Архитектура Аудит Военная наука Иностранные языки Медицина Металлургия Метрология
Образование Политология Производство Психология Стандартизация Технологии


Сердечные гликозиды. Анализ ЛРС,



Содержащего сердечные гликозиды

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

Уметь выделять, проводить очистку и анализ сердечных гликозидов в ЛРС.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Особенности химической структуры сердечных гликозидов и их классификация.

2. Связь химического строения сердечных гликозидов с их биологической активностью.

3. Физико-химические свойства сердечных гликозидов.

4. Распространение сердечных гликозидов в растительном мире.

5. Особенности заготовки, сушки, хранения ЛРС, содержащего сердечные гликозиды.

6. Методы выделения сердечных гликозидов из ЛРС и способы их очистки.

7. Качественные реакции обнаружения сердечных гликозидов и их специфичность.

8. Методы хроматографического анализа сердечных гликозидов.

9. Биологические методы стандартизации ЛРС. Понятие " ВАЛОР".

10. Физико-химические методы количественного определения сердечных гликозидов в растительном сырье.

11. Пути и способы использования сырья, содержащего сердечные гликозиды.

ЛИТЕРАТУРА

1. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991, с. 224-249.

2. Химический анализ лекарственных растений. Под ред. Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н., М.1983, с. 27-41.

3. ГФ СССР, ХI изд., Вып. 2. М., 1990, ст. 14, 43, 49.

4. Фармакогнозия /Под ред. проф. В.Л. Шелюто - Витебск: ВГМУ, 2003, с. 160 -170.

5. Коноплёва М.М. Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества. - Витебск: ВГМУ, 2002, с. 66– 77.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Провести количественное определение сердечных гликозидов фотоэлектроколориметрическим методом.

1) Подготовка ЛРС: сырье измельчить, просеять сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм и взять точную навеску (около 1, 5 г), поместить в плоскодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прилить 30 мл 96% этанола, перемешать, закрыть пробкой и оставить на 18-20 часов в темном месте.

2) Фильтрация и очистка. Полученный спиртовой экстракт отфильтровать через бумажный фильтр в мерный цилиндр с притертой пробкой, отбрасывая первые 20 капель фильтрата. Замерить полученный объем (фильтрат А). К фильтрату А прилить равный объем дистиллированной воды, внести около 15 г Al2О3, закрыть пробкой, встряхивать в течение 2-3 минут и профильтровать через сухой бумажный фильтр (отбрасывая первые 20 капель фильтрата) в сухую колбу (фильтрат Б).

3) Получение окрашенного комплекса сердечных гликозидов.3 мл фильтрата Б перенести в сухую пробирку. Прилить 5 мл воды, 1 мл 1% спиртового р-ра пикриновой к-ты, 1 мл 5% р-ра NаОН и тщательно перемешать. Параллельно приготовить контрольный р-р, состоящий из 14 мл воды, 2 мл 50% этанола, 2 мл 1% спиртового р-ра пикриновой к-ты и 2 мл 5% р-ра NаОН. Оба раствора (исследуемый и контрольный) выдержать в темном месте в течение 10 мин.

4) Определение оптической плотности исследуемого р-ра на фоне контрольного р-ра на ФЭКе в кювете толщиной 2 см (зеленый светофильтр). Используя полученное значение оптической плотности исследуемого р-ра, по калибровочному графику найти содержание суммы сердечных гликозидов в 1 мл исследуемого р-ра (С).

Процентное содержание суммы сердечных гликозидов Х вычисляют по формуле:

С * У4 * (У4 + У2)* У

Х % = ----------------------------------, где

m * У3 * У1 * 100 (100-W)

m - навеска растительного материала, г.;

С - концентрация сердечных гликозидов (мкг\мл), найденная по калибровочному графику;

У - объем экстрагента для экстракции суммы сердечных гликозидов (30 мл);

У1 -объем фильтрата А, взятый на определение, мл;

У2 - объем воды, взятый для разбавления фильтрата А, мл;

У3 - объем фильтрата, взятый для колориметрирования (3 мл);

У4 - общий объем колориметрируемого р-ра (10 мл);

W - влажность растительного материала - 10% (условно).

На основании проведенного анализа сделать заключение о содержании сердечных гликозидов в исследуемом сырье.

Задание 2. Провести качественные реакции обнаружения сердечных гликозидов в ЛРС.

Оставшийся после количественного определения фильтрат Б перенести в выпарительную чашку, выпарить на водяной бане досуха. Сухой остаток растворить в 3, 5 мл 70% этанола и провести качественные реакции.

1) реакции на пятичленное лактонное кольцо

Реакция Легаля

К 0, 5 мл извлечения прибавить равный объем 10 % р-ра NаОН и перемешать. Осторожно прибавить по стенке пробирки 3 капли 5% р-ра нитропруссида натрия. На границе р-ров появляется оранжево-красное окрашивание в виде кольца.

Реакция Балье

К 0, 5 мл извлечения добавить 0, 5 мл 10% р-ра NаОН и 5 капель 2, 5 % спиртового р-ра пикриновой кислоты. Образуется оранжевое окрашивание.

Реакция Кедде

К 0, 5 мл извлечения добавить 8 капель 10% р-ра NаОН и столько же 2% спиртового раствора 3, 5-динитробензойной кислоты. Образуется красно-фиолетовое окрашивание.

2) реакция на дезоксисахара

Реакция Келлер-Килиани

(проводить с «Адонизидом» или с извлечением из травы желтушника)

К 0, 5 мл " Адонизида" прибавить равный объем ледяной уксусной кислоты со следами железа. Осторожно по стенке пробирки наслаивать 0, 5 мл конц. серной кислоты со следами железа. На границе слоев появляется бурое кольцо и верхний слой постепенно окрашивается в голубой или синий цвет.

3) реакция на стероидную структуру

Реакция Либермана-Бурхарда

0, 5 мл извлечения выпарить в пробирке досуха. К остатку прилить 0, 5 мл уксусного ангидрида и осторожно! по стенке пробирки наслаивать 0, 5 мл конц. серной кислоты. Появляется розовое кольцо на границе слоев.

В. Итоговый контроль:

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

ЗАНЯТИЕ № 13

Сердечные гликозиды. ЛР и ЛРС,

Содержащие сердечные гликозиды

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Уметь:

· определять ЛР по внешним признакам на гербарных образцах и отличать их от возможных примесей.

· определять подлинность ЛРС макро-, микро скопическим и качественными химическими методами анализа и давать заключение о качестве сырья с использованием НД.

2. Знать: латинские названия, географическое распространение, условия местообитания, районы культуры; сроки, приемы сбора, сушки и хранения ЛРС; химический состав, формулы действующих веществ; медицинское применение ЛРС и препаратов, содержащих сердечные гликозиды.

ОБЪЕКТЫ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ: наперстянка пурпуровая, н. крупноцветковая, н. шерстистая, строфант Комбе, горицвет весенний, ландыш майский, желтушник раскидистый.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Определение понятие «сердечные гликозиды».

2. Латинские и русские названия ЛРС, производящих растений и семейств всех объектов изучаемой темы.

3. Морфологическая характеристика растений, их ареалы, районы возделывания и места обитания.

4. Сроки, рациональные приемы заготовки, первичной обработки, сушки и хранения ЛРС.

5. Внешние признаки ЛРС.

6. Диагностические микроскопические признаки листьев наперстянки пурпурной, листьев ландыша.

7. Химический состав, формулы: пурпуреагликозиды А и В, лантозиды А, В, С; дигитоксигенин, К-строфантозид, К-строфантин-β, цимарин, адонитоксин, конваллотоксин.

8. Пути использования ЛРС, содержащего сердечные гликозиды.

9. Препараты и применение.

ЛИТЕРАТУРА

1. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991, с. 226-251.

2. Фармакогнозия. Атлас. Под ред. Гринкевич Н.И. Ладыгина Е.Я. М., 1989, с. 270-294.

3. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М. 1977, с. 90-95, 109-118.

4. ГФ РБ. - Молодечно: Типография «Победа», 2008, т.2, с.334, 363, 364, 365, 383.

5. ГФ СССР, ХI изд., Вып. 2., М., 1990, ст. 14, 43, 49.

6. ФС 42-614-89. Листья наперстянки шерстистой.

7. ФС 42-1566-80. Трава желтушника раскидистого свежая.

8. Коноплёва М.М. Фармакогнозия. Природные биологически активные вещества. Витебск; ВГМУ, 2002, с.66-77.

9. Фармакогнозия. /Под ред. проф. В.Л. Шелюто - Витебск: ВГМУ, 2003, с. 160 - 174.

10. Шелюто В.Л. " Лекарственные растения Беларуси." Справочник. -Витебск, ВГМУ, 2003.

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ

А. Проверка готовности к занятию (тестовый контроль).

Б. Выполнение лабораторной работы.

Задание 1. Определить подлинность листьев наперстянки пурпурной.

1) Провести макроскопический анализ листа. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ листа. Приготовить поверхностный препарат листа, изучить его при малом и большом увеличениях, зарисовать и обозначить диагностические признаки.

3) Сравнить результаты с ГФ ХI и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним и микроскопическим признакам.

Задание 2. Определить подлинность листьев ландыша.

1) Провести макроскопический анализ листа. Выделить диагностические признаки.

2) Провести микроскопический анализ листа ландыша. Приготовить поверхностный препарат листа, изучить его при малом и большом увеличениях, зарисовать и обозначить диагностические признаки.

3) Сравнить результаты анализа с ГФ ХI и дать заключение о подлинности и качестве сырья по внешним и микроскопическим признакам.

Задание 3. Определить подлинность неизвестного порошка ЛРС.

1) Изучить внешние признаки порошка. Вкус не определять!

2) Приготовить микропрепарат порошка и рассмотреть его.

3) Пользуясь определителем, установить принадлежность порошка к какому-либо ЛРС или примесям к нему.

Задание 4. Изучить внешний вид ЛР по гербарным образцам и диагностические признаки ЛРС: листья наперстянки крупноцветковой, наперстянки шерстистой, трава горицвета весеннего и желтушника раскидистого; трава и цветки ландыша майского.

Изучить внешний вид по гербарным образцам возможных примесей к ландышу майскому (купена лекарственная и грушанка круглолистная).

В. Итоговый контроль.

Протокол занятия представить преподавателю на проверку и подпись. Ответить на предложенные вопросы по теме занятия.

ЗАНЯТИЕ № 14


Поделиться:



Последнее изменение этой страницы: 2017-03-14; Просмотров: 1265; Нарушение авторского права страницы


lektsia.com 2007 - 2024 год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! (0.038 с.)
Главная | Случайная страница | Обратная связь