ТЕМА 1. НАРУШЕНИЕ КРОВООБРАЩЕНИЯ И ИЗМЕНЕНИЕ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ В ОЧАГЕ ВОСПАЛЕНИЯ

ЗАНЯТИЕ 7-е

ТЕМА 1. НАРУШЕНИЕ КРОВООБРАЩЕНИЯ И ИЗМЕНЕНИЕ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ В ОЧАГЕ ВОСПАЛЕНИЯ

Цель занятия: сформировать представление о воспалении как типовом патологическом процессе; уяснить роль биологически активных веществ как активных участников воспалительной реакции; изучить последовательность сосудистых изменений при развитии острого воспалительного процесса в эксперименте; наблюдать краевое стояние и эмиграцию лейкоцитов; исследовать ферментативную активность и рН гнойного экссуд ата.

ВОСПАЛЕНИЕ КАК ТИПОВОЙ ПАТОЛОГИЧЕСКИЙ

ПРОЦЕСС

· Воспаление – это возникшая в ходе эволюции реакция организма (живых тканей организма) на местные повреждения; она состоит из сложных поэтапных изменений микроциркуляторного русла, системы крови и соединительной ткани, которые направлены в конечном счете на устранение и изоляцию повреждающего агента и восстановление (или замещение) поврежденных тканей (А.М. Чернух, 1979).

Сущностные признаки воспаления

· Воспаление – типовой патологический процесс, в котором имеет место сочетание как патологических, так и защитно-физиологический реакций.

· Воспаление, как правило, - местный процесс с определенными локальными признаками: tumor, rubor, kalor, dolor et functio lesae.

· Будучи местным процессом, воспаление характеризуется рядом общих проявлений: лихорадкой, болью, анорексией, лейкоцитозом, возрастанием СОЭ, появлением в крови острофазовых реактантов (ОФР).

· Воспаление – универсальный процесс, который встречается в структуре различных заболеваний, в разных органах и тканях.

· Воспаление – стереотипный процесс, отражающий его запрограммированность и характеризующийся типическими проявлениями вне зависимости от этиологии и органной локализации.

· Воспаление – аутохтонный процесс, способный к саморазвитию независимо от продолжения действия его причинного фактора.

· Основу воспаления составляет сосудисто-мезенхимальная реакция, характеризующаяся множественностью и разнообразием участников, включая клетки мезенхимального происхождения (эндотелиоциты, гладкомышечные клетки сосудов, тучные клетки, тромбоциты, эозинофилы, нейтрофилы, моноциты/макрофаги, лимфоциты, фибробласты), а также локальные (эйкозаноиды, цитокины, биогенные амины и др.) и циркулирующие (системы комплемента, гемокоагулации, калликреин-кининовая и др.) медиаторы процесса.

· Воспаление характеризуется каскадным принципом включения и активации ряда систем, участвующих в его развитии (гемокоагулации, комплемента и др.).

· Воспаление – самоограничивающийся процесс при участии механизмов угнетения продукции, секреции и активности флогогенных факторов (ингибиторы комплемента калликреина, свертывания крови, цитокинов, антиоксиданты и др.).

· Врожденныйили приобретенный недостаток механизмов самоограничения воспаления способствует его трансформации из местного в системный, генерализованный процесс: токсико-септический шок.

· Воспаление – фазоворазвивающийся процесс, в котором на основе морфологических изменений выделяют три стадии: альтерации, экссудации и пролиферации. В патофизиологии, моделирующей этот типический патологический процесс и исследующей его в динамике, выделяют четыре стадии (В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков, 2001).

Стадии развития воспаления

I. Альтерация

· первичная

· вторичная

II. ЭКССУДАЦИЯ

· кратковременный спазм (ишемия)

· артериальная гиперемия

· венозная гиперемия

· стаз

· повышение проницаемости и экстравазация жидкости

III. эмиграция форменных элементов

· адгезия лейкоцитов к эндотелию

· приобретение лейкоцитами локомоторного фенотипа

· диапедез лейкоцитов

· направленное движение лейкоцитов в очаг повреждения (хемотаксис)

· скопление лейкоцитов в очаге повреждения. Образование инфильтрата

- раннего (полиморфонуклеары)

- позднего (мононуклеары)

· отграничение очага повреждения и его санация

IV. ПРОЛИФЕрация

· реализация регуляторного действия макрофагов

· пролиферация и активация биосинтетической активности фибробластов

· стимуляция фиброплазии и ангиогенеза

· репарация

УЧАСТНИКИ ВОСПАЛЕНИЯ

· Биогенные амины, участвующие в процессе воспаления, представлены, главным образом, гистамином и серотонином.

· При воспалении гистамин вызывает расширение артериол, повышение проницаемости венул, способствует освобождению кининов и метаболитов арахидоновой кислоты, инициирует зуд и боль, активацию хемокинеза и лимфотоксичности, стимулирует иммуносупрессивное действие лимфоцитов. Действуя на бронхи, гистамин усиливает секрецию слизи и вызывает бронхоспазм.

· СЕРОТОНИН у человека в тучных клетках отсутствует. Источником серотонина могут быть тромбоциты, эозинофилы, а в кишечнике – энтерохромаффинные клетки.

· Среди биогенных аминов, участвующих в воспалении, определенная роль отводится полиаминам: спермину, спермидину, путресцину, кадаверину. Эти вещества рассматриваются как противовоспалительные медиаторы и стимуляторы репарации, в том числе, как клеточные медиаторы ростового эффекта соматомединов.

СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА

Комплемент – система самособирающихся сывороточных белков с каскадным ферментативным действием, ключевые биологические эффекты которойсводятся к лизису бактерий и других клеток, участию в воспалении и стимуляции фагоцитоза, а также к регуляции функций клеток иммунной системы .

КОМПОНЕНТЫ И ПУТИ АКТИВАЦИИ

· Компоненты системы включают непосредственно белки комплемента , расщепленные фрагменты , рецепторына мембранах многих клеток, а также белки , регулирующие активность отдельных компонентов.

· 9 главных белков комплемента в порядке активации обозначены С1, С4, С2, С3, С5, С6, С7, С8 и С9. Расщепленные пептидные фрагменты С4, С2, С3, С5 обозначаются буквами «а», «b» и т.д. Факторы, усиливающие комплемент – D, B и P (пропердин). Рецепторы комплемента – CR1, CR2, CR3.

· Белки комплемента синтезируют многие клетки организма: гепатоциты (С3), макрофаги, моноциты, эпителий кишечника, почечных канальцев, клетки эндотелия, фибробласты и т.д. Более 90% комплемента в плазме происходит из печени. Многие компоненты комплемента (С1q, C4, C2 и др.) и, особенно, в функционально-активной форме в зоне воспаления вырабатывают макрофаги.

· Ключевым компонентом всей системы является С3. Известны, по крайней мере, 3 пути многоэтапного ферментативного каскада его активации.

· КЛАССИЧЕСКИЙ ПУТЬ. Быстро и эффективно активируется иммунными комплексами при участии IgM или IgG. В каскаде последовательно принимают участие все компоненты в следующем порядке: С1, С4, С2. Следствием такой активации является образование С3-конвертазы классического пути: С4bC2a. Участие молекул IgM и IgG в реализации классического пути активации обусловлено их способностью связывать С1q(а также С4b и C3b).

· Некоторые вещества способны связывать и активировать С1 в отсутствие специфических антител. К таким неиммунологическим активаторам относятся: С-реактивный белок, кристаллы мононатриевой соли мочевой кислоты, комплексы гепарина и протамина, некоторые вирусы (ВИЧ) бактериальные гликолипиды.

· Вариантом классического пути является ЛЕКТИНОВЫЙ ПУТЬ активации комплемента, который осуществляется без участия антител в присутствии особого белка MBL. Данный белок обладает сродством к маннозе и некоторым полисахаридам, которые в свободной форме присутствуют на поверхности микробных клеток, но не клеток макроорганизма.

· Активацию АЛЬТЕРНАТИВНОГО ПУТИ способны запустить агрегированные IgG, IgM, IgA, IgE, комплексы антигена с бивалентными фрагментами IgG-антител типа F(ab`)₂, бактериальные и растительные полисахариды (ЛПС, декстран, инулин), вирусы, дрожжи (зимозан), клетки высших организмов и фактор яда кобры. В этом каскаде не участвуют ионы Са²⁺ и компоненты С1, С4 и С2.

· После инициации альтернативного пути, заканчивающейся формированием молекул комплекса С3iBb, следует его амплификация. Она обусловлена ферментативной деградацией этим комплексом молекул С3 с наработкой больших количеств С3b, вовлекаемых во взаимодействие с факторами В, D и образованием нового комплекса молекул - С3bBb, являющихся С3-конвертазой альтернативного пути.

· С3b, образовавшийся в результате активации комплемента по классическому пути и ковалентно фиксированный к молекуле IgG, также может присоединять к себе фактор В со всеми последующими превращениями и с образованием в конечном итоге С3bBb. В этом случае альтернативный каскад служит механизмом амплификации классического пути активации комплемента.

· Расщепление молекул С3 при участии С3-конвертаз классического и (или) альтернативного пути сопровождается образованием фрагментов С3а и С3b. Фрагмент С3а остается в жидкой фазе, а С3b (при активации классического пути) ковалентно фиксируется на молекуле иммуноглобулина G с образованием комплекса С4bС2аС3b, представляющего собой С5-конвертазу классического пути. При этом происходит отщепление С1q и солюбилизация иммунного комплекса. При активации альтернативного пути роль С5-конвертазы выполняет комплекс С3bBb, который одновременно является и С3-конвертазой этого пути.

· Результаты действия обеих С5-конвертаз идентичны: расщепление фактора 5 на более крупный (С5b) и мелкий (С5а) фрагменты, из которых первый связывается с комплексом компонентов комплемента на клеточной мембране, а второй остается в жидкой фазе.

· Активация С5 открывает терминальный этап активации комплемента - формирование литического комплекса, включающее присоединение к С5b С6-компонента комплемента с последующим связыванием других терминальных компонентов С7, С8 и С9. Последний из них (С9) представляет собой белок, гомологичный перфорину. Как и перфорин он способен полимеризоваться при контакте с фосфолипидами мембраны, в результате чего формируется цилиндрический комплекс, встраивающийся в мембрану как его интегральный компонент. Эти цилиндры образуют поры, которые нарушают целостность мембраны и создают возможность для поступления в клетку ионов Н⁺, Na⁺ и воды (но не белков), что и приводит к разрыву мембраны и к гибели клетки.

МЕДИАТОРЫ ВОСПАЛЕНИЯ

ЭЙКОЗАНОИДЫ

И КЛЮЧЕВЫЕ ФЕРМЕНТЫ СИНТЕЗА

· Эйкозаноиды представляют собой продукты превращений арахидоновой кислоты (АК), специфическое высвобождение которой из фосфолипидов клеточных мембран происходит при участии фосфолипазы А₂ (ФЛА₂). Высвободившаяся АК может подвергаться метаболическим превращениям в двух направлениях: циклооксигеназном и липооксигеназном. Продуктами первого из них являются простагландины, простациклин и тромбоксан. Продуктами второго – липоксины, лейкотриены и гепоксилины.

· Ключевым ферментом, определяющим превращения АК в первом направлении является циклооксигеназа. Существуют две изоформы циклооксигеназных энзимов - СОХ-1 и СОХ-2, соответственно, выступают как регуляторы физиологических и воспалительных процессов.

ЦИТОКИНЫ

Цитокины – гормоны белковой природы, приоритетно регулирующие процессы иммуногенеза и воспаления (В.А. Черешнев, 2004).

1. Интерлейкины (ИЛ-1 – ИЛ-18) – секреторные регуляторные белки иммунной системы, обеспечивающие медиаторные взаимодействия в иммунной системе и ее связь с другими системами организма;

2. Интерфероны – противовирусные агенты с выраженным иммунорегуляторным действием (ИНФα, ИНФβ, γ – ИНФ);

3. Факторы некроза опухоли – цитокины с цитотоксическим и регуляторным действиями: ФНОα и ФНОβ (лимфотоксин);

4. Колониестимулирующие факторы (КСФ) – стимуляторы роста и дифференцировки гемопоэтических клеток (ГМ – КСФ, Г – КСФ, М – КСФ);

5. Хемокины – хемоаттрактанты для лейкоцитов;

6. Факторы роста – регуляторы роста, дифференцировки и функциональной активности клеток различной тканевой принадлежности: фактор роста фибробластов (FGF), фактор роста эндотелиальных клеток (VEGF), фактор роста эпидермиса (EGF), тромбоцитарный фактор роста (PDGF), трансформирующий фактор роста (TFR).

Основные свойства цитокинов:

1. Принадлежность к пептидам. Цитокины– как правило, гликозилированные полипептиды средней молекулярной массы (менее 30 кД).

2. Индуцибельность. Цитокины вырабатываются клетками иммунной системы и некоторыми другими клетками в ответ на активирующий стимул и участвуют в иммунных и воспалительных реакциях, регулируя их силу и продолжительность.

3. Синтез de novo. Секреция цитокинов – короткий по времени процесс. Цитокины не сохраняются как преформированные молекулы, а их синтез начинается всегда с транскрипции генов. Клетки вырабатывают цитокины в низкой концентрации (пг / мл).

4. Избыточность. Одни и те же цитокины вырабатываются клетками различных типов.

5. Плейотропность действия. Одни и те же цитокины могут действовать на различные клетки-мишени, регулируя их функцию.

6. Специфичность. Цитокины оказывают свое действие через рецепторы на поверхности клеток-мишеней, что приводит, как правило, к активации клетки, ее пролиферации, дифференцировке или гибели.

7. Синергизм. Цитокины работают по принципу сети. Они могут действовать согласованно, например, при стимуляции воспалительных реакций: ИЛ-1, ИЛ-6 и ФНО, или синтезе IgE: ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-13.

8. Антагонизм. Действие цитокинов может быть антагонистическим: γ – ИНФ тормозит выработку IgE В-лимфоцитами, тогда как ИЛ-4 оказывает стимулирующее воздействие; продукция ИЛ-6 в ответ на увеличение концентрации ФНО может быть негативным регуляторным механизмом контроля за синтез этого медиатора (ФНО) при воспалении.

9. Каскадность. Одни цитокины индуцируют синтез других цитокинов, что необходимо для развития воспалительных и иммунных реакций.

ДЕЙСТВИЕ НА КЛЕТКИ – МИШЕНИ

1. Цитокиновая регуляция функции клеток – мишеней осуществляется по аутокринному, паракринному или эндокринному механизму. Некоторые цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО и др.) могут обладать всеми тремя механизмами действия.

2. Ответ клетки на цитокин зависит от нескольких факторов:

· типа клеток;

· локальной концентрации цитокина;

· присутствия других медиаторных молекул;

· исходной функциональной активности клетки-мишени.

Экспрессия рецепторов к цитокинам на неактивированных клетках ограничена. При активации клеток-мишеней она усиливается. Поэтому действие одного и того же цитокина на один и тот же тип клеток может быть неоднозначным. В целом, цитокины образуются активированными клетками для оказания влияния на предварительно активированные клетки.

В зависимости от воздействия на воспалительный процесс цитокины подразделяются на две группы: провоспалительные (ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНОα ) и противовоспалительные цитокины (ИЛ-4, ИЛ-10, ТФРβ ).

ЦИТОКИНЫ И РЕГЕНЕРАЦИЯ

· В процессе регенерации важная роль принадлежит клеткам моноцитарно / макрофагальной системы. Хемоаттрактантами для моноцитов в очаге воспаления служат PDGF и TGFβ, высвобождаемые из тромбоцитов. Под влиянием этих цитокинов уже через 24 часа начинается накопление в очаге повреждения моноцитов, пик содержания которых в ране приходится на 48 часов.

· В рекрутировании моноцитов активная роль принадлежит и хемокину MCP-1 (моноцитарный хемоаттрактантный белок 1), который под влиянием PDGF активно синтезируется окружающими клетками и является постоянным стимулом для инфильтрации поврежденных тканей моноцитами.

· Накапливающиеся в ране моноциты активно дифференцируются в макрофаги. Активированные макрофаги, в свою очередь, также вырабатывают цитокины, среди которых TGFβ, FGF, VEGF, MCP-1, что обусловливает ангиогенез, откладывание коллагена и белков внеклеточного матрикса. Так, например, фактор роста фибробластов (FGF) вызывает реэпителизацию, а также миграцию, деление и дифференцировку фибробластов. Наряду с этим он стимулирует ангиогенез, что в конечном итоге приводит к заживлению раны.

· PDGF обладает митогенной активностью к гладкомышечным клеткам, стимулирует выработку клетками моноцитарно / макрофагального ряда других ростовых факторов (TGFβ ), является хемокином для лейкоцитов и фибробластов и стимулирует деление последних.

· Особая роль в регуляции регенерации принадлежит TGFβ, представляющему собой не один фактор, а скорее – семейство родственных пептидов с множественными эффектами на общие процессы регуляции роста, заживления ран и морфогенеза. Способность к продукции TGFβ обнаружена у многих типов клеток, в том числе у тромбоцитов, Т- и В-лимфоцитов и моноцитов. TGFβ образуется как неактивный пептид, связанный с пропептидом. Для активации TGFβ требуется либо протеолитическое расщепление, либо действие кислого рН в ране. Рецепторы к TGFβ выявляются практически на любых клетках.

· TGFβ – основной цитокин, контролирующий заживление ран. Он оказывает мощную стимуляцию на рост клеток мезенхимального происхождения и в то же время тормозит пролиферацию эпителиальных клеток, эндотелиоцитов и гемопоэтических клеток. Его влияние на пролиферацию фибробластов зависит от концентрации и наличия других ростовых факторов. В низких концентрациях TGFβ стимулирует деление фибробластов; в высоких концентрациях – усиливает их дифференцировку с повышением продукции внеклеточного матрикса.

· TGFβ регулирует экспрессию β -интегрновых рецепторов, определяя взаимодействие клеток с компонентами внеклеточного матрикса.

· TGFβ ингибирует многие функции лимфоцитов: пролиферацию Т-клеток, созревание CD 8⁺ - Т-лимфоцитов, ингибируют активность макрофагов, угнетает выработку провоспалительных цитокинов, а также ИЛ-2, ИЛ-4 и γ -ИФН.

· Наряду с усилением синтеза цитокинов в ране наблюдается снижение синтеза белка р53, угнетающего клеточное деление. На заключительном этапе заживления раны синтез цитокинов прекращается, а синтез белка р53 снова усиливается.

Лабораторный практикум

Задание 1. Сосудистая реакция при воспалении брыжейки кишечника лягушки

(Опыт Конгейма)

Необходимые животные и оборудование на 1 рабочее место:

1. Лягушка.

2. Резиновая пластинка с отверстиями.

3. Микроскоп (ок. 10, об. 8).

4. Препаровалъная игла.

5. Глазной пинцет.

6. Ножницы.

7. Булавки - 6 шт.

8. 0, 7% раствор хлористого натрия - 10 мл.

9. Вата - 5 г.

Ход исследования:

Обездвиженную лягушку помещают на резиновую пластинку животом вниз. С правой стороны вскрывают брюшную полость и извлекают брыжейку тонкого кишечника. Брыжейку веерообразно расправляют над отверстием в резиновой пластинке и фиксируют булавками за кишечник, как показано на рис. 24. Во избежание нарушения кровообращения в сосудах брыжейки петля кишечника не должна быть перекручена и сильно растянута. Подготовленный препарат помещают на столик микроскопа и рассматривают. Просмотрев бегло весь препарат, выбирают для детального наблюдения участок брыжейки с разветвленной сетью мелких сосудов. Вследствие травмы (извлечение кишечника и расправление брыжейки) и нахождения кишечника в необычных условиях (воздушная среда) через 5 - 10 минут в брыжейке развивается острое воспаление.

В первый момент воспаления возникает сужение сосудов (остается незамеченным), в дальнейшем происходит расширение их. Ток крови ускоряется. В сосудах можно различить широкий осевой слой (форменные элементы крови) и узкий краевой (плазматический). Ускорение кровотока в последующем сменяется замедлением. Местами в артериях можно наблюдать маятникообразное движение крови. В этот период лейкоциты начинают принимать краевое стояние и прилипают к внутренней стенке сосудов (стадия краевого стояния лейкоцитов). Далее лейкоциты начинают терять округлую форму, проникают в толщу стенки и постепенно мигрируют за ее пределы в ткань.

Наблюдение проводится в течение длительного времени - 1 - 2 часа. Зарисовывают краевое стояние лейкоцитов.

Задание 2. Сосудистая реакция и эмиграция лейкоцитов при развитии острого воспаления мочевого пузыря лягушки

Необходимые животные и оборудование на 1 рабочее место:

1. Лягушка та же, что и в предыдущем опыте.

2. Оборудование то же.

Дополнительно:

1. Канюля с резиновой трубкой и стеклянным наконечником.

2. Покровное стекло.

3. Спирт - 5 мл.

Ход исследования:

Опыт ставят на лягушке, использованной в предыдущем эксперименте. В задний проход лягушки вставляют стеклянную канюлю с резиновой трубкой, через которую мочевой пузырь слегка раздувают. Мочевой пузырь извлекают из брюшной полости через боковой разрез, прикрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом (рис. 29).

В стенке мочевого пузыря под влиянием атмосферного воздуха развивается воспаление, при котором особенно рельефно выступают явления краевого стояния и эмиграции лейкоцитов.

Зарисовывают краевое стояние лейкоцитов и рассматривают механизм развития сосудистых изменений при воспалении.

Задание 3. Определение протеолитической активности ферментов гноя

Необходимое оборудование на 1 рабочее место:

1. Отстой гноя (№ 1)- 5 мл.

2. Штатив с пробирками (6 шт.).

3. 1% раствор казеина - 6 мл.

4. Реактив на белок (смесь 5 мл ледяной уксусной кислоты, 45 мл 96⁰ спирта с 50 мл дистиллированной воды) - 2, 0 мл.

5. Пипетка объемом 1, 0 мл.

6. Глазная пипетка - 2 шт.

7. Термостат.

Ход исследования:

В 6 пробирок (диаметр 0, 5 - 0, 7 мм) наливают по 1 мл раствора белка (казеина) и во все пробирки, кроме первой, добавляют отстой гноя (№ 1) в возрастающем количестве (2 - 4 - 6 - 8 и 10 капель). Содержимое пробирок встряхивают и помещают в термостат на 30 минут при температуре 37⁰С. По истечении этого срока пробирки извлекают из термостата и добавляют по 2 капли реактива на белок.

Реактив на белок, взаимодействуя с казеином, дает мутное кольцо или хлопья. При наличии в гное протеолитических ферментов произойдет расщепление белка, и кольцо не будет образовано или будет слабо выражено.

Полученные результаты заносят в таблицу 10.

Таблица 10


Раствор казеина в мл
Гной № 1 в каплях	-
Реактив на белок	+	+	+	+	+	+
Появление кольца

Оценка реакции производится знаком +; ++; +++, в зависимости от величины кольца (или интенсивности появления хлопьев). Знаком - обозначается отсутствие кольца или хлопьев.

Задание 4. Определение амилолитической активности ферментов гноя

Необходимое оборудование на 1 рабочее место:

1. Отстой гноя (№ 2) - 5, 0 мл.

2. Штатив с пробирками (6 шт.).

3. 1% раствор крахмала - 6, 0 мл.

4. Реактив на крахмал - раствор Люголя (1 часть йода, 2 части йодида калия и 17 частей воды) - 2, 0 мл.

5. Пипетка объемом 1, О мл.

б. Глазная пипетка (2 шт.).

7. Термостат.

Ход исследования:

В 6 пробирок наливают по 1 мл раствора крахмала во все пробирки, кроме первой, добавляют отстой гноя (М~ 2) в возрастающем количестве (2 - 4 - б - 8 - 10 капель). Содержимое пробирок встряхивают и помещают, в термостат на 30 минут при температуре 37⁰ С. После извлечения пробирок из термостата в каждую добавляют по 1 капле реактива на крахмал (раствор Люголя). различной окраске содержимого пробирок отмечают результаты переваривания крахмала амилолитическими ферментами гноя. Результаты исследования заносят в таблицу 11.

Таблица

№ пробирок
Раствор крахмала в мл
Гной № 2 в каплях	-
Раствор Люголя	+	+	+	+	+	+
Цвет

Задание 5. Определение кислотности (рН) в гнойном экссудате и в лизате из здоровой мышцы

Необходимое оборудование на 1 рабочее место:

1. Отстой гноя (№ 3).

2. Лизат из здоровой мышцы (№ 4).

3. Предметное стекло

4. Универсальный индикатор (1% спиртовой раствор паранитрофенола).

5. Глазная пипетка (3 шт.).

Ход исследования:

На один конец лакмусовой бумаги наносят каплю отстоя гноя (№ 3), на другой - лизат мышечной ткани (№ 4). Сравнивают цвет с эталоном.

Рассматривают механизм развития кислой реакции в воспаленной ткани.

Контрольные вопросы:

1. Определение понятия " воспаление", причины воспаления, классификация. Местные признаки воспаления. Представление об изначально защитной сущности воспаления как типового патологического процесса. Особенности воспалительной реакции (саморазвитие, множественность " участников", цепной и каскадный характер вовлечения гуморальных и клеточных механизмов), значимость ингибиторов, удерживающих меру реакции в рамках ее физиологического защитного значения.

2. Основные стадии развития воспалительной реакции. Первичная и вторичная альтерация. Изменения обмена веществ при воспалении, физико-химические изменения в очаге воспаления.

3. Клеточно-молекулярные механизмы воспаления: полиморфно-ядерные лейкоциты и клетки моноцитарно-макрофагальной системы; молекулы адгезии (основные группы); провоспалительные и противовоспалительные цитокины; эйкозоноиды и ФАТ; система комплемента (классический и альтернативный пути активации), роль протеаз в активации системы комплемента, понятие об анафилотоксинах; биогенные амины; роль фактора Хагемана в кининогенезе, фибринолизе и активации системы комплемента. Оксид азота. Представление об острофазовых реактантах (ОФР), основные группы ОФР, их роль в развитии воспаления.

4. Нарушение микроциркуляции в очаге воспаления. Механизмы формирования артериальной гиперемии. Особенности линейного кровотока при артериальной гиперемии в очаге воспаления. Факторы, определяющие переход артериальной гиперемии в венозную при воспалении.

5. Адгезия лейкоцитов. Сосудистые и лейкоцитарные факторы, участвующие в адгезии. Роль селектинов, интегринов, иммуноглобулинподобных молекул в реализации начальных и конечных этапов адгезии и в приобретении лейкоцитами локомоторного фенотипа. Инвазия лейкоцитами сосудистой стенки, механизмы инвазии.

6. Хемотаксис лейкоцитов, механизм, значение в формировании воспалительного инфильтрата.

ЛИТЕРАТУРА

1. Адо А. Д., Петров И. Р. Патологическая физиология (учебник). М., 1957, стр. 176 - 188.

2. Мечников И. И. Лекции по сравнительной патологии воспаления. М., 1947.

3. Методические рекомендации к практическим занятиям по патологической физиологии. Под редакцией Е.П.Кожевниковой. Оренбург, 1980.

4. Учебник - Патологическая физиология. Под редакцией А.Д. Адо, В.В.Новицкого. Томск. Изд-во Томского ун-та, 1994.

5. Патофизиология (курс лекций). Под ред. проф. И.Ф.Литвицкого. М. “Медицина”, 1996.

ЗАНЯТИЕ 7-е

ТЕМА 1. НАРУШЕНИЕ КРОВООБРАЩЕНИЯ И ИЗМЕНЕНИЕ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ В ОЧАГЕ ВОСПАЛЕНИЯ

12 3 4 Следующая ⇒