики haveinformed лечение ЦМВ у взрослого населения, но не существует аналогичных данных в neonates.

Objectives: Для изучения вируса CMV кинетики в различных биологических жидкостях организма детей, получавших по поводу врожденной конструкции infection.

Study: CMV нагрузки вируса последовательно анализировали в крови, мочи и слюны у 17 детей лечение врожденных for symptomatic CMV infection.

Results: Вирус был обнаружен в моче и слюне всех детей на исходном уровне, но только в 15/17 в blood.At конец 6 недель противовирусного лечения ЦМВ остается обнаруживается в образцах крови 9/14, 9/12 и 4/7 urine samples слюнных мазков. Медиана полураспада (T1 / 2) снижения вируса в крови было 2,4 дня (МКР 1.9-3.3) и основной репродуктивный номер (Ro) составило 2,3. Хотя T1 / 2 values ​​были сходными с мочой и слюной, чтобы those observed в крови, динамика вируса различались как во время и после того, как treatment. Conclusions: T1 / 2И Ro в крови в этой группе новорожденных детей были аналогичны значениям, полученных из studie sof иммунодефицитом взрослых. Упорное виремии наблюдается у обработанных новорожденных не может адекватно объяснить there forebe динамикой вируса на ранних стадиях лечения. Различия в динамике выставлены in blood и мочи предполагает, что изучение изменений в различных отсеках тела может помочь в further understanding долгосрочных проявлений заболевания.

 

Основным ограничением является отсутствие адекватных numbersof детей без болезни при рождении, которые впоследствии развиваются ЦМВ-связанной заболеваемости.

 

моделирование. Недавнее исследование, проведенное в новорожденных при лечении врожденной ЦМВ (CCMV) наблюдается корреляция между более высокой нагрузки ЦМВ DNAin крови в течение первых 6 недель лечения и последующего SNHL [5].

Учитывая известное длительное выделение с мочой ЦМВ в thoseinfected в раннем периоде жизни вполне возможно, что вирус кинетика отличается betweenbody жидкости в этой группе, но не существует никаких данных currently. Further определения естественной истории вируса CMV кинетики в DIF-ных жидкостях организма у пациентов с CCMV может помочь нашему understandingof патогенеза этого вируса, и оказывать помощь в разработке biomark-ers.2. Исследование

 

 ObjectivesThis целью определить кинетику CMV inblood репликации, моча и слюна в группе младенцев, получающих лечение

 

Исследование designThe

 Вирусная нагрузка и иммунология при врожденном ЦМВ (VICC) studyrecruited младенцев в этически утвержденного протокола в Великобритании. 19babies с CCMV были набраны из 7 исследовательских центров между 2011 заявок на 2008 год после постановки диагноза CCMV, принимавших участие в исследовании providedblood, мочи и слюны образцов при заданных временных точках во время andafter лечения и до двух лет. ЦМВ количественное анально-лиз проводили в отделе вирусологии в Королевском FreeHospital. Только 11 детей, получавших лечение, с результатами вирусной нагрузкой suffi-циент для содержательного анализа, представлены здесь (см дополнительные данные) .AN этически утвержден реестр лечение CCMV был alsoactive в Великобритании за тот же период времени. Младенцы в этом registrywith несколько записей для CMV вирусной нагрузки были включены для анализа (N = 3) (см дополнительные данные). Родитель (ей) или законного опекуна (ов) участников в обоих вышеуказанных исследований представили письменные образцы informedconsent.Multiple были также получены в нашей лаборатории из 3treated младенцев как часть рутинной медицинской помощи.

 

Definitions CCMV был подтвержден, если образец положительный результат на CMV within21 дней жизни. Симптомом инфекция определялась согласно tocriteria, используемых в ранее опубликованных рандомизированное контролируемое исследование (RCT) лечения [4]. D. Kimberlin, C. Lin, P. Sanchez, et al., Effect of ganciclovir therapy on hearingin symptomatic congenital cytomegalovirus disease involving the centralnervous system: a randomized, controlled trial, J. Pediatr. 143 (2003) 16–25.

 

DNATotal нуклеиновой кислоты, экстрагировали с использованием системы commercialNuclisense Easymag (bioMérieux, Бейсингстоук UK) Аккорд-ING с инструкциями изготовителя. ЦМВ вирусная нагрузка была thendetermined с использованием в доме в режиме реального времени количественный ПЦР asdescribed ранее (нижний предел обнаружения является 200 копий / мл (168 МЕ / мл)) [14] .AN оценка объема слюны, состоявшейся мазков obtainedby весом тампоны до и после насыщения в слюне. В meanof 3 пробы дали оценкам объем 27 мкл слюны whichallowed для расчетов ЦМВ вирусной нагрузки / мл слюны.

 

измерения вирусной нагрузки <200 копий / мл были введены в качестве halfthe предела обнаружения, чтобы дать возможность преобразования журнала и строительство ofvirus кривых падения. тест Манна-Уитни U использовали для comparemedian значений, с Критерий Уилкоксона, используемый для comparisonof парных образцов.

 

Для расчета основного репродуктивный номер (RO) aftercessation терапии была использована следующая формула:

Ro

знак равно

1

+

г /? ERT

где г темпы роста вируса после прекращения терапии,? Является ли thedeath скорость в инфицированной клетке CMV (из Эмери и др., 1999) ANDT задержка по времени между заражением и производство новых вирионов (устанавливается в 2-х дней)

 

Срединные и межквартильный размах (МКР) ofCMV нагрузки на исходном уровне в крови, моче и слюне были 3,8 (3.3-4.2), 7,7 (7.0-8.4) и 7.2 (6.8-8.3) log10genomes / мл соответствуют-ки средства 3.8 (SD ± 0,8), 7,7 (± 0,9) и 7,3 (± 1,5) (рис. 1 и 2) .More чем одного образца крови, и более чем один мочи СЭМ-PLE были взяты в пяти новорожденных детей до начала лечения. В 2/5 thesebabies вирусной нагрузки в крови и моче снизились более чем на 1,0

 

loadAt конце курса лечения 42 день CMV remaineddetectable в 9/14 образцах крови (65%), 9/12 проб мочи (75%) и 4/7 слюнных тампоны (57%). Медиана нагрузки ЦМВ в крови, моче andsaliva у детей с вирусом до сих пор обнаружено 2,8 log10genomes / мл (МКР 2.5-3.5), 2,9 log10genomes / мл (МКР 2.7-3.9) и 4,0 log10genomes / мл (МКР 3.2-5.5) соответственно. CMV нагрузки были зна-чительно ниже, в конце лечения в крови и моче, но notsaliva, по сравнению с исходными значениями (р = <0,01, 0,02 и 0,13 соответ-ственно)

 

Кинетика CMV во время therapyBaseline ЦМВ нагрузки были приблизительно 4,0 log10genomes / mlhigher в начале лечения в моче и слюне по сравнению withblood но эта разница сужен в течение 42 дней после обработки (Рис. 1). В соответствии с этим наблюдением, вирусный снижение betweenthe начала и конца 42 дней лечения была выше в моче по сравнению с andsaliva крови с абсолютным снижением -1.2 log10genomes / мл (МКР -1.8 до -0.9) наблюдали в 14 парных крови SaM-пов по сравнению с -4.4 log10genomes / мл (МКР -5,5 до -3.8) inurine (N = 10) и -4.8 log10genomes / мл (МКР -5,2 до -3.9) insaliva (N = 7) (таблица 1). В 2/14 не спаренных образцах крови не declinewas наблюдаемого во время лечения, тогда как ДНК ЦМВ снизился в allurine и слюнной снижение samples.CMV ДНК в крови и моче была более быстрой duringthe первых 7 дней лечения по сравнению с полным 42 дней oftreatment (таблица 1) , Слюнные образцы из раннего pointswere выборки слишком мало, чтобы позволить analysis.Using эти данные, период полураспада снижения (T1 / 2) был calculatedusing сегментарный регрессии наиболее быстрой фазы снижения вирусной (примеры, показанные на рис. 3). Средний T1 / 2in крови 14 neonateswas 2,4 дня (МКР 1.9-3.3 дней), в моче было 2,0 дней (IQR1.3-2.6) (N = 14) и в слюне 1,5 дня (МКР 1,4-2,4) (N = 4).

 

Долгосрочный вирусный controlCMV ДНК обнаруживались в каких-либо образцах крови (N = 6) atmonth 12, но в большинстве мочи (7/7) и слюны (6/8) образцов. By24 месяцев ДНК CMV оставалась неопределяемой во всех образцах крови (n = 3), но было обнаружено в моче 2/3 и 1/3 образцов слюны. Inurine средней нагрузки ЦМВ в возрасте 12 месяцев составила 4,7 log10genomes / мл (МКР 4.5-5.8) (N = 7), который был значительно ниже, чем baselineload (7,7 log10genomes / мл (р <0,01)). Точно так же, слюнные вирусные loadwas значительно ниже на 12-й месяц, чем на исходном уровне [4,5 log10 (IQR2.5-5.1) против 7,56 log10 (МКР 6.76-8.44) геномов / мл соответственно (р <-0,01)].

 

DiscussionThe Результаты этого исследования обеспечивают понимание кинетики ofCMV в различных биологических отсеках у новорожденных во время andafter противовирусной терапии. Несмотря на различия в исходных CMVload, период полураспада во время начальной фазы лечения были сравнитель-BLE через отсеки (P = 0,1-0,4 для межгрупповых сравнений) и похожи на 2-х дней наблюдается в редко отобранных adultimmunocompromised хозяев [16]. В отличие от данных исследований на взрослых трансплантации patientswith при аналогичных исходных вирусных нагрузок в течение половины новорожденных детей еще hadDNAemia обнаруживаемых в конце курса лечения 6 недель [14]. Это наблюдение и что из первоначально быстрое снижение вирусной Fol-мычали на низшей точке в соответствии с аналогичными наблюдениями в treatedneonates [17] .The причины такого неполного подавления у новорожденных areunclear. В настройках репликации ЦМВ в ВИЧ-инфекции эффек-тивность внутривенной GCV (5 мг / кг / ставка) оценивается в 91,5% [18] butwhere уровни в плазме ниже, эффективность будет снижена. Ther-терапевтическому лекарственный мониторинг уровней GCV в новорожденных детей, обучающихся в

 

это исследование показывает, что плазменные уровни GCV были низкими, но consis-палатка с другими данными у детей [15]. Более высокие уровни GCV могут beneeded в этой популяции, чтобы полностью подавлять репликацию. Анализ theCMV UL97 локуса не показали никаких признаков мутаций известных сопротивления conferGCV (неопубликованные данные) .Альтернативный способ, постоянные виремии могут представлять continuedvirus выведению из 'прибежища сайтов' недоступны для antiviralagents. Учитывая повышенную аудиологического и неврологическое патологическое-ность, наблюдаемую в CCMV по сравнению с immunocompromisedadults, внутреннее ухо или ЦНС бы возможные источники таких virusreservoirs и проникновения наркотиков на этих участках соответственно неоптимальной [19]. Тестирование такой гипотезы является сложной задачей, так как ни один вирус dataevaluating настойчивость в спинномозговой жидкости не существует, и не это, вероятно, beethically acceptable.Although отскока вируса был распространен во всех жидкостях организма Inthe первую неделю после лечения, максимальное восстановление произошло ушной Lier в крови по сравнению с мочой и слюной; отскока inDNA-emia согласуется с другими недавними сообщениями в ходе neonataltreatment [5]. Только вирус в моче восстановился до уровня significantlylower, чем базовой линии в нашем исследовании. Это важная observationif понятие «порога» болезни ЦМВ предложенной у взрослых AppliesTo CCMV [20] вирус .Если не находится в устойчивом состоянии в начале терапии динамические модели Тогда действуют принятой не могут быть в полной мере применимы. Как-нибудь, врожденная инфекция часто встречается несколько месяцев до рождения и thevalues ​​полученные здесь согласуются с результатами, полученными в adults.The роста ЦМВ во время фазы отскока позволило нам Эсти-MATE Ro для ЦМВ во время этого всплеска в репликации. В Rovalues ​​относительно невелики по 2,3 и 2,8 для крови и urinerespectively, что согласуется с наблюдаемыми в D + R- твердых organtransplant реципиентов [21] .Overall данные, представленные здесь, предполагают, что первоначальная вирусная терапия responseto аналогична той, которая наблюдается у взрослых immunocom- обещанные хостов. Однако после этого первоначального ответа, модели CMVreplication отличаются у новорожденных по сравнению с ослабленным иммунитетом взрослых. В соответствии с этим измененным вирусом кинетики isthe постоянного аудиологического повреждения и неврологические повреждения uniqueto этой возрастной группе. Причины этого, остаются невыясненными Butare вероятно сложное сочетание хозяевах и вирусных факторов, includingimmunological незрелости и возможный увеличенный susceptibilityof быстро делящихся клеток в раннем периоде жизни к вирусным damage.It возможно, что даже более длительные периоды лечения или antiviraldrugs с более проникновение ЦНС будет необходимо, если продол-UED обнаружение больших количеств вируса в моче имеет relevancefor последующих неврологических осложнений. Теперь задача должна Бето оценить ли достичь текущие противовирусные средства тела СОМ-Partments соответствующие болезни на достаточном уровне, чтобы предотвратить viralreplication и / или повреждения и является ли мониторинг вирусной нагрузки inmultiple отсеков тела может помочь в дальнейшем определении viralparameters важности для будущего прогноза.

 

7. Edyta Paradowska Distribution of cytomegalovirus gN variants and associated clinical sequelae in infants. Распределение вариантов цитомегаловируса Gn и ассоциированных клинических  осложнения у детей раннего возраста

 

© 2013 Elsevier B.V. All rights reserved.

Предпосылки: цитомегаловируса человека (ЦМВ) является наиболее распространенной причиной врожденной инфекции.Влияние различных штаммов вируса и вирусной нагрузки на исход инфекции были в стадии обсуждения.

Цели: Определить распределение вариантов Gn в HCMV штаммы, выделенные у детей с

врожденные или послеродовые инфекции и установить связь между генотипом вируса, вирусный нагрузки и последствия.

Дизайн исследования: В исследование включены врожденным ЦМВ-инфицированных новорожденных и детей послеродовые или недоказанной врожденная инфекция HCMV. Генотипирование проводили ПДРФ анализа ПЦР-амплифицированные фрагменты, а вирусная нагрузка была измерена с помощью количественного ПЦР реального времени.

Результаты: Наши результаты показали, что HCMV генотипы gN3b, gN4b и gN4c были широко распространены в обследованных больных. Там не было никаких различий в распределении Gn генотипов в врожденно и послеродовом инфицированных детей. Несколько штаммов HCMV были обнаружены в обеих группах детей. значимая связь между генотипом HCMV gN4 и частотности неврологических расстройств наблюдалось (р = 0,045). Наши результаты свидетельствуют о том, что обнаружение ГН2 или генотипа gN4 может быть свидетельствует о серьезных проявлений у детей. В противоположность этому, gN3b и генотипы ГН1 представляют

менее патогенные штаммы HCMV. Нагрузка ЦМВ в моче была значительно выше у детей с врожденными инфекции по сравнению с детьми с постнатальной инфекцией. Никакой корреляции не было найдено между вирусной нагрузка и генотип.

Заключение: Наши результаты свидетельствуют о том, что генотип гН может быть вирусологической маркером симптоматической HCMV инфекции у новорожденных.

 

Человеческого цитомегаловируса (ЦМВ) является ведущей причиной врожденных

инфекция поражает 0.3-1.4% всех живорожденных [1,2]. Примерно

10-15% новорожденных являются симптоматическими при рождении, но 5-10%

бессимптомные люди могут страдать умеренную заболеваемость. Этот вирус

может привести к серьезным осложнениям, включая центральную нервную систему (ЦНС)

повреждение, нейросенсорная потеря слуха (SNHL), умственная отсталость, и

широкое разнообразие врожденных пороков развития.

 

Средняя концентрация ДНК ЦМВ в образцах мочи был выше среди врожденно инфицированных новорожденных по сравнению с постнатально инфицированных детей (9,6 ×106 геномные эквиваленты [GE] / мл, диапазон 0-8.7 ×108 GE / мл по сравнению с 2,7×104 GE / мл, диапазон

0-2.2×108 GE / мл, соответственно, р = 0,002). Вирусная нагрузка в Образцы крови и мочи, не коррелировали с присутствием Gn варианты.

 

Наше исследование оценило ли связаны Gn полиморфизмы с клиническим исходом в ЦМВ-инфицированных детей. Мы наблюдали симптоматической инфекции у пациентов, инфицированных все ранее обнаруженные HCMV Gn генотипы. Предыдущие исследования показали, что, по сравнению с HCMV ГН1 и gN3a, gN4 представляет собой наиболее вирулентных генотипов и ассоциируется с тяжелыми проявлениями [4,18,19]. Наши результаты подтвердили, что GN1 и GN3 варианты являются менее вирулентными. Подобно результатам, о которых сообщили Пиньятелли и соавт. [4], мы определили вариант gN4 как наиболее вирулентных HCMV генотипа связанная с неврологическими нарушениями у новорожденных. Наш исследование дает первое доказательство того, что не только gN4 но

 

также ГН2 генотип HCMV может быть важным вирусологической

маркеры симптоматической инфекции у детей. Полученные результаты

позволяют предположить, что ГН2, как представляется, вторым наиболее вирулентных генотипов.

Хотя этот генотип был относительно редко, все случаи

в котором был найден этот генотип представил HCMV связанных с клиническим

проявления. И наоборот, генотипы gN3b и GN1 были

связано с уменьшением риска некоторых симптомов, например, ЗВУР и

анемия.

Обнаружение смешанных инфекций у новорожденных HCMV подтвердили

что эмбрионы могут быть инфицированы более чем одним вирусом

штамм, как было описано ранее [4,18,20]. Подобно результатам

сообщает Найманом [21], мы обнаружили более высокую нагрузку HCMV в

моча новорожденных с врожденной инфекцией по сравнению с постнатально

инфицированных детей. Следует отметить, что наши результаты

не репрезентативными младенческой и что обнаруженный

гН Распределение генотипов действительна только для пациентов с симптомами.

К тому же, так как популяция выборка была мала, то значение

эти результаты должны быть обработаны с осторожностью. В дальнейшем

исследования с использованием больших групп пациентов необходимы, чтобы подтвердить наши

Результаты.

Таким образом, этот доклад свидетельствует о том, что существует связь

между генотипом gN4 и неврологической дисфункции после рождения

и что обнаружение ГН2 или генотипа gN4 может помочь

определить проявления этого заболевания у детей. Это исследование показывает,

что генотип гН может быть одним из вирусологических маркеровврожденного заболевания HCMV.

 

 

8. Gabriella Forner, High Cytomegalovirus (CMV) DNAemia

⇐ Предыдущая12345678910Следующая ⇒

Поделиться: