ЗАНЯТИЕ 25. Обмен сложных белков. Метаболизм нуклеотидов и гема.

 

Цель занятия: Изучить метаболизм нуклеотидов и гема. Знать основные биохимические показатели, характеризующие состояние обмена; их значение, свойственные физиологической норме, и уметь сделать предположение о характере нарушений в обменных процессах.

 

Студент должен знать:

1. Функции нуклеотидов и их производные в организме.

2. Возможные источники нуклеотидов в организме.

3. Биосинтез пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Источники биосинтеза. Роль витаминов Вс и В12. Понятие «оротацидурия».

4. Катаболизм пиримидиновых и пуриновых нуклеотидов. Нарушения обмена. Понятие «гиперурикемии

5. Источники гема в организме. Функции гемоглобина.

6. Синтез гема и глобина. Нарушения: гемоглобинопатии, порфирии

7. Катаболизм гема. Образование и виды билирубина. Общие представления о желтухе и ее видах.

8. Диагностическое значение определения желчных пигментов в крови и моче.

Студент должен уметь:

1. Изобразить структурными формулами процесс образования мочевой кислоты. Указать на схеме ключевой фермент.

2. Составить схему биосинтеза пиримидиновых нуклеотидов. Уяснить причину оратацидурии.

3. Составить таблицу: Клинико-биохимическая характеристика желтух.

4. Количественно определить содержание общего билирубина, свободного связанного в сыворотке крови. Интерпретировать полученные результаты.

5. Качественно определить содержание мочевой кислоты.

6. Определение понятия « остаточный азот». Содержание в крови.

Студент должен получить представление:

1. О патологических состояниях, сопровождающихся нарушением метаболизма пуриновых и пиримидиновых оснований,

2. О патологических процессах, ведущих к билирубинемии.

Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:

1. Строение сложных белков (нуклеопротеинов, хромопротеинов).

2. Дыхательная функция крови.

Задания для самоподготовки:

Изучите материал темы в соответствии с целевыми вопросами («студент должен знать») и письменно выполните следующие задания:

1. Перечислить нуклеотиды, содержащие пуриновое основание. Дайте полное название, запишите принятые аббревиатуры. Изучите химическую структуру. Укажите значение в организме.

2. Изучите по учебнику последовательность синтеза пуриновых нуклеотидов. На структурной формуле пуринового нуклеотида укажите источники его элементов. Уясните значение фолиевой кислоты (витамин Вс) в синтезе.

3. Запишите структурными формулами катаболизм пуринового нуклеотида.

Укажите на схеме ключевой фермент. Назовите конечный продукт процесса.

Объясните причину (исходя из физико-химических свойств) отложения мочевой кислоты в виде кристаллов в тканях.

4. Дайте определение понятия «гиперурикемия». Возможные ее причины?. Обратите внимание, что основной препарат, используемый для лечения гиперурикемии – аллопуринол- структурный аналог пурина, является конкурентным ингибитором ксантиноксидазы. При этом продукты катаболизма пуринов выделяются в виде гипоксантина, растворимость которого выше, чем мочевой кислоты.

5. Перечислить нуклеотиды, содержащие пиримидиновое основание. Дайте полное название, запишите принятые аббревиатуры. Изучите химическую структуру. Укажите значение в организме.

6. Напишите схему синтеза пиримидиновых нуклеотидов (структурными формулами). Обратите внимание на место в синтезе оротовой кислоты. Уясните, что при нарушении превращения оротата в УМФ (оротацидурия) с мочой выделяется оротовой кислоты в 1000 раз больше, чем в норме, и развивается недостаточность пиримидиновых нуклеотидов –«пиримидиновый голод».

7. На предыдущей схеме укажите синтез ТМФ из УМФ. Укажите фермент катализирующий процесс и роль витамина Вс ( фолиевой кислоты).

Уясните, что многие лекарственные препараты, используемые в химиотерапии опухолей являются структурными аналогами пиримидинов и фолиевой кислоты (например, соответственно 5-фторурацил, метотрексат).Они блокируют ( соответственно) тимидилатсинтазу и дигидрофолатредуктазу – фермент, способствующий использование фолиевой кислоты в синтезе пуринов ТМФ.

8. Проверьте свои знания: Аналоги фолиевой кислоты являются мощными ингибиторами пролиферации, так как:

А. Являются конкурентными ингибиторами дигидрофолатредуктазы;

Б. Нарушают синтез пуринового кольца;

В. Ингибируют превращение УМФ в ТМФ;

Г. Снижают образование АМФ и ГМФ из ИМФ;

Д. Нарушает превращение УМФ в ЦМФ.

9. Запишите схемы катаболизма пиримидиновых нуклеотидов (по образцу:

нуклеотид - конечный продукт – дальнейшая судьба конечного продукта).

10. Назовите сложные белки организма, в состав которых в качестве простетической группы входит гем.

11. Напишите схему переваривания гемпротеидов. Уясните, что гем, входящий в состав пищевых продуктов не является незаменимым фактором и не используется для синтеза гемпротеидов.

12. Дайте определение понятий «гемоглобинопатии» и «талассемии». Возможные их причины.

13. Запишите и выучите схему синтеза гема. Укажите регуляторный фермент синтеза и его эффектор

14. Запишите и выучите схему катаболизма гема до конечных продуктов, выводимых из организма.Укажите локализацию этапов.

15. Запомнимте концентрацию общего билирубина в крови здорового человека.

16. Составьте таблицу: Клинико-биохимическая характеристика желтух

Биохимический показатель	желтухи
Надпеченочная (гемолитическая)	печеночная	Подпеченочная (механическая, обтурационная)
Общий билирубин
Связанный билирубин
Свободный билирубин
Билирубин мочи
Уробилин мочи
Стеркобилин кала

При заполнении таблицы используйте символы «снижено», «повышено», «неизменено»

Сравните свои ответы с таблицей в учебнике « Биохимия для врача» с.259. Выясните причину Ваших ошибок.

Аудиторная работа

Лабораторная работа: Качественное определение мочевой кислоты

1. М урексидная проба. Химизм: продукты окисления и гидратации мочевой кислоты, образующиеся при нагревании с концентрированной азотной кислотой в присутствии аммиака образуют аммонийную соль пурпурной кислоты – мурексид, отличающийся пурпурно-красным цветом.

Ход работы. Порошок мочевой кислоты (с булавочную головку) поместить на дно фарфоровой чашки, прилить 1-2 капли концентрированной HNO₃ и ос­торожно (! ) нагреть (не выше 70˚ С), сдувая образующиеся пары низших окислов азота. После охлаждения рядом с коричнево-красным осадком (продукты окисления и гидратации) нанести с одной стороны каплю раствора аммиака – появляется пурпурно-красное окрашивание (образование мурексида), с другой стороны на осадок нанести 1 каплю 10% раствора едкого натра - появляется фиолетовое окрашивание.

2. Определение билирубина в сыворотке крови по Иендрашику. М етод основан на образовании характерного окрашивания при взаимодействии связанного (прямого) билирубина с диазореактивом. Для определения общего билирубина (связанный + свободный, который, образуя комплекс с белками, не открывается прямой реакцией) необходимо предварительно разрушить связь непрямого (свободного) билирубина с белками с помощью кофеинового реактива. Определив общий билирубин и прямой билирубин, можно по разнице рассчитать содержание свободного билирубина.

В норме концентрация свободного (непрямого) билирубина в сыворотке крови составляет 0, 5 – 1, 0 мг% (1, 7 -17 мкмоль/л). В крови здорового организма до 75% от общего количества билирубин находится в форме непрямого.

Ход работы. В три пробирки отмерить указанные ниже в таблице реактивы:

 

Реактивы	Пробирки, мл
первая	вторая	третья
Сыворотка	1, 0	1, 0	1, 0
Кофеиновый реактив	З, 5	3, 5	-
Диазореактив	0, 5	-	0, 5
Раствор хлорида натрия 0, 14 н	-	0, 5	3, 5
Что определяется	Общий билирубин	Контроль	Связанный билирубин

 

Через 10 мин колориметрировать против контроля (проба 2) в кювете с толщиной рабочего слоя = 10 мм (фильтр зеленый)

Расчет: [С] = 6, 34 · m, где С – концентрация, мг %, m – экстинкция. Интерпретировать полученные результаты.

Самостоятельно решить задачи, ответить на вопросы:

⇐ Предыдущая1234567Следующая ⇒

Поделиться: