Слюноотделение на различные раздражители.

Слюноотделение на различные раздражители.

Опыт 1. Слюноотделение у собак на кормовые и отвергаемые вещества.

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: Собака с выведенными протоками слюнных желез, пробирка или соска для сбора слюны, слюнная воронка, градуированный цилиндрик, штатив с пробирками, секундомер, электроплитка, ножницы, Менделеевская замазка, вата. Хлеб, хлеб влажный, сухари, мясо, 0, 2% HCL.

Опыт проводится на собаке с выведенным протоком слюнной железы, после 15-18 часового голодания животного.

ХОД РАБОТЫ: Животное фиксируют в станке и прикрепляют воронку к щеке в месте выведенного протока. Вначале проводят поддразнивание кормом в течение 2 минут (обеспечивают животному возможность видеть и обонять корм) и наблюдают за выделением слюны.

Затем животному скармливают различные корма и дают отвергаемое вещество (табл.).

№ п/п	Вид кормового раздражителя	Вес, г	Количество выделившейся слюны, мл
	Сухари
	Хлеб обыкновенный
	Хлеб влажный
	Мясо		4-5
	Отвергаемое вещество0, 2% р-р HCl	по 5 мл с интервалами 30 сек

При этом учитывают количество выделяемой слюны на каждый раздражитель. Слюна собирается в течение 2 минут. Очередной раздражитель дается после того, как прекратится слюноотделение на предыдущий.

Выводы: сделать заключение о механизме и особенностях выделения слюны на различные раздражители.

Зарисовать рефлекторную дугу слюновыделительного процесса.

Тема

Ферментативная активсность слюны

Опыт 1. Ферменты слюны и условия ферментативного расщепления.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Обнаружение ферментов слюны, исследование глубины расщепления перевариваемого субстрата под влиянием ферментов и выяснение условий, необходимых для оптимального действия ферментов.

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: слюна человека, слюна собаки, 1% крахмальный клейстер, р-р Люголя, 0, 5% р-р НСl, спиртовка, штатив с пробирками, дистилированная вода, стаканы со льдом, водяная баня, карандаш по стеклу, термометр, пипетки на 5 и 10 мл, глазные пипетки, спички, резинки.

ХОД РАБОТЫ. Приготовить и пронумеровать 5 пробирок. Затем налить в 1-ю пробирку – 3 мл слюны человека + 3 мл 0, 5% р-ра НС1 + 5 мл крахмального клейстера. Во 2-ю – 3 мл прокипяченной слюны человека + 5 мл крахмального клейстера. В 5-ю – 3 мл слюны собаки + 5 мл крахмального клейстера. После этого 1, 2 и 5-ю пробирки поставить в водяную баню при температуре 37-40° С.

В 4-ю пробирку налить 3 мл слюны человека и в отдельную пробирку 5 мл крахмального клейстера, поставить на лед, а после охлаждения смешать. В 3-ю пробирку добавить 5 мл крахмального клейстера, содержимое перемешать, а затем через каждую минуту отливать немного содержимого в отдельные пробирки и добавлять по 1-3 капли р-ра Люголя. При наличии крахмала жидкость окрашивается в синий цвет. Пробы разных порций будут давать лиловое, красное и, наконец, слегка желтоватое окрашивание – конец реакции. Затем к содержимому 1-й, 2-й, 4-й и 5-й пробирки добавить по 2-3 капли р-ра Люголя. Синий цвет указывает на наличие амилодекстрина, красный – эритродекстрина. Отсутствие красного цвета указывает на наличие ахродекстрина, мальтозы и глюкозы.

Выводы:

В 1-й пробирке – расщепления не было, так как добавляли соляную кислоту.

Во 2-й пробирке – расщепления не было, так как была проведена термическая обработка.

В 4-й пробирке – расщепления не было, так как содержимое (слюна и крахмальный клейстер) охладили.

В 5-й пробирке – расщепления не было, так как в слюне собаки нет амилазы, расщепляющей углеводы (крахмал).

Тема

Ферменты и соляная кислота желудочного сока

Опыт 1. Определение кислотности желудочного сока.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Ознакомить с формами выражения кислотности желудочного сока и овладеть методикой определения кислотности.

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: Желудочный сок, 0, 5%-ный спиртовой раствор диметиламидоазобензола, 1% фенолфталеина, 0, 1 н раствор едкого натра, химические стаканчики, бюретки для титрования, пипетки на 5 мл и глазные пипетки.

ХОД РАБОТЫ. В колбу отмеряют 5 мл желудочного сока добавить 2-3 капли диметиламидоазобензола и 1-2 капли фенолфталеина. Жидкость приобретает красный цвет. Затем проводят титрование 0, 1 н раствором едкого натра. Цвет жидкости изменяется, сначала он становится желто-розовый, далее желтый и наконец, приобретает стойкий розовый оттенок.

Количество 0, 1 н р-р NaOH, пошедшего на титрование до желто-розового цвета соответствует свободной HCl.

Количество 0, 1 н р-р NaOH, пошедшего на титрование от желто-розового цвета до стойкого розового цвета соответствует связанной HCl и кислореагирующими продуктами.

Количество 0, 1 н р-р NaOH, пошедшего от начала титрование до стойкого розового цвета будет соответствовать общей кислотности желудочного сока.

Известно, что 1 мл 0, 1 н р-ра щелочи нейтрализует 1 мл 0, 1 н р-ра соляной кислоты. Он содержит 0, 00365 г соляной кислоты.

Следовательно, процент свободной соляной кислоты узнают умножением числа мл 0, 1 н в 100 мл NaOH, пошедший на нейтрализацию соляной кислоты в 100 мл желудочного сока на показатель 0, 00365.

Примерный расчет

Кол-во	Индикатор	До цвета	Нейтрализация кислот	Расход 0, 1 н р-р NaOH мл	Свободн. HCl в жел.соке в %
На5 мл жел.сока	На 100 мл жел.сока
5 мл	Диаметиламидоазобензол	Желто-розового	Свободная HCl	5, 2	104, 0	0, 3796
	Фенолфталеин	Стойко-розового	Связанная HCl и кислореагирующие продукты	0, 3	6, 0
			Общая кислотность	5, 5	110, 0

Опыт 2. Определение протеолитической активности желудочного сока.

ЦЕЛЬ ОПЫТА.Освоить методику определения протеолитической активности желудочного сока и выяснить условия оптимального действия ферментов.

ПРИБОРЫ И МАТЕРИАЛЫ: штативы с пробирками, пипетки, водяная баня с термометром, спиртовка, вата.

РЕАКТИВЫ: желудочный сок, 0, 25%-й раствор НCl, 2%-й раствор соды, куриный белок, 10%-й раствор NaOH, 1%-й раствор сернокислой меди.

Для работы желудочный сок берут либо натуральный, либо готовят искусственный. Для этого 2 г пепсина растворяют в 100 мл 0, 25%-го раствора НCl.

ХОД РАБОТЫ: берут 4 пробирки и подготавливают их следующим образом.

В пробирку №1 наливают 2 мл желудочного сока и добавляют 0, 5 мл куриного белка.

В пробирку №2 наливают 2 мл желудочного сока, кипятят его, охлаждают и добавляют 0, 5 мл куриного белка.

В пробирку №3 наливают 2 мл желудочного сока, нейтрализуют его содой (2 мл 2%-го раствора соды) и добавляют 0, 5 мл куриного белка.

В пробирку №4 наливают 2 мл 0, 25%-го раствора НCl и добавляют 0, 5 мл куриного белка.

Все пробирки помещают в водяную баню 38-40⁰С на 30-40 минут. По истечении этого времени пробирки вынимают, охлаждают под струей воды и проводят реакцию с содержимым на наличие в них продуктов гидролиза белка, поставив биуретовую реакцию.

Для этого в каждую опытную пробирку добавляют по 1 мл 10%-го раствора NaOH и 4-5 капель 1%-го раствора сернокислой меди, взбалтывают. При наличии белка появляется сине-фиолетовое окрашивание, при наличии смеси пептидов – розово-фиолетовое или розовое (разных оттенков), в зависимости от степени гидролиза белка.

В пробирке №1 жидкость окрасится в фиолетово-розовый или розовый цвет. В пробирках №2, №3 и №4 жидкость приобретает фиолетово-синюю окраску, что свидетельствует о нерасщеплении белка.

Сделать выводы о наличии протеолитических ферментов в желудочном соке и условиях ферментативного расщепления

Тема

Пищеварение у жвачных

Опыт 1. Запись движения рубца у овцы (руменограмма)

ЦЕЛЬ ОПЫТА: изучить моторную деятельность рубца жвачных животных до и после приема корма баллонографическим методом.

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: овца с фистулой рубца, резиновый баллончик, кимограф, капсула Марея, станок для фиксации, 100гр хлеба или картофеля.

ХОД РАБОТЫ. Животное ставят в станок и фиксируют. В рубец через фистулу вводят резиновый баллончик, соединенный резиновой трубкой с капсулой Марея. Всю систему (баллончик, резиновые трубки и капсулу Марея) заполняют воздухом. Перо капсулы Марея присоединяют к закопченной ленте кимографа и в течение 5-10 мин записывают руменограмму в состоянии покоя животного, во время жвачки и при даче 100 г хлеба или сочного корма. Угнетение моторики наблюдается при нанесении болевого раздражения. Записать руменограмму и выводы.

Пищеварение в кишечнике

Опыт 1. Протеолитическая активность панкреатического сока

ЦЕЛЬ ОПЫТА: освоить методику определения протеолитической активности панкреатического сока.

ХОД РАБОТЫ. Нумеруют 3 пробирки и наливают: в пробирку № 1 - 2 мл панкреатического сока и добавляют 1 мл молока. В пробирку № 2 - 2 мл панкреатического сока, кипятят его 1.5-2 минуты, охлаждают и добавляют 1 мл молока. В пробирку № 3 - 2 мл панкреатического сока, подкисляют его 2, 5 мл 0, 5%-го раствора НCl и добавляют 1 мл молока.

Все пробирки помещают на 30-40 минут в термостат или водяную баню при температуре 38-40⁰ С. По истечении этого времени пробирки извлекают, охлаждают под струей водопроводной воды и проводят реакцию с содержимым на наличие в них продуктов гидролиза. О наличии продуктов гидролиза белка можно судить по биуретовой реакции.

Биуретовая реакция: В пробирки добавляют по 1 мл 10%-го раствора NaOH и 4-5 капель 1%-го раствора сернокислой меди. Розово-фиолетовое окрашивание в 1-й пробирке указывает на наличие пептонов, фиолетово-синее окрашивание во 2-й и 3-й пробирках – белок не расщепился.

Сделать выводы о наличии протеолитических ферментов в панкреатическом соке и условиях ферментативного расщепления.

Схема опыта

№ пробирки	Смешиваемые реагенты	Качественная реакция	Полученный результат	Вывод
	2 мл панкр. сока + 1 мл молока	биуретовая: 1 мл 10% NaOH и 4-5 капель 1% CuSO₄
	2 мл панкр. сока (кипятить) + 1 мл молока	биуретовая: 1 мл 10% NaOH и 4-5 капель 1% CuSO₄
	2 мл панкр. сока + 2, 5 мл 0, 5% НCl + 1 мл молока	биуретовая: 1 мл 10% NaOH и 4-5 капель 1% CuSO₄
	2 мл панкр. сока + 2 мл 1% варен. крахмала	2 капли раствора Люголя
	2 мл панкр. сока (кипятить) + 2 мл 1% варен. крахмала	2 капли раствора Люголя
	2 мл панкр. сока + 2 мл 1% взвеси сырого крахмала	2 капли раствора Люголя
	2 мл панкр. сока + 0, 5 мл желчи + 1, 5 мл раст. масла	3 капли фенолфталеина и титрование 0, 1Н NaOH
	2 мл панкр. сока + 1, 5 мл раст. масла	3 капли фенолфталеина и титрование 0, 1Н NaOH

Тема

Функции печени

Обмен веществ

Мочеотделение

Интерпретация результатов

На рисунке 2 представлена типичная кривая изменений сопротивления слизи во влагалище животного во время полового цикла и на нем обозначено момент наступления течки.

Если животное находится в периоде после течки, то наблюдается высокий уровень сопротивления. По мере приближения к высшей фазе течки сопротивление уменьшается и во время течки достигает минимального показателя, после чего снова возрастает до высокого уровня и остается на этом уровне до момента наступления следующей течки, когда сопротивление снова уменьшается. На практике, производя измерения, очень важно уловить минимальный уровень сопротивления и потом момент видимого роста результатов, поэтому во время течки измерения следует производить с соответствующей частотой.


Рис. 2	Рис. 3

На рисунке 3 представлена кривая изменений сопротивления в случае проведения успешной случки или осеменения. В этом случае величина сопротивления после окончания течки держится на высоком уровне до родов.

На рисунке 4 представлены графики измерений сопротивления влагалищной слизи у самок различных видов сельскохозяйственных животных.

Тема

Физиология лактации

Опыт 1. Парабиоз у мышей

ЦЕЛЬ ОПЫТА. Изучить стадии парабиоза у мышей при развитии наркотического сна.

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: мыши, хлороформ, вата, пинцеты, большая стеклянная воронка, дощечка под воронку, препаровальная игла, стеклянная емкость с плотной крышкой..

ХОД РАБОТЫ: Переворачиваем стеклянную воронку и кладем ее на дощечку. Берем мышь и помещаем ее под воронку. Наблюдаем за ее поведением. Мышь активна, она постоянно движется. Затем приподнимаем воронку и наносим раздражение препаровальной иглой на одну из лапок. Отмечаем ответную реакцию в виде беспокойства и отдергивания лапы. Потом воронку вверху закрываем ватным тампоном. Под воронку помещаем ватку, смоченную хлороформом, и отмечаем время начала опыта. Наблюдаем за поведением мыши и фиксируем все изменения в тетради. Под действием хлороформа у мыши очень быстро развивается наркотический сон (примерно 2 минуты). При этом отмечаются все стадии парабиоза. Сначала снижается двигательная активность, походка становится шаткой, мышь падает на бок и засыпает, т.к. развивается стадия торможения. В тетради отмечаем время, когда у мыши развивается третья стадия парабиоза. Подтверждением этой стадии является отсутствие реакции на укол иглой.

Затем ватку с хлороформом убираем в стеклянную емкость с плотной крышкой, также вынимаем тампон из самой воронки и наблюдаем за мышью. Снова учитываем время опыта. После прекращения действия хлороформа состояние мыши постепенно нормализуется. Это связано с восстановлением лабильности нервной системы и обратным развитием стадий парабиоза. Периодически наносим раздражение препаровальной иглой и отмечаем силу ответной реакции. Наблюдаемые изменения фиксируем в тетради. Когда мышь будет адекватно реагировать на раздражение, и ее двигательная активность восстановится, опыт прекращаем.

Тема

Опыт 2. Рефлекс отряхивания

ДЛЯ ОПЫТА НЕОБХОДИМО: собака или овца, станок для фиксации мелких животных, кисточка.

ХОД РАБОТЫ: животное фиксируют в станке. Когда животное успокоится, производят легкое касание кисточкой одной из ушных раковин. Наблюдают ответную реакцию на раздражение в виде отряхивания или почесывания. Анализируют рефлекторную дугу рефлекса.

Опыт 3. Рефлекс холки.

ДЛЯ ОПЫТА НЕОБХОДИМО: собака или овца, станок для фиксации мелких животных, препаровальная игла.

ХОД РАБОТЫ: животное фиксируют в станке. Когда животное успокоится, производят легкое касание ладонью шерсти или укол кожи в области холки. Наблюдают ответную реакцию на раздражение в виде сокращения подкожных мышц и вздрагивания кожи. Анализируют рефлекторную дугу рефлекса.

Опыт 4. Коленный рефлекс

ДЛЯ ОПЫТА НЕОБХОДИМО: собака или овца, станок для фиксации мелких животных, перкуссионный молоточек.

ХОД РАБОТЫ: животное фиксируют в станке. Когда животное успокоится, производят легкий удар по коленной чашечке. Наблюдают ответную реакцию на раздражение в виде разгибания голени. Анализируют рефлекторную дугу рефлекса.

ОПЫТ

Физиология анализаторов

Слюноотделение на различные раздражители.

12 3 4 5 Следующая ⇒