Гемофильные бактерии: таксономия, свойства, роль в патологии человека, лабораторная диагностика.

Гемофильные бактерии относятся к семейству Pasteurellaceae, роду Haemophilus, который включает 16 видов, среди них есть сапро-

фиты и патогенные микроорганизмы.Наибольшую роль в патологии играет H.influenzae, вызывающийвоспалительные процессы дыхательных путей, менингиты, бронхиты, и H.ducreyi – возбудитель мягкого шанкра. H. aprophilus, H.paraprophilus вызывают эндокардиты.

Свойства

Морфология. Являются мелкими коккобактериями, выражен по-лиморфизм, имеют капсулу, не образуют спор, не имеют жгутиков, по

Граму окрашиваются отрицательно.Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, прихотливык питательным средам. Нуждаются в наличии факторов роста в среде.Этими факторами являются факторы Х или V, которые содержатся вэритроцитах: V – термолабильный кофермент, он является составнойчастью витамина В, содержится в дрожжах, в тканях растений и жи-вотных, участвует в энергетическом метаболизме; фактор Х – термо-стабильный, содержится в эритроцитах. Лучшими средами являются

кровяной и шоколадный агар. На этих средах чаще вырастают S-формы колоний или М – слизистые колонии. Непатогенные, бескап-

сульные штаммы образуют R-формы колоний. Оптимальная темпера-тура роста 370С. Длительность роста – 36-48 часов. На кровяном агаре

с добавлением сердечно-мозгового экстракта через 24 часа появляетсярост мелких колоний с радужными переливами, гемолиз отсутствует.

У беcкапсульных вариантов радужная расцветка не выявляется. Нажидких средах с кровью рост чаще диффузный, реже – придонный.Биохимические свойства. H.influenzae обладает каталазой, окси-дазой, разлагает глюкозу, нуждается в X-, V-факторах. H.ducreyi необладает сахаролитической активностью, нуждается в X-факторе, имеет каталазу и оксидазу. H.aprophilus разлагает все углеводы ко-роткого «пестрого ряда» до кислоты, не нуждается в X- и V-факторах.H.paraprophilus имеет оксидазу, разлагает все углеводы короткого

«пестрого ряда», нуждается в V-факторе для своего роста.Факторы патогенности: капсулы, пили, IgА-протеазы, липополи-

сахаридные, гликопротеиновые факторы и эндотоксин.Патогенез связан с состоянием иммунной системы организма.Возбудители, особенно H.influenzae, могут быть в слизи носоглоткиздоровых людей, но на фоне других заболеваний H.influenzae раз-множается на слизистых оболочках внутри- и внеклеточно, проникаетв кровь, а через гематоэнцфалический барьер в мозговые оболочки,

что приводит к менингиту.Иммунитет после заболевания гуморальный, стойкий; естествен-ный пассивный иммунитет от матери сохраняется 3-6 месяцев.

Лабораторная диагностика Материал зависит от формы заболевания, чаще исследуют спин-номозговую жидкость, мокроту, кровь или мочу.

Бактериоскопический метод носит ориентировочный характер, выявляют грамотрицательные полиморфные бактерии, чаще с капсу-

лами.Бактериологический метод. Делают посев на среды с кровью.Идентификацию проводят по культуральным, биохимическим и анти-генным свойствам с использованием специфических монорецептор-ных сывороток.Для выявления антигенов в исследуемом материале используютРИФ, ИФА, РПГА с антительным диагностикумом, ВИЭФ. Парал-лельно проверяют потребность в X и V-факторах. Исследуемую куль-туру сеют сплошным газоном на плотную питательную среду. На по-

сев накладывают два бумажных диска, смоченных, соответственно Xи V-факторами. Если рост выявляется вокруг дисков, то подтвержда-

ют зависимость культуры от этих факторов.Можно использовать тест сателлитных культур. На чашку с по-севом культуры на кровяном агаре наносят в нескольких местах куль-туру S.aureus, за счет выделяемого ими гемолизина вокруг колонийстафилококка наблюдается обильный рост исследуемой культуры.Профилактика специфическая. Вводят химическую вакцину изкапсульных антигенов H.influenzae по эпидемиологическим показаниям. Неспецифическая профилактика – изоляция и лечение больных, дезинфекция в очагах.

Лечение. Применяют антибиотики с учетом чувствительности.Чаще используют ампициллин, рифампицин, эритромицин.

 

Факторы патогенности микобактерий туберкулеза, механизм их действия, патогенез туберкулеза, иммунитет.

Факторы патогенности.

Липидный корд-фактор – гликолипид, является фактором адге-зии, разрушает митохондрии клеток инфицированного организма,

нарушает у них функцию дыхания, тормозит миграцию полиморфно-ядерных лейкоцитов. При культивировании вызывает склеивание ви-

рулентных особей в виде кос, тяжей.Туберкулин (туберкулопротеины) обладает аллергизирующимдействием, вызывает развитие ПЧЗТ.

Гликолипиды наружного слоя клеточной стенки (микозиды) иманнозные рецепторы микобактерий способствуют незавершенному

фагоцитозу.Туберкулостеариновая, фтионовая, миколевая и другие жирныекислоты оказывают токсическое действие на ткани.

Сидерофоры микобактерий конкурируют с фагоцитами за железо– синтезируют железосодержащие ферменты и колонизируют альвео-

лярные макрофаги.

Характеристика заболевания

Источник инфекции – больные люди и больные животные (круп-ный рогатый скот), выделяющие микобактерии.Пути передачи – чаще воздушно-капельный, реже контактный иалиментарный (молоко коров). Заражению способствует постоянныйконтакт, проживание с больным туберкулезом.Патогенез туберкулеза. Ингалированные бактерии фагоцитиру-ются альвеолярными легочными макрофагами и транспортируются врегионарные лимфоузлы. Фагоцитоз носит незавершенный характер.Гликолипиды-микозиды усиливают токсическое действие корд-фактора, поражая мембраны митохондрий, и ингибируя фагосомо-лизосомальное слияние. Корд-фактор тормозит активность поли-морфноядерных фагоцитов.У входных ворот легких в ацинусах развивается первичный аф-фект, идущие от него лимфатические сосуды и регионарные лимфо-узлы воспаляются, формируется первичный комплекс. В ацинусе воз-никает гранулема в виде бугорка. Этому способствует накопление вочаге молочной кислоты, низкое значение рН, высокая концентрацияуглекислого газа. В гранулеме накапливается большое количестволимфоидных, плазматических клеток и фибробластов. В центре гра-нулемы возникают участки творожистого некроза. Здесь располага-ются возбудители, вокруг них эпителиоидные и гигантские клетки.При формировании иммунитета размножение возбудителя замедляет-ся, а потом прекращается, развивается ПЧЗТ. Очаг воспаления зати-

хает, подвергается кальцификации и фиброзу, формируются кальци-наты (очаги Гона). Клинические проявления отсутствуют.рофагов к гамма-интерферону, ослабевает HLA-зависимое представ-ление антигенов, тормозится пролиферация Т-лимфоцитов, активиру-ется система комплемента по альтернативному пути, развивается ге-нерализация инфекционного процесса.Высокая сенсибилизация организма приводит к токсико-аллергическим реакциям. Клинически этот период сопровождаетсякашлем, кровохарканьем, снижением массы тела, потливостью, суб-фебрилитетом.У лиц с иммунодефицитом наблюдается диссиминированный(милиарный) туберкулез – гранулемы развиваются в различных орга-нах.

Клинические формы туберкулеза: - очаговый: поражает отдельные органы (чаще в легких, костной

системе);

- генерализованные формы: милиарный туберкулез, туберкулез-ный менингит, туберкулез мочеполовой системы, кишечника и др. ор-

ганов.

Иммунитет носит нестерильный клеточный характер.Имеютзначение Т-лимфоциты, выделяющие медиаторы, усиливающие фагоцитоз, иммунологическая память. Антитела не ингибируют возбудителя. Развивается инфекционная аллергия ПЧЗТ. Существует высокая естественная резистентность к возбудителютуберкулеза.

 

Лабораторная диагностика туберкулеза. Дифференциация возбудителей туберкулеза, микобактериозов и кислоустойчивых сапрофитов.

Лабораторная диагностика

Материалом для исследования служат мокрота, моча, ликвор, пунктат лимфоузла, биоптаты тканей.Бактериоскопический метод. Окрашивают мазки по Циль-Нильсену, выявляют мелкие красные палочки. При окраске флюорес-центными красителями (аурамином, родамином) микобактерии даютжелто-белое свечение в люминесцентном микроскопе.При малом количестве возбудителя используют методы обога-щения.Гомогенизация – материал обрабатывают щелочью, фибрин приэтом растворяется, а возбудитель высвобождается. Из осадка послецентрифугирования готовят мазки.Флотация – гомогенизированную мокроту обрабатывают ксило-лом или бензолом и тщательно встряхивают. Возбудитель всплываетв силу гидрофобности вместе с пеной. Из нее готовят мазок и окра-шивают по Цилю-Нильсену.Бактериологический метод. Материал обрабатывают серной кис-лотой и засевают на яичные среды.

Для идентификации M. tuberculosis проводят оценку свойств воз-будителя: характер роста – обнаруживают сухие, бородавчатые, кремовые

колонии (R-форма); длительность роста – 12-60 дней; выявляют нали-чие корд-фактора (определяют по методу Прайса – на стекло наносят

исследуемый материал, обрабатывают серной кислотой для уничто-жения кислоточувствительной флоры и погружают препараты в цит-

ратную кровь, через 3-4 дня препараты извлекают, окрашивают поЦиль-Нильсену, при микроскопии видны «косы» палочек, при отсут-

ствии корд-фактора возбудитель располагается аморфно); для мико-бактерий туберкулеза характерен рост только при температуре 37-

380С; они не растут на простых средах и средах с салицилатами; по-ложительный ниациновый тест (среда с хлорамином В желтеет при

накоплении никотиновой кислоты); обладают термолабильной ката-лазой; восстанавливают нитраты в нитриты; выделяют уреазу; к ми-

кобактериям туберкулеза чувствительны морские свинки.Для внутривидовой дифференциации используют фаготипирова-ние штаммов десятью микобактериофагами.Для выявления АГ используют ИФА или РИФ, для генной диа-гностики ставят ПЦР и выявляют генетические маркеры.__Mycobacterium bovis вирулентны в S-форме; колонии кремовые, гладкие; ниациновый тест отрицательный; рост до 40 дней; каталазатермолабильная; выделяют уреазу; не восстанавливают нитраты; росттолько при температуре 37-400С.Mycobacterum africanum – рост 31-40 дней; ниациновый тест по-ложительный; вирулентны в S-форме; каталаза термолабильна; невосстанавливают нитраты; выделяют уреазу. Остальные свойства каку M.tuberculosis.Микобактерии туберкулеза необходимо дифференцировать отатипичных кислотоустойчивых бактерий, вызывающих микобактери-озы.Атипичные кислотоустойчивые бактерии имеют оранжевый пиг-

мент, вирулентны в S-форме, растут на средах с салицилатами, имеюттермостабильную каталазу, рост через 10-20 дней при температуре 22-450С, нет корд-фактора.Кислотоустойчивые сапрофиты M.smegmatis, в отличие отпредыдущих возбудителей, растут на простых средах, длительность258роста 3-4 дня, имеют S-форму, оранжевый пигмент, нет признаковболезнетворности, чувствительны к спирту.

Биопроба применяется при стертых формах. Морским свинкамвнутрикожно втирают исследуемый материал. Через 10-14 дней появ-ляется долго не заживающая язва, и реакция Манту у них становитсяположительной.Метод аллергических проб – реакция Манту с туберкулином.Внутрикожно вводят туберкулин PPD (PPD – очищенный белко-вый дериват). Если организм инфицирован (иммунен), то через 24-48-72 часа наблюдается инфильтрация и гиперемия, т.е. развиваетсяПЧЗТ. У больных туберкулезом диаметр папулы на 6 мм (и более)больше, чем у вакцинированных.Генодиагностика – ПЦР.Серологический метод: для выявления антител используют

РПГА, ИФА.

 

⇐ Предыдущая78910111213141516

Поделиться: