Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Если по результатам 5 опытов движение восстанавливается, то данное вещество является реактиватором (восстановителем «аналептиком») движения.



Выбор веществ, используемых для восстановления активности, в основном проводится эмпирически, а также с учётом закономерностей регуляции функциональной активности парамеций. Так (Кудрин А.Н. с соавт., 1971) показал существование у Paramecium caudatum двух типов адренорецепторов: a-адренорецепторов, тормозящих сокращение ресничек (замедляющих движение парамеций) и b-адренорецепторов, возбуждающих сокращение ресничек (ускоряющих движение парамеций). Эти данные аргументируют целесообразность использования блокаторов a‑адренорецепторов и стимуляторов b-адренорецепторов в анализе механизма остановки движения парамеций.

Например:

Остановка движения парамеций под влиянием коффеина-бензоата натрия (Ок – 1,0×10-3 г/мл) устраняется Пк изадрина и тропафана, поэтому можно предположить нарушение адренергического механизма движения парамеций под влиянием коффеина-бензоата натрия.

Дикаин вызывает остановку, которая устраняется Пк раствора натрия хлористого, то есть возможный механизм остановки – нарушение баланса ионов вне и внутри клеток.

Пероксид водорода вызывает остановку движения парамеций в результате свободнорадикального повреждения клеток, поэтому вещества тормозящие ПОЛ (перекисное окисление липидов), в частности мексидол защищает клетки парамеций от повреждающего действия перекисных радикалов.

 

4.3. Методика изучения специфической биологической активности (протективного действия) исследуемых веществ на патологических моделях в остром опыте

 

На моделях патологического повреждения биомембран Paramecium caudatum, созданных с помощью токсикантов выявляют и определяют защитную способность исследуемых веществ: повышать или не изменять толерантность парамеций к действию соответствующего токсиканта.

 

4.3.1. Создание патологической модели повреждения биомембраны клетки Paramecium caudatum, установление дозозависимого эффекта токсиканта

При воздействии на культуру Paramecium caudatum индикаторных повреждающих агентов – модельных токсикантов (см. п.З), , создаются определенные патологические модели повреждения мембраны клетки.

Например:

Изучение антиоксидантной активности у исследуемых веществ предлагается проводить на патологической модели Paramecium caudatum с повреждённой липидной частью мембраны клетки, созданной модельным токсикантом – пероксидом водорода, который in vivo расщепляется до перекисных радикалов, инициирующих процесс перекисного окисления липидов мембран.

Мембранотропную активность изучают на патологической модели с повреждёнными, преимущественно, белковыми структурами биомембраны, созданной модельными токсикантами – этиловым спиртом или формальдегидом, приводящими к денатурации ферментных и мембранных белков.

В качестве общеклеточного повреждающего агента может использоваться смесь пероксида водорода и формальдегида в соотношении (1:1).

По общей методике (п.4.1) определяются пороговые, остановочные и лизирующие концентрации токсикантов для клеток парамеций.

В таблице 2 представлены данные по созданию патологических моделей повреждения биомембраны клетки парамеций при воздействии на них модельных токсикантов.

Таблица 2

Дозозависимые эффекты модельных токсикантов для клеток

Paramecium caudatum

Объект исследования

юдования

Спирто-водные растворы

(воздействие на белковую часть клетки)

Растворы водорода пероксида (воздействие на липидную часть клетки)

С г/мл Морфо-функциональные изменения парамеций С г/мл Морфо-функциональные изменения парамеций
1 2 3 4
1×10-2 (1 %) 1.1 Парамеции сначала ускоряют и через 2-3 минуты замедляют движение, затем ритм движения восстанавливается. Клетки правильной эллипсовидной формы 1×10-7 2.1 Движение сначала ускоряется, потом восстанавливается. Форма клеток без изменения
3×10-2 (2%) 1.2 Парамеции сначала ускоряют и замедляют движение. Клетки правильной эллипсовидной формы (пороговая) 1×10-6 (0,0001%) 2.2 Движение сначала ускоряется, потом замедляется. Форма без изменения (пороговая)
3×10-2 1.3 Замедление и круговые движения. Остановка движения в течение 15 минут. Клетки эллипсовидной формы, расположены скоплениями 1×10-5 (0,001%) 2.3 Круговые хаотичные движения. Останавливаются течение 1-2 минут. Форма клеток сначала вытянутая, затем круглая (остановочная)
4×10-2 1.4 Движение хаотичное. Останавливаются в течение 10 минут. Клетки меняют форму (круглеют) 1×10-4 (0,01%) 2.4 Остановка мгновенная, лизис на 80%. Форм клеток круглая (лизирующая)
5×10-2 1.5 Останавливаются в течение 5 минут. Форма клеток круглая 1×10-3 (0,1%) 2.5 Лизис
6×10-2 (6%) 1.6 Останавливаются в течение 1-2 минут. Форма клеток круглая (остановочная)    
7×10-2 1.7 Мгновенная остановка, форма круглая, лизис на 30%    
8×10-2 1.8 Мгновенная остановка, лизис на 60%    
9×10-2 1 .9. Мгновенная остановка, лизис на 80%    
10×10-2 1.10 Лизис (лизирующая)    

 

Характер действия этанола на клетки парамеций соответствует стадиям его наркотического действия на высших животных.

При разработке интегральной модели повреждения биомембран используются комбинации повреждающих агентов в пороговых, остановочных и лизирующих концентрациях. При этом наблюдается усиление биологической активности и токсичности.


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2019-04-20; Просмотров: 235; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.015 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь