Особенности и условия действия дезинфицирующих средств на патогенную и условно-патогенную микрофлору

⇐ ПредыдущаяСтр 4 из 32Следующая ⇒

Степень губительного действия дезинфицирующих средств на микробную клетку, а, следовательно, эффективность обеззараживания зависит от ряда причин: 1) биологических особенностей микроорганизма; 2) бактерицидных свойств химического средства; 3) свойства среды, в которой происходит контакт микроорганизма с химическим средством; 4) температуры раствора; 5) концентрации препарата; 6) нормы расходования раствора; 7) экспозиции; 8) способа подачи раствора к объекту дезинфекции.

Режимы, способы и техника дезинфекции во многом определяется устойчивостью микроорганизмов к воздействию факторов окружающей среды (длительность выживания) и к дезинфицирующим средствам.

Резистентность бактериальных клеток зависит от вида бактерий, от особенностей строения и проницаемости клеточных стенок, от количества липидов, которые предохраняют их от неблагоприятного влияния многих химических факторов.

Устойчивость микроорганизмов зависит также от стадии развития. Споровые формы или образование капсулы у бактерий способствуют повышению устойчивости микробной клетки к действию химических средств, тогда как на бактериальные формы клеток губительно действуют малотоксичные химические средства.

В связи с этим по устойчивости к действию дезинфицирующих средств возбудителей инфекционных болезней делят на 4 группы: малоустойчивые, устойчивые, высокоустойчивые и особо устойчивые.

Взаимодействие микроорганизмов с химическим средством зависит не только от структуры и степени устойчивости микроорганизма к вредному на него влиянию, но и от способности химического вещества проявлять в одном случае бактерицидный, а в другом – лишь бактериостатический эффект.

Недостаточное количество вступившего в контакт с клеткой химического вещества или недостаточность времени воздействия задерживает прорастание микроорганизмов, но не убивает их. Такое действие различных факторов и препаратов называется бактериостатическим.

Однако бактериостатическая способность химического средства в других условиях часто переходит в способность убивать бактерий, то есть оказывать на них бактерицидное действие.

Взаимодействие химического средства с микробной клеткой происходит в той или иной среде, которая может быть газообразной, жидкой, вязкой и плотной. В жидкой среде (вода), наиболее благоприятной для диссоциации химического вещества, быстро наступает контакт его с микробной клеткой, тогда как густая, вязкая или плотная среда (почва, навоз, навозная жижа), содержащая значительное количество органических веществ, препятствует непосредственному контакту химического средства с микробной клеткой и, вступая с ним в химическое взаимодействие, часто делает его недейственным или значительно снижает его дезинфицирующие способности. Поэтому возникает необходимость проведения тщательной механической очистки (перед нанесением дезинфицирующих средств), обеспечивающей непосредственный контакт дезинфицирующего средства с микробной клеткой.

Одним из существенных условий обеззараживания является температура. При низкой температуре уменьшается диссоциация многих растворов, что ведет к ослаблению диффузии химического вещества в микробную клетку, а многие из них утрачивают дезинфицирующие свойства.

При проведении дезинфекции нельзя произвольно уменьшить концентрацию раствора, которая установлена для уничтожения данного возбудителя, так как не будет достигнут эффект, на который рассчитывают.

Количество раствора для обеззараживания того или иного объекта имеет важное значение. Установлено, что для обеззараживания 1м² поверхностей (стен, потолка и пола) помещений для животных необходим 1л дезинфицирующего раствора, а для дезинфекции приспособленных (нетиповых) помещений 2л/2м²; для поверхностей, покрытых плиткой и масляной краской, - меньше 1л/м².

В промышленном животноводстве широкое распространение получил метод дезинфекции путем мелкокапельного опрыскивания. Это позволяет равномерно оросить всю поверхность предмета при необходимости расходования раствора 0, 3-0, 5 л/м².

Экспозиция, или время воздействия химического дезинфицирующего средства, зависит от его концентрации и бактерицидных свойств. При дезинфекции объектов животноводства экспозиция в зависимости от устойчивости к действию химических дезинфицирующих средств составляет в пределах от 30 минут до 3 часов. Если есть возможность, то экспозицию увеличивают до 6-12 часов.

При обеззараживании стен, потолков помещений важное значение имеет способ нанесения дезинфицирующего раствора. Поверхность должна быть полностью обильно смочена раствором. Установлено, что наиболее эффективные результаты получаются при распылении раствора, так как время контакта его с микробной клеткой увеличивается в 3-4 раза. Однако, следует отметить, что подача распыленной струей эффективна только при дезинфекции растворами хлорной извести и др., действие которых эффективно без подогрева.

Подача путем распыления растворов, подогретых до 70-80°С, приводит к тому, что они, проходя мелкой струей охлаждаются и достигают объекта, уже имея температуру окружающего воздуха, не оказывая на микробов губительного действия.

Продолжительность сохранения микробов во внешней среде в зависимости от их вида и условий среды варьирует от нескольких часов и дней до нескольких месяцев, лет и даже десятилетий. Многие микроорганизмы очень устойчивы и к действию химических веществ, особенно если эти микробы находятся в различных органических субстанциях.

Все это обусловливает необходимость изыскания таких методов, средств и технологических приемов дезинфекции, которые обеспечивали бы возможность проведения эффективных противоэпизоотических и экономически выгодных мероприятий при санации окружающей животных среды. Поэтому в каждом отдельном случае при выборе дезинфектанта необходимо учитывать:

- вид болезни и устойчивость ее возбудителя;

- объект дезинфекции (помещения для животных, предметы ухода, навоз, сточные или питьевые воды и др.);

- объем дезинфекционных мер (размеры помещений или другого объекта);

- возможность перевозки и применения дезинфицирующего средства в малоприспособленных условиях;

- действие дезинфицирующего средства на животных;

- действие дезинфицирующего средства на предметы (возможность порчи объектов);

Методы определения содержания активно действующего вещества в дезинфицирующих средствах и их растворах

Качество дезинфекции во многом зависит от правильного выбора дезинфицирующих средств с учетом конкретных условий, т.е. с учетом биологических особенностей возбудителя.

До приготовления дезинфицирующего раствора необходимо определить процент действующего вещества в препарате. Это позволит правильно рассчитать необходимое количества препарата для приготовления рабочего раствора нужной концентрации.

Концентрацию рабочих растворов дезинфицирующих средств (табл. 4) определяют, исходя из цели дезинфекции (профилактическая или вынужденная) и принадлежности возбудителя болезни к группе, соответствующей по устойчивости к действию химических дезинфицирующих средств.

По устойчивости к химическим дезинфицирующим средствам возбудителей основных инфекционных болезней животных и птицы делят на четыре группы: малоустойчивые, устойчивые, высокоустойчивые и особо устойчивые (табл. 5).

Таблица 4. Концентрация растворов химических дезинфицирующих средств для профилактической и вынужденной дезинфекции, %

Дезинфицирующие средства	Группы устойчивости возбудителей

Натр едкий
Формалин, параформ
Хлорная известь
Нейтральный гипохлорит кальция
Глутаровый альдегид	0, 5
ДП-2	1, 5	2, 0	4, 0	5, 0
Однохлористый йод
Свежегашеная известь				-
Кальцинированная сода		-	-	-
Препараты на основе надуксусной кислоты	0, 3	0, 5	1, 0	-
Перекись водорода
Йодез			-

Примечание: для профилактической дезинфекции объектов животноводства применяют химические дезинфицирующие средства в концентрации, указанной для возбудителей первой группы устойчивости.

В хозяйствах промышленного типа и комплексах профилактическую дезинфекцию проводят по регионам, в соответствии с действующими инструкциями по дезинфекции.

Растворы натра едкого, кальцинированной соды применяют горячими (80-90°С). Взвесь свежегашеной извести и кальцинированную соду используют только для профилактической и текущей дезинфекции.

При туберкулезе и паратуберкулезе натр едкий и формалин или параформ применяют в виде щелочного раствора формальдегида, содержащего 3% щелочи и 3% формальдегида, а при микозах соответственно 1% и 2%.

Таблица 5. Устойчивость к химическим дезинфицирующим средствам возбудителей основных инфекционных болезней


Малоустойчивые	Устойчивые	Высокоустойчивые	Особо устойчивые
Лейкоз, бруцеллез, колибактериоз, сальмонеллез, лептоспироз, листериоз, болезнь Ауески, пастереллез, трихомоноз, кампилобактериоз, трипаносомоз, токсоплазмоз, инфекционный ринотрахеит, парагрипп, вирусная диарея крупного рогатого скота, контагиозная эктима, инфекционная агалактия, контагиозная плевропневмония овец и коз, отечная болезнь, инфекционный атрофический ринит, дизентерия, вирусный гастроэнтерит, балантидиоз, гемофилезная плевропневмония, рожа свиней, ринопневмония лошадей, пуллороз-тиф, микоплазмоз птиц, миксоматоз кроликов, диарейные заболевания молодняка, вызываемые условно-патогенной микрофлорой (протей, клебсиеллы, морганеллы и т.п.)	Аденовирусная инфекция, ящур, оспа, туляремия, орнитоз, диплококкоз, стафилококкоз, стрептококкоз, бешенство, чума всех видов животных, некробактериоз, аспергиллез, кандидамикоз, трихофития, микроспория, хламидиоз, риккетсиоз, энтеровирусные инфекции, грипп сельскохозяйственных животных и птиц, злокачественная катаральная горячка, перипневмонии, актиномикоз крупного рогатого скота, инфекционная катаральная лихорадка, копытная гниль и инфекционный мастит овец, везикулярная болезнь свиней, инфекционная анемия, инфекционный энцефаломиелит, эпизоотический лимфангит, сап и мыт лошадей, гепатит утят, вирусный энтерит гусят, инфекционный бронхит, ларинготрахеит, болезнь Марека, болезнь Гамборо, инфекционный энцефаломиелит и ньюкаслская болезни птиц, вирусный энтерит, алеутская болезнь, псевдомоноз и инфекционный гепатит плотоядных, вирусная геморрагическая болезнь кроликов.	Туберкулез животных и птиц, паратуберкулез.	Сибирская язва, анаэробная дизентерия ягнят, анаэробная энтеротоксемия поросят, брадзот, злокачественный отек, инфекционная энтеротоксемия овец, эмкар, другие споровые инфекции, кокцидиоз.

Для профилактической дезинфекции при инфекциях, возбудители которых относятся к группе малоустойчивых (группа 1). Применяют (в пересчете на ДВ) 0, 3%-ный раствор глутарового альдегида, 3%-ный раствор формальдегида, 2%-ный раствор хлорамина или перекиси водорода, 1%-ный раствор (по препарату) йодеза.

Для профилактической, а также вынужденной (текущей и заключительной) дезинфекции при инфекциях, возбудители которых относятся к группе устойчивых (2 группа), и при вынужденной дезинфекции относящихся к группе малоустойчивых (1 группа), применяют 0, 5%-ный раствор глутарового альдегида, 4%-ный раствор формальдегида, 3%-ный раствор хлорамина Б или перекиси водорода, 1%-ный раствор (по препарату) йодеза.

Возбудители, относящиеся к группе особо устойчивых (4 группа), контроль качества дезинфекции, который осуществляют по выделению Bacillus cereus, применяют рабочий раствор, содержащий 2% глутарового альдегида, 4% формальдегида, 5% перекиси водорода, 3% йодеза. Обработку проводят с интервалом 1, 5-2 часа.

Экспозиция дезинфекции при малоустойчивых и устойчивых возбудителях инфекционных болезней составляет 3 часа, при особо устойчивых – 24 часа. По окончании экспозиции дезинфекции поилки, кормушки и оборудование промывают водой от остатков препарата, а помещения проветривают и просушивают, после чего разрешают их использовать по назначению.

Определение содержания активного хлора в хлорной извести (в препарате и его растворах)

Аппаратура, реактивы и растворы. Весы лабораторные, измерительная колба или мерный цилиндр на 100, 200, 250, 500 или 1000 см³; пипетки на 10, 25, 50 или 100 см³; эрленмейеровская колба на 250-500 см³; бюретка 50 см³; 2%-ный раствор йодистого калия; соляная кислота; деци- или сантинормальный раствор серноватистокислого натрия (гипосульфата); 1%-ный раствор крахмала (индикатор).

Ход определения. Из разных мест берут 1 кг хлорной извести, тщательно перемешивают и из этой пробы отвешивают на весах 1 г, после чего ее быстро растирают в фарфоровой ступке с небольшим количеством дистиллированной воды, смывают тщательно водой в измерительную колбу или мерный цилиндр емкостью 100, 250, 500 или 1000 см³ и к содержимому колбы добавляют дистиллированной воды до метки или полного объема мерного цилиндра, тщательно перемешивают и, не давая осадку осесть, отбирают пипеткой 1/10 часть емкости (10, 25, 50 или 100 см³) и вносят в эрленмейеровскую колбу. Сюда же приливают 10 см³ 2%-ного раствора йодистого калия и 10-15 капель соляной кислоты, перемешивают, закрывают колбу пробкой и ставят в темное место на 5 минут.

В этой реакции выделяющийся из хлорной извести хлор вытесняет эквивалентное хлору количество йода из раствора йодистого калия и занимает его место. От выделения йода жидкость окрашивается в интенсивно желтый цвет, ее титруют 0, 1н раствором серноватисто-кислого натрия до слабо-желтого оттенка. Прибавляют 1 см³ индикатора (1%-ного раствора крахмала) и окрасившуюся в синий цвет жидкость продолжают титровать до полного обесцвечивания. Расход тиосульфата натрия укажет на эквивалентное количество связанного йода, а отсюда легко подсчитать количество хлора во взятой хлорной извести:

Ca(ClO)₂ + 2KI + 2HCl = CaCl₂ + 2KCl + H₂O + J₂ + O;

I₂ + 2Na₂S₂O₃ = 2NaI + Na₂S₄O₆.

Из этих уравнений видно, что вес одной части хлора равен весу одной части йода, а вес одной части йода равен весу одной части Na₂S₂O₃.

Процентное содержание активного хлора вычисляют по формуле:

;

Где Х – содержание активного хлора, %; V – объем 0, 1н раствора сернисто-кислого натрия, израсходованного на титрование анализируемой пробы, см³; К – коэффициент поправки 1, 1 тиосульфита натрия; 0, 00355 – масса активного хлора, соответствующая 1 см³ 0, 1н раствора серноватисто-кислого натрия, г; 100 – коэффициент для перевода в проценты; 1/10 – часть навески.

Пример. Навеска хлорной извести 1 г разбавлена 100 см³ воды. Взято для титрования 10 мл взвеси (0, 1 навески хлорной извести). На титрование этой взвеси пошло 6, 6 см³ 0, 1н раствора тиосульфата натрия с поправочным коэффициентом 1, 1. Навеска равна 1г, а 1/10 часть ее, взятая для титрования, - 0, 1г.

Массовую долю активного хлора определяют по формуле:

, следовательно, в испытуемой извести содержится 25, 8% активного хлора.

Определение процентного содержания активного хлора в растворах хлорной извести

Если раствор хлорной извести приготовлен за несколько дней до его применения, то перед применением в нем определяют процентное содержание активного хлора.

К 50 см³ 2%-ного раствора йодистого калия приливают 50 см³ дистиллированной воды и для подкисления 5 см³ раствора соляной кислоты. После взбалтывания добавляют 1 см³ испытуемого раствора хлорной извести и полученную смесь титруют 0, 1н раствором тиосульфата натрия. В конце титрования добавляют 1 см³ индикатора (1%-ного раствора крахмала) и титруют до полного обесцвечивания. По количеству гипосульфита, израсходованного на реакцию, определяют содержание активного хлора в 1 см³ испытуемого раствора хлорной извести, учитывая, что 1 см³ децинормального раствора гипосульфита эквивалентен 0, 00355 г хлора. Допустим, что на титрование пошло 15 см³ гипосульфита, тогда:

0, 00355× 15=0, 05325 или 0, 05325× 100=5, 32%.

Определение процентного содержание едкого натра в растворе

Растворы натрия гидроокиси готовят путем простого растворения препараты в воде. Процентное содержание натрия гидроокиси в растворе определят методом титрации. При исследовании пользуются следующей посудой и реактивами.

Посуда: градуированные пипетки на 10 мл – 2 шт.; лабораторные стаканчики или мензурки на 100 мл – 3 шт.; флаконы на 150-200 мл – 2 шт.; флакон на 25-50 мл – 1 шт.; глазная пипетка – 1 шт.

Реактивы: 0, 5н раствор хлористоводородной кислоты; 0, 1% раствор метилоранжа (растворяют 0, 1 индикатора в 100 мл дистиллированной воды); испытуемый раствор едкого натра.

Ход определения. Градуированной пипеткой набирают 10 мл раствора едкого натра и вносят в стаканчик. Глазной пипеткой добавляют туда 2-3 капли 0, 1%-ного водного раствора метилоранжа. Жидкость в стаканчике приобретает желтовато-коричневый цвет. Другой пипеткой набирают 0, 5н раствор хлористоводородной кислоты и титруют, добавляя струйками, затем по каплям при постоянном помешивании до появления розового окрашивания. Удобно проводить титрование из бюретки со стеклянным краником.

Замечают, сколько 0, 5н хлористоводородной кислоты ушло на титрование, и процент едкого натра в растворе определяют по формуле:

, где а – количество мл 0, 5н раствора хлористоводородной кислоты; 0, 02 – титр хлористоводородной кислоты; 100 – множитель для перевода в процент; 10 – количество мл испытуемого раствора щелочи.

Определение концентрации едкого натра в растворе по удельному весу.

Посуда и приборы: стеклянный цилиндр на 0, 5 или 1 л – 1 шт.; набор денсиметров (от 1, 000 до 1, 160 ед. плотности); раствор едкого натра должен иметь температуру 18-20°С.

Таблица 6. Концентрация едкого натра в растворе по удельному весу

Раствор едкого натра	Ход определения
Плотность	Концентрация	Плотность	Концентрация	Раствор едкого натра наливают в стеклянный цилиндр, определяют денсиметром плотность и по таблице смотрят, какой концентрации (в процентах) данная плотность соответствует.
1, 012	1, 0	1, 069	6, 0
1, 018,	1, 5	1, 075	6, 5
1, 024	2, 0	1, 080	7, 0
1, 029	2, 5	1, 085	7, 5
1, 035	3, 0	1, 091	8, 0
1, 042	3, 5	1, 097	8, 5
1, 048	4, 0	1, 103	9, 0
1, 052	4, 5	1, 108	9, 5
1, 058	5, 0	1, 113	10, 0
1, 064	5, 5

Определение процентного содержания формальдегида в формалине (метод титрации)

Реактивы и посуда: 1) нормальный раствор едкого нара; 2) децинормальный раствор йода; 3) децинормальный раствор тиосульфата натрия; 4) хлористоводородная кислота – нормальный раствор; 5) 1%-ный раствор крахмала; 6) колба коническая до 500 мл; 7) бюретки.

Титрование формальдегида основано на том, что при взаимодействии формальдегида с сернокислым натрием (сульфитом) происходит количественное освобождение гидрата окиси натрия с образованием бисульфитного соединения формальдегида:

CH₂O + Na₂SO₃ +H₂O = NaOH + CH₂NaSO₃OH.

Ход определения. В коническую колбу вливают 30 мл нормального раствора едкого натра, 50 мл разбавленного в 20 раз формалина (к 5 мл формалина добавляют 95 мл воды) и 100 мл децинормального раствора йода, который приливают из бюретки медленно небольшими порциями и осторожными круговыми движениями колбы смешивают прилитую порцию йода с имеющейся в колбе жидкостью, затем колбу закрывают пробкой и ставят в темное место на 30 мин., после чего добавляют 40 мл нормального раствора хлористоводородной кислоты. При этом почти бесцветная жидкость становится бурой. Ее титруют децинормальным раствором тиосульфата. Когда смесь приобретет слабо-желтую окраску, в колбу вливают 1 мл раствора крахмала (индикатор). Окрасившуюся в синий цвет жидкость продолжают титровать до полного обесцвечивания. Содержание формальдегида в процентах вычисляют по формуле:

X = (100-Y)× 0, 0015× 20× 20,

Где Х – процент формальдегида в формалине; 100 – количество раствора йода (мл); Y – количество тиосульфата (мл), пошедшее на титрование; 0, 0015 - грамм-эквивалент формальдегида; 20 – разведение формальдегида; 20 – множитель для процентного выражения.

Определение формальдегида в формалине по удельному весу.

Реактивы и посуда: стеклянный цилиндр на 0, 5 или 1 л – 1 шт.; денсиметр с делениями 1, 080-1, 160; испытуемый формалин (должен иметь температуру 18-20°С).

Ход определения. Формалин наливают в стеклянный цилиндр до 2/3 его высоты. Денсиметром определяют удельный вес формалина. Процент формальдегида рассчитывают по формуле:

Х = (а – 1)× 1000: 2, 5,

Где а – удельный вес формалина; 1 – удельный вес воды; 1000 – множитель для дробных чисел в целые; 2, 5 – константа.

Расчет потребности дезинфицирующих средств для приготовления рабочих растворов:

Раствор креолина. Количество креолина (Х, л), необходимо для приготовления рабочего раствора, определяют по формуле:

;

где а – рекомендуемая концентрация рабочего раствора, %; b – необходимое количество рабочего раствора, л; с – исходная концентрация дезинфицирующего средства, %.

Пример. Необходимо приготовить 100 л 5%-ного раствора креолина. По формуле высчитываем, что для этого надо 5 л креолина растворить в 95 л воды:

Раствор эстостерила-1. Количество препарата (Х, л), необходимое для приготовления рабочего раствора, определяют по формуле:

;

где а – рекомендуемая концентрация рабочего раствора, %; b – необходимое количество рабочего раствора, л; с – исходная концентрация дезинфицирующего средства, (16%).

Пример. Надо приготовление 100 л 3%-ного раствора эстостерила-1.

Для этого необходимо 18, 75 л эстостерила-1 растворить в 81, 25 л воды:

Х = 3 × 100: 16 = 18, 75.

На 100 л нужно взять 18, 75 л эстостерила-1.

Раствор метафора. Количество метафора (Х, л) для приготовления рабочего раствора определяют по формуле:

где а – заданная концентрация рабочего раствора, %; b – необходимое количество рабочего раствора, л; с – исходная концентрация дезинфицирующего средства (20%).

Пример. Надо приготовить 100 л 2%-ного раствора метафора. Потребное количество метафора вычисляется с учетом содержания в нем формальдегида по пропорции:

100 – 20

Х – 2 откуда

Надо 10 л метафора растворить в 90 л воды.

Методом расчета студенты индивидуально определяют количество дезинфицирующих средств по формуле:

где Х – количество исходной хлорной извести, необходимое для получения раствора заданной концентрации, кг; а – концентрация активного хлора, которую нужно получить в рабочем растворе, %; b – концентрация активного хлора в сухой хлорной извести, %; 100 – коэффициент для перевода на 100 л.

Задача №1. Имеется хлорная известь с концентрацией хлора 25%, необходимо приготовить раствор, содержащий 3% активного хлора. Определить количество сухой хлорной извести на 100 л воды.

Задача №2. Сколько надо взять хлорной извести для приготовления 50 мл взвеси с содержанием 2% активного хлора, если в сухой извести содержится 18% активного хлора?

Задача №3. Сколько надо взять хлорной извести с содержанием 20% активного хлора для дезинфекции скотного двора, имеющего размеры: длина – 50 м, ширина – 10 м, высота – 4 м.

Для дезинфекции нужно приготовить взвесь, содержащую 2% активного хлора, расход 1 л/м². Пол обработать дважды.

Задача №4. Хлорную известь иногда применяют в виде хлорно-известкового молока. Из хлорной извести с содержанием 25% активного хлора приготовили 20%-ную взвесь (известковое молоко). Каково процентное содержание активного хлора в этой взвеси?

Задача №5. Животноводческая ферма предприятия состоит из одного коровника (размеры: длина – 88 м, ширина – 10 м, высота стен – 2, 8), одного типового телятника (размеры: длина – 73 м, ширина – 9 м, высота – 2, 8 м) и одного приспособленного телятника ( размеры: длина – 60 м, ширина – 15 м, высота – 3 м). рассчитайте, сколько потребуется хлорной извести для проведения профилактической дезинфекции. Для дезинфекции будет применен раствор хлорной извести с содержанием 2% активного хлора из расчета 1 л/м² в типовых помещениях и 2 л/м² в приспособленном помещении. Хлорная известь, имеющаяся в хозяйстве, содержит 26% активного хлора.

Задача №6. Нужно получить 3%-ный раствор из формалина, в котором содержится 36% формальдегида.

Задача №7. Сколько граммов хлорной извести, содержащей 20% активного хлора, нужно взять для приготовления 100 мл 2, 5%-ной взвеси хлорной извести.

⇐ Предыдущая 1 2 345 6 7 8 9 10 Следующая ⇒