Необходимые реактивы, посуда и оборудование.

1. Роданид калия или аммония, раствор с концентрацией 5% (масс.).

2. Стандартный раствор железоаммонийных квасцов FeNH₄(SO₄) *12H₂O: в мерной колбе вместимостью 1000 см³ растворяют (0, 8636 ±0, 0002)г квасцов в дистиллированной воде, добавляют 4 см³ серной кислоты, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают; 1 см³ полученного раствора содержит 0, 1 мг Fe³⁺. В мерную колбу вместимостью 250 см³ из бюретки добавляют 50 см³приготовленного раствора, добавляют дистиллированную воду до метки, перемешивают, в 1 см³ полученного раствора содержится 0, 02 мг Fe³⁺.

3. Пероксид водорода, раствор с концентрацией 30% (масс.).

4. Азотная кислота, плотность 1, 20*10³ кг/м³.

5. Серная кислота, плотность 1, 54*10³ кг/м³.

6. Мерные колбы вместимостью 100 см³ – 6 шт., 250 и 1000 см³ – по 1 шт.

7. Бюретка вместимостью 50 см³.

8. Градуированные пипетки вместимостью 2, 10 и 20 см³ – по 1 шт.

9. Капилляр.

10. Аналитические весы.

11. Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, кюветы с толщиной светопоглощающего слоя 1 см.

12. Анализируемого белое вино.

Ход определении.

Для построения градуировочного графика в 4 мерные колбы последовательно вводят градуированной пипеткой 5, 10, 15 и 20 см³ стандартного раствора железоаммонийных квасцов, в каждую колбу добавляют по 2, 0 см³ азотной кислоты, 6 капель раствора пероксида водорода, из бюретки вводят 40, 0 см³ раствора роданида калия или аммония, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Получают серию окрашенных в красный цвет растворов, содержащих в 100 см³ соответственно 0, 1; 0, 2; 0, 3; 0, 4 мг Fe³⁺/

Для учета примеси Fe³⁺ в применяемых реактивах в мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 2, 0 см³ азотной кислоты, 6 капель раствора пероксида водорода, 40, 0 см³ раствора роданида калия или аммония и дистиллированную воду до метки (контрольный раствор).

Через 30 мин измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 490 нм. По полученным данным строят градуировочный график в координатах: содержание Fe³⁺, мг/100см³ – оптическая плотность раствора.

В мерную колбу вместимость 100 см³ помещают 20, 0 см³ анализируемого белого вина, 2, 0 см³ азотной кислоты, 6 капель раствора пероксида водорода, 40, 0 см³ раствора роданида калия или аммония, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Через 30 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора, по градуировочному графику находят содержание Fe³⁺, мг/20 см³ вина.

Содержание Fe³⁺ в анализируемом вине (Q, мг/дм³) рассчитывают по формуле:

(2.16)

где, q – найденное по градуировочному графику содержание Fe³⁺, мг в 20 см³ анализируемого вина.

Задания для самостоятельной работы.

1. Записать уравнения реакции Fe³⁺ c роданидом калия в молекулярном и ионном виде.

2. На чем основан выбор светофильтра при фотометрическом определении Fe³⁺ в белых винах?

3. Какова методика приготовления стандартного раствора железоаммонийных квасцов?

4. Указать причину непригодности приведенной в данной лабораторной работе методики для определения Fe³⁺ в красных винах.

5. Как проводят пробоподготовку окрашенных растворов при определении Fe³⁺?

Лабораторная работа №8

Измерение спектра поглощения рибофлавина.

Проверка закона Бугера – Ламберта – Бера

Рибофлавин (витамин В₂) широко распространен в природе, содержится в бобовых, дрожжах, молоке, яичном желтке. Животные не способны синтезировать рибофлавин, и получают его с пищей, суточная потребность –2–2, 5 мг в сутки. Рибофлавин обладает характерным спектром поглощения с λ =445, 347, 268 и 223 нм с ε =12, 3 ∙ 10³, 10, 8 ∙ 10³, 31, 4 ∙ 10³ и 30, 1∙ 10³ М^–1 ∙ см^–1, соответственно (0, 05 М NaOH)

Молекулярная масса рибофлавина – 376, 4.

Реактивы: рибофлавин; 0, 05 М раствор NaOH.

Оборудование: спектрофотометр, автоматические пипетки объемом 10–100 мкл и 200–1000 мкл, пробирки, спектрофотометрические кюветы, весы аналитические

Ход работы

1. Приготовим исходный раствор рибофлавина в 0, 05 М NaOH – 4∙ 10^–3М.

2. Приготовим серию растворов рибофлавина различной концентрации

№ пробы	Концентрация рибофлавина, моль/л	Объем растворителя (H₂О), мл	Объем внесенного р–ра рибофлавина, мкл	Д⁴⁴⁵

	2 ∙ 10^–5
	4∙ 10^–5
	6 ∙ 10^–5
	8 ∙ 10^–5
	10^–4

3. Регистрируем спектр поглощения раствора рибофлавина 10^–4М в видимом диапазоне 300 – 500 нм, определяя оптическую плотность через каждые 10 нм. Отображаем график зависимости Д (λ ) – спектр поглощения.

4. Регистрируем оптическую плотность растворов рибофлавина различной концентрации в максимуме поглощения – при длине волны 445 нм. Данные вносят в таблицу.

5. Отображаем график зависимости Д = f(с) – график Бугера – Ламберта – Бера. Определяем коэффициент молярной экстинкции ε при длине волны 445 нм.

Список рекомендуемой литературы:

1. Нагибина И.М., Прокофьев В.К. Спектральные приборы и техника спектроскопии.- Л.: Машиностроение, 1981.

2. Ковганко В. Н. Физико-химические методы анализа. Лабораторный практикум. Минск, 2010.

4. Булатов М.И., Калинкин И.П., Практическое руководство по фотометрическим методам анализа. – Л.: Химия, 1986.

5. Данилина Е.И., Спектрофотометрический анализ, учебное пособие для лабораторных работ, Челябинск, 2011.

6. Федоровский Н.Н. Фотометрические методы анализа: учеб. пособие /

Н.Н. Федоровский, Л.М. Якубович, – М.: ФЛИНТА: Наука, 2012.

7. Алакаева Л.А., Спектрофотометрические методы исследования комплексных соединений, Нальчик, 2003.

РАССМОТРЕНО УТВЕРЖДЕНО

На заседании кафедры ПЭ и Х Учебно-методическим бюро ГИ

Протокол № Протокол №

«__»________2014г. «__»_______2014г.

Зав.кафедрой ПЭиХ Председатель УМБ

_______Кабиева С.К. _________Нокина Ж.Н.

⇐ Предыдущая 1 2 3 4 56