Общая характеристика и методы анализа ЛРС, содержащего кумарины и хромоны, флавоноиды, дубильные вещества

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

Закрепить знание программных вопросов по темам: кумарины, флавоноиды, дубильные вещества; знать гербарий и сырьё этих групп БАВ.

ВОПРОСЫ К КОЛЛОКВИУМУ

Кумарины и хромоны

1. Понятие о кумаринах и хромонах.

2. Классификация кумаринов. Основные группы кумаринов.

3. Распространение кумаринов в растительном мире. Локализация в растениях. Примеры.

4. Физико-химические свойства кумаринов. Выделение из ЛРС.

5. Методы качественного обнаружения кумаринов в сырье.

6. Количественное определение кумаринов в сырье.

7. Пути и способы использования сырья, содержащего кумарины и хромоны.

8. Сбор, сушка и хранение сырья, содержащего кумарины и хромоны.

9. ЛР и ЛРС, содержащие кумарины и хромоны: амми большая и зубная, пастернак, вздутоплодник сибирский, донник лекарственный.

10. Формулы: кумарин, умбеллиферон, псорален, ангелицин, бергаптен, изопимпинеллин, ксантотоксин, келлин.

Флавоноиды

1. Понятие о флавоноидах. Особенности химического строения.

2. Классификация. Физико-химические свойства. Выделение из ЛРС.

3. Распространение в растительном мире, локализация в растениях. Примеры.

4. Сбор, сушка и хранение сырья, содержащего флавоноиды.

5. Методы качественного обнаружения флавоноидов, количественное определение.

6. Применение в медицине. Примеры.

7. ЛР и ЛРС, содержащие флавоноиды: боярышник колючий, боярышник кроваво-красный и др. виды, софора японская, арония черноплодная, бессмертник песчаный, пижма обыкновенная, земляника лесная, горцы: птичий, водяной и почечуйный, стальник полевой, хвощ полевой, шлемник байкальский, василек синий, череда трехраздельная, сушеница топяная, виды фиалки, гинкго двулопастной, лабазник вязолистный, многоколосник морщинистый.

8. Формулы: рутин, кверцетин, гиперозид, кверцитрин, апигенин, нарингенин, цианидин, катехин, лютеолин.

Дубильные вещества

1. Понятие о дубильных веществах (ДВ). Классификация.

2. Физико-химические свойства ДВ. Выделение из ЛРС.

3. Распространение ДВ в растительном мире, локализация в растениях. Примеры.

4. Методы качественного обнаружения ДВ в сырье.

5. Реакции обнаружения гидролизуемых и конденсированных ДВ при их совместном присутствии.

6. Количественное определение ДВ в растениях.

7. Сущность ВЕМ определения ДВ.

8. Особенности накопления ДВ в растениях.

9. Сбор, сушка и хранение сырья, содержащего ДВ. Применение в медицине. Примеры.

 

10. ЛР и ЛРС, содержащие ДВ: скумпия кожевенная, сумах дубильный, бадан толстолистный, дуб обыкновенный, змеевик, кровохлебка, лапчатка прямостоячая, черемуха обыкновенная, черника, ольха серая и клейкая, чай китайский, репешок аптечный, сабельник болотный.

11. Формулы: галловая, эллаговая кислоты, пирогаллол, пирокатехин, танин, лейкоантоцианидин.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

Определение образцов гербария и сырья.

Письменный контроль и индивидуальное собеседование по теме коллоквиума.

ЛИТЕРАТУРА

1. Коноплева М.М. Фармакогнозия. Природные биологически активные вещества – Витебск: ВГМУ, 2002, с. 102-151.

2. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991.

3. Фармакогнозия. / Под ред. проф. Шелюто В.Л., Витебск: ВГМУ, 2003, с. 246-329.

 

ЗАНЯТИЕ № 26

Алкалоиды.

Анализ ЛРС, содержащего алкалоиды

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

Уметь и знать методы выделения, очистки, обнаружения и количественного определения алкалоидов в ЛРС.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Классификация алкалоидов.

2. Распространение алкалоидов в растениях, локализация.

3. Физические и химические свойства алкалоидов.

4. Методы обнаружения алкалоидов в ЛРС (химические реакции, хроматографические методы).

5. Методы выделения алкалоидов из сырья, способы очистки и разделения.

6. Методы количественного определения алкалоидов в ЛРС.

7. Фармакопейный метод количественного определения тропановых алкалоидов в листьях красавки.

8. Пути использования сырья, содержащего алкалоиды.

ЛИТЕРАТУРА

1. ГФ СССР, ХI изд., Вып. 2. М., 1990: ст. 13. Листья красавки.

2. Коноплева М.М. Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества. – Витебск: ВГМУ, 2002.

3. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991, с. 301-311.

4. Фармакогнозия. /Под. ред. проф. Шелюто В.Л., Витебск: ВГМУ, 2003.

5. Химический анализ лекарственных растений. Под ред. Гринкевич Н.И. М., 1983, с. 122-170.

6. Шелюто В.Л. " Лекарственные растения Беларуси." Справочник.- Витебск, ВГМУ, 2003.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

ЛРС, содержащее АЛКАЛОИДЫ, ЯДОВИТО!

Задание 1. Провести качественные реакции обнаружения алкалоидов в ЛРС: листья красавки, трава красавки, корни красавки, листья белены, листья дурмана.

1) Экстракция алкалоидов из ЛРС: 1, 0 измельченного ЛРС поместить в колбу вместимостью 30 мл, прилить 10 мл 1% р-ра HCl и нагреть на ки­пящей водяной бане в течение 5 мин. После охлаждения извлечение профильтровать в пробирку.

2) Реакция осаждения алкалоидов: на предметное стекло с помощью стеклянной палочки нанести 2 капли полученного извлечения и рядом каплю реактива. При слиянии капель ре­актива и извлечения наблюдать появление мути или осадка. Отметить наличие и цвет осадка.

Провести качественные реакции со следующими реактивами:

1. Реактив Бушарда (KI * I₂);

2. Реактив Драгендорфа (KI * BiI₃);

3. Раствор танина 10%;

4. Раствор кремневольфрамовой кислоты 1%;

5. Раствор фосфорномолибденовой кислоты 1%;

6. Раствор пикриновой кислоты.

Задание 2. Провести количественное определение алкалоидов группы тропана в ЛРС методом нейтрализации. ( ГФ ХI, вып. 2, листья красавки ст. 13).

1) Подготовка ЛРС для анализа (измельчение, просеивание, взятие навески.

2) Экстракция алкалоидов в виде оснований.

5 г измельченного растительного материала (листьев, корней или корневищ), проходящего сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм, помеща­ют в склянку с притертой пробкой, приливают 3, 5 мл концентрированного р-ра аммиака, 75 мл хлороформа и энергично взбалтывают. Залитый экс­трагентом растительный материал оставляют на ночь.

Хлороформенный экстракт быстро фильтруют через вату в делительную воронку емкостью 200 мл. К фильтрату прибавляют 5 мл воды, энергично взбалтывают и оставляют в покое до просветления хлороформенного (нижнего) слоя. Мерным цилиндром отмеривают 50 мл хлороформного извлечения, которое переносят в делительную воронку. Цилиндр дважды ополаскивают хлороформом порциями по 5 мл, которые присоединяют к отмеренному хлороформному извлечению.

3) Очистка:

· Перевод алкалоидов оснований в соли.

Из хлороформного извлечения алкалоиды последовательно извлекают 10, 7, и 5 мл 1% р-ра соляной кислоты (pH водного слоя 2-3) до полного их извлечения (проба с реактивом Майера), каждый раз фильтруя через смоченный водой фильтр в колбу емкостью 100 мл. Фильтр промывают дважды 1% р-ром соляной кислоты по 5 мл, присоединяя промывную жидкость к общему кислотному извлечению.

· Перевод алкалоидов солей в основания.

Кислотное извлечение из колбы количественно переносят в делительную воронку, подщелачивают р-ром аммиака до щелочной реакции по фенолфталеину и алкалоиды извлекают последовательно 10, 7, 5 мл хлороформа. Каждую порцию хлороформного извлечения фильтруют через бумажный фильтр, на который предварительно помещают 3-4 г безводного сульфата натрия, смоченного хлороформом. Фильтрование производят в сухую колбу емкостью 100 мл. Хлороформ отгоняют на водяной бане досуха (до полного исчезновения запаха хлороформа).

4) Количественное определение.

Сухой остаток (очищенная сумма алкалоидов-оснований) растворяют в 15 мл 0, 02н раствора соляной кислоты при подогревании на водяной бане и оттитровывают избыток последней 0, 02 н р-ром NаОН до появления желтой окраски (индикатор метиловый красный).

Расчет содержания алкалоидов по формуле:

 

(15 - V) * 0, 005780 * 100 * 100, где

Х = -------------------------------

V₁ * (100 - W)

V - объем 0, 02 н р-ра едкого натра, пошедшего на титрование, в мл;

V₁ - навеска, высчитанная по отмеренному объему хлороформного извлечения, в граммах;

W - влажность, в %;

0, 005780 -количество алкалоидов в пересчете на гиосциамин, соответствующее 1 мл раствора НCl (0, 02 моль\л)

На основании проведенного анализа дать заключение о соответствии исследуемого образца сырья требованиям НД по содержанию алкалоидов.

Результаты фитохимического анализа оформить в виде протокола.

Задание 3. Провести обнаружение алкалоидов в ЛРС методом хроматографии в тонком слое.

1) Приготовить извлечение из ЛРС (корни барбариса, трава маклеи, листья белладонны, корневища скополии, трава чистотела, трава мачка): 0, 5 измельченного сырья поместить в пробирку, добавить 2-5 мл этанола, нагреть на водяной бане до кипения и настоять в течение 10-15 минут.

2) На стартовую линию пластинки " Силуфол" нанести капилляром извлечение и свидетели (р-ры алкалоидов берберина, гиосциамина, суммы сангвинарина и хелеритрина) в виде точки или полоски длиной 1-1, 5 см.

3) Поместить хроматограмму в камеру с системой растворителей: ТОЛУОЛ: АЦЕТОН: ЭТАНОЛ: NН₄ОН (10: 10: 2: 0, 5). После прохождения системы растворителей на расстояние 10-12 см хроматограмму достать, высушить под тягой.

4) Наблюдать окраску зон сорбции алкалоидов в видимом свете, в УФ-свете, затем хроматограмму обработать модифицированным реактивом Драгендорфа. Отметить пятна алкалоидов (оранжевого цвета на желтом фоне), рассчитать значение Rf для каждого пятна.

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

 

ЗАНЯТИЕ № 27

Алкалоиды с азотом в боковой цепи, производные пирролизидина, тропана и хинолизидина, стероидные алкалоиды. ЛР и ЛРС, содержащие алкалоиды с азотом в боковой цепи, производные пирролизидина, тропана и хинолизидина, стероидные алкалоиды.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Уметь:

· определять ЛР по внешним признакам на гербарных образцах и отличать от возможных примесей;

· определять подлинность сырья макро- и микроскопическим методами и давать заключение о качестве сырья с использованием НД.

2. Знать: латинские названия, географическое распространение, условия местообитания, районы культуры; сроки, приемы сбора, сушки и хранения ЛРС; химический состав, действующие вещества, их формулы; медицинское применение ЛРС и препаратов, содержащих алкалоиды.

ИЗУЧАЕМЫЕ ОБЪЕКТЫ: эфедра хвощевая, э.средняя, красный перец, безвременник великолепный, крестовник плосколистный, красавка обыкновенная, белена черная, дурман обыкновенный, д.индейский, термопсис ланцетный, т. очередноцветковый, чемерица Лобеля, паслен дольчатый.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Определение понятия алкалоиды.

2. Классификация ЛРС, содержащего алкалоиды.

3. Русские и латинские названия ЛРС, производящих растений и семейств всех изучаемых объектов.

4. Морфологическая характеристика ЛР, ареал их произрастания, места обитания, районы возделывания.

5. Сроки и рациональные приемы заготовки, сушки и хранения ЛРС.

6. Характеристика внешних признаков ЛРС.

7. Химический состав. Формулы: эфедрин, платифиллин, гиосциамин, скополамин, цитизин, пахикарпин, соласодин.

8. Пути использования и применение в медицине ЛРС, содержащего алкалоиды.

ЛИТЕРАТУРА

1. ГФ РБ. - Молодечно: Типография «Победа», 2008, т.2, с. 310, 312, 339.

2. ГФ РБ. - Молодечно: Типография «Победа», 2009, т.3, с. 713.

3. ГОСТ 14260-69. Плод стручкового перца.

4. ГФ СССР, ХI изд., Вып. 2. М., 1990, ст.13, 17, 24, 59.

5. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М., 1977, с. 177-192, 199-200, 206-211.

6. Коноплева М.М. Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества. – Витебск: ВГМУ, 2002, с. 151-179.

7. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991, с. 301-348, 394-399.

8. Правила сбора и сушки лекарственных растений. М., 1985, с. 38-43, 130-133, 138-140, 238-240, 250-255, 280-281.

9. Фармакогнозия. Атлас под ред. Н.И. Гринкевич. М., 1989, с.187-206, 208-219, 256-269.

10. Фармакогнозия. /Под. ред. проф. Шелюто В.Л., Витебск: ВГМУ, 2003, с. 330-375.

11. Шелюто В.Л. Лекарственные растения Беларуси. Справочник.- Витебск, ВГМУ, 2003.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

ЛРС, содержащее АЛКАЛОИДЫ, ЯДОВИТО! ВКУС НЕ ОПРЕДЕЛЯТЬ!

Задание 1. Определить подлинность листьев красавки.

1) Провести макроскопический анализ листьев. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ. Приготовить поверхностный микропрепарат листа, рассмотреть при малом и большом увеличениях, зарисовать и указать диагностические признаки.

3) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ. Дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним признакам.

Задание 2. Определить подлинность листьев белены.

1) Провести макроскопический анализ листьев. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ. Приготовить поверхностный микропрепарат листа, рассмотреть при малом и большом увеличениях, зарисовать и указать анатомические диагностические признаки.

3) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ ХI. Дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним признакам.

Задание 3. Определить подлинность листьев дурмана.

1) Провести макроскопический анализ листьев. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ. Приготовить поверхностный микропрепарат листа, рассмотреть при малом и большом увеличениях, зарисовать и указать диагностические признаки.

3) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ XI. Дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним признакам.

Задание 4. Определить подлинность травы термопсиса ланцетного.

1) Провести макроскопический анализ травы. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ. Приготовить поверхностный препарат листа, рассмотреть при малом и большом увеличениях, зарисовать и указать диагностические признаки.

3) Сравнить результаты анализа с требованиями ГФ ХI и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним признакам.

Задание 5. Изучить внешний вид ЛР по гербарным образцам и диагностические признаки ЛРС: трава эфедры, плоды перца, трава крестовника плосколистного, трава, листья, корни красавки, плоды и семена дурмана индейского, листья дурмана обыкновенного, листья белены черной, клубнелуковицы безвременника, трава и семена термопсиса ланцетного, трава термопсиса очередноцветкового, трава паслена дольчатого, корневища с корнями чемерицы.

 

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

 

ЗАНЯТИЕ № 28

⇐ Предыдущая567891011121314Следующая ⇒

Поделиться: