ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ ПОСЕВА ИСПРАЖНЕНИЙ И УСЛОВИЯ ИХ ИНКУБИРОВАНИЯ
| Питательная среда
| Выделяемые микроорганизмы
| Условия инкубации
|
| Эндо
| Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia spp. и другиеEnterobacteriaceae
| Сутки при 37 оС и сутки при комнатной температуре (для обнаружения Yersinia spp.)
|
| Плоскирева
| Salmonella spp., Shigella spp., V.parahaemolyticus
| 2 суток при 37 оС с просмотром через 24 часа
|
| Селенитовый бульон или Мюллера-Кауфмана или магниевая
| Salmonella spp.
| 18-20 часов при 37 оС
|
| Фосфатно--буферный раствор (ФБР) или забуференная пептонная вода или среда Серова или буферно-казеиново-дрожжевая среда
| Y.pseudotuberculosis, Y.enterocolitica
| До 15 суток и более в холодильнике при 6-10 оС
|
| Элективные питательные среды с антибиотиками (Skirrow или Karmali или Blaser или др.)
| Campylobacter spp.
| 2 суток при 42, 5 оС в атмосфере: 5% O2; 10% CO2; 85% N
|
| Щелочная пептонная вода и щелочной МПА или СЭДХ или TCBS
| V.cholerae
| 12-18 при 37 оС
|
| Щелочной агар и среда Плоскирева и СЭДХ или TCBS
| V.parahaemolyticus
| 12-18 при 37 оС
|
ПОСЕВ ФЕКАЛИЙ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ НА ДИСБАКТЕРИОЗ [13]
| Среды
| Разведения
| Микроорганизмы
|
| Мюллера, селенитовая, магниевая
| Без разведения
| Патогенные энтеробактерии
|
| Плоскирева, Левина с синтомицином
| 10-1
|
| Печеночная среда Блаурока
| 10-3-10-10
| Бифидобактерии
|
| Агар Хенеля (анаэробные условия)
| 10-3-10-7
| Бактероиды
|
| МРС-4 (анаэробные условия)
| 10-3-10-7
| Лактобациллы и стрептококки
|
| Среда Калины или ДИФ-3
| 10-3-10-5 - взрослые
10-5-10-7 - дети
| Энтерококки
|
| Желточно-солевой агар
| 10-3-10-5
| Стафилококки
|
| Среда Сабуро
| 10-3-10-5
| Грибы рода Кандида
|
| Среда Левина
| 10-3-10-5
| Энтеробактерии
|
| Среда Плоскирева
| 10-3
|
| Среда Эндо
| 10-5
|
| Малахитовый агар
| 10-1, 10-3, 10-5, 10-7
| Синегнойная палочка
|
| Кровяной агар
| 10-5, 10-7
| Гемолизирующие культуры
|
| Среда Вильсона
| 10-3, 10-5, 10-7
| Клостридии
|
Для постановки диагноза " острая кишечная инфекция, обусловленная условно-патогенными микроорганизмами" необходимо учитывать следующие критерии:
отсутствие специфических признаков заболевания, обусловленного патогенными микроорганизмами;
обнаружение условно-патогенных микроорганизмов в испражнениях в количестве более 105 кл./г;
повторное обнаружение того же микроорганизма в возрастающей концентрации;
исчезновение условно-патогенного микроорганизма из фекалий или снижение его численности в результате проводимой терапии;
нарастание титра антител к данному условно-патогенному микроорганизму более чем в 4 раза при одновременном присутствии его в фекалиях в количестве более 105 кл./г
Диагностика дисбактериоза кишечника осуществляется на основании оценки качественных и количественных сдвигов в составе микрофлоры толстого кишечника (табл. 19). Численность отдельных групп микроорганизмов в составе кишечной микрофлоры подвержена значительным колебаниям в зависимости от возраста, пола, характера питания, физического состояния организма и многих других факторов. Следует отметить, что значение имеет не только состояние микробиоциноза кишечника в данный конкретный момент времени, но и динамика происходящих в нем изменений. Поэтому для более точной оценки состояния кишечной микрофлоры исследования необходимо повторить несколько раз. На достоверность полученного результата сильно влияет соблюдение сроков транспортировки материала. В ряде случаев, когда соблюдение этих сроков нереально, следует либо отказаться от определения численности неспорообразующих бактерий, либо с осторожностью подходить к информации о снижении их количества.
На дисбактериоз толстого кишечника указывают:
снижение количество бифидобактерий до уровня менее 10-8 кл./г;
увеличение доли атипичных эшерихий до более чем 10%;
появление гемолитической микрофлоры;
увеличение числа условно-патогенных грамотрицательных палочек или S.aureus (более 104 кл./г);
увеличение числа грибов рода Кандида (более 103 в кл./г);
увеличение до более 2·108 кл./г или снижение до 106 кл./г количества E.coli
Согласно схемы, предложенной Н.М.Грачевым и соавт. [13], различают 4 степени выраженности дисбактериоза:
| 1 степень
| Латентная, компенсированная форма. Характеризуется незначительными изменениями в аэробной части микробиоценоза (увеличение или уменьшение количества кишечных палочек). Бифидо- и лактофлора неизменны. Кишечные дисфункции, как правило, не регистрируются.
|
| 2 степень
| Субкомпенсированная форма. На фоне незначительного снижения количественного содержания бифидобактерий выявляются количественные и качественные изменения кишечной палочки или других условно-патогенных микроорганизмов. Пограничное состояние. Обследуемый может быть отнесен к группе риска. Назначение бактерийных препаратов целесообразно даже при отсутствии клинических проявлений. Если отмечается на фоне терапии, то свидетельствует о восстановлении микрофлоры.
|
| 3 степень
| Значительное снижение уровня бифидофлоры (105-107 кл./г) в сочетании со снижением лактофлоры и низким содержанием кишечных палочек. Как правило, сопровождаются кишечными дисфункциями. Необходимо незамедлительное назначение бифидумбактерина, лактобактерина или бификола.
|
| 4 степень
| Отсутствие бифидофлоры, значительное уменьшение лактофлоры и изменение количества кишечной палочки (снижение или увеличение), возрастание численности как облигатных, так и факультативных и не характерных для здорового человека видов условно-патогенных бактерий. Выраженные клинические проявления, вплоть до перфоративного язвенно-некротического энтероколита. Обязательным является назначение бифидумбактерина.
|
А.В.Знаменский и соавт. [19] предложили более простую классификацию:
| 1 степень
| нарастание числа УПМ при высоком уровне бифидобактерий.
|
| 2 степень
| бифидобактерии на нижней границе нормы (108 кл./г, нарастание числа УПМ, дисфункции кишечника.
|
| 3 степень
| уменьшение количества (менее 107 кл./г) бифидобактерий сочетается с изменениями в аэробной микрофлоре.
|
| Декомпенсированный дисбактериоз
|
|
|
|
|
Таблица 19
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА У ЗДОРОВЫХ ВЗРОСЛЫХ ЛЮДЕЙ И ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ [13]
| Группа микроорганизмов
| Количество микроорганизмов в 1 г фекалий
|
| у взрослых
| у детей
|
| Бифидобактерии
| 108-1010
| 109-1010
|
| Бактероиды
| 108 -1010
| < 108 **
|
| Молочнокислые палочки
| 106-107
| 106-108
|
| Молочнокислый стрептококк
| 106-107
| 107-108
|
| Энтерококки.
| 105-106
| 106-107
|
| Эшерихии:
| |
|
| с нормальной ферментативной активностью
| 107-108
| 107-108
|
| со сниженной ферментативной активностью
| 106-107
| 106-107
|
| лактозонегативные
| 106-107*
| 106-107*
|
| Микробы рода Proteus
| < 104*
| < 103**
|
| Другие условно патогенные энтеробактерии
| < 104*
| < 104*
|
| Стафилококки (сапрофитический, эпидермальный)
| < 104*
| 104-106
|
| Дрожжеподобные грибы
| < 104*
| < 104*
|
| Спороносные анаэробные палочки (клостридии)
| < 105*
| -
|
| Примечания:
* могут обнаруживаться у части практически здоровых людей;
** обнаруживаются у незначитеельной части детей старше 3-х месяцев жизни.
|
ДИСБИОТИЧЕСКИЕ СОСТОЯНИЯ КИШЕЧНИКА И ВЛАГАЛИЩА (ИНБИОФЛОР, ФЕМОФЛОР, МИКРОБИОЦЕНОЗ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА)
| №
| Название
|
|
| Общая оценка естественной микрофлоры организма
|
|
| Исследование на биоценоз влагалища и определение чувствительности к антимикробным и антигрибковым препаратам (с микроскопией нативного препарата, окрашенного по Граму)
| |
|
| Дисбактериоз кишечника
| |
| 456-Ф
| Дисбактериоз кишечника с определением чувствительности к бактериофагам
| |
| Исследование микробиоценоза урогенитального тракта (ИНБИОФЛОР)
|
|
| Бактериальный вагиноз
| |
|
| ИНБИОФЛОР- комплексное исследование микрофлоры урогенитального тракта
| |
| Скрининг микрофлоры (13+КВМ)
|
|
| Скрининг микрофлоры урогенитального тракта (13+КВМ*), соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта
| |
| Фемофлор (9+КВМ)
|
|
| ФЕМОФЛОР-9+КВМ*, соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта
| |
| Фемофлор (17+КВМ)
|
|
| ФЕМОФЛОР-17+КВМ*, соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта
| |
| Лактобактерии
|
| 345УРО
| Лактобактерии, определение ДНК (Lactobаcillus spp., DNA) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта
| |
Диско-диффузионный метод оценки антибиотикочувствительности
Принцип метода
Принцип диско-диффузионного метода (по Keurby-Bauer) основан на феномене ингибиции антибиотиком поверхностного, видимого роста микроорганизмов на плотной (агаровой) питательной среде. Градиент концентрации антибиотика в питательной среде создается в результате его диффузии из носителя (картонного диска). Диск с антибиотиком помещается на поверхность питательной среды немедленно после посева (инокуляции) культуры исследуемого микроорганизма. При этом практически одновременно начинаются два процесса: диффузия антибиотика из диска и рост микроорганизмов на поверхности среды. С практической точки зрения важно то, что от диска к периферии происходит движение “фронта” концентрации антибиотика, равной его МПК в отношении исследуемого микроорганизма.
Особенностью роста микроорганизмов на питательных средах является наличие лаг-фазы – периода времени, в течение которого происходит адаптация культуры к новой среде. По окончании лаг-фазы рост культуры исследуемого микроорганизма начинается в тех областях, где концентрация антибиотика еще не превысила минимальную подавляющую.
Учитывая закономерности зонообразования очевидно, что для получения с помощью диско-диффузионного метода воспроизводимых результатов необходима стандартизация всех этапов исследования.
Популярное:
