Определение аскорбиновой кислоты во фруктовых соках

С применением реактива Фолина

Определение аскорбиновой кислоты (витамина С) является примером анализа окрашенного продукта, образующегося в результате окислительно-восстановительной реакции. Методика основана на применении фосфорно-молибденового реактива Фолина, который при взаимодействии с аскорбиновой кислотой восстанавливается до молибденовой сини, интенсивность окраски зависит от концентрации восстановителя.

Цель работы – овладеть приемами фотометрического определения аскорбиновой кислоты во фруктовых соках с применением реактива Фолина.

Необходимые реактивы и оборудование

1) Реактив Фолина: в мерную колбу вместимостью 250 см³помещают 100 см³ серной кислоты, 1, 03 г молибдата аммония и 0, 047 г гидрофосфата калия, доводят до метки серной кислотой и осторожно перемешивают.

2) Стандартный раствор аскорбиновой кислоты C₆H₈O₆: в мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0, 1 г аскорбиновой кислоты, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки, перемешивают; в 1 см³полученного раствора содержится 1 мг аскорбиновой кислоты.

3) Бюретка вместимостью 25 см³.

4) Мерные колбы вместимостью 100 и 250 см³ – по 1 шт.

5) Химические стаканы вместимостью 50 см³ – 8 шт.

6) Градуированные пипетки вместимостью 2 и 5 см³ – по 1 шт.

7) Пипетка Мора вместимостью 20 см³.

8) Мерный цилиндр вместимостью 100 см³.

9) Водяная баня.

10) Таймер.

11) Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, кюветы с толщиной светопоглощающего слоя 1 см.

12) Анализируемый сок без мякоти (виноградный, березовый, яблочный, ананасовый).

Ход определения

В 7 химических стаканов отбирают по 5 см³реактива Фолина и последовательно доводят 0; 1, 0; 1, 5; 2, 0; 2, 5; 3, 0 и 3, 5 мг аскорбиновой кислоты. В каждый стакан из бюретки добавляют дистиллированную воду до объема
25 см³, перемешивают. Получают серию растворов, содержащих в 25 см³ соответственно 0; 1, 0; 1, 5; 2, 0; 2, 5; 3, 0; и 3, 5 мг аскорбиновой кислоты.

Стаканы помещают на кипящую водяную баню и кипятят 10 минут, затем охлаждают струей водопроводной воды. Оптическую плотность окрашенных в синий цвет растворов измеряют при длине волны 590 нм, контрольный раствор содержит все указанные реактивы, кроме аскорбиновой кислоты. По полученным данным строят градуировочный график в координатах: содержание аскорбиновой кислоты, q, мг/25 см³ – оптическая плотность раствора.

В химический стакан отбирают 20, 0 см³ анализируемого сока, содержащего около 1-2 мг аскорбиновой кислоты, добавляют 5 см³реактива Фолина, тщательно перемешивают, кипятят 10 минут на водяной бане, охлаждают струей водопроводной воды. Измеряют оптическую плотность раствора и по градуировочному графику находят содержание аскорбиновой кислоты, q, мг/20см³ сока.

Вычисления

Содержание аскорбиновой кислоты (Q, г/дм³) рассчитывают по формуле

Q = q ∙ 1000/ 20 ∙ 1000 = q/20,

где q – найденное по градуировочному графику содержание аскорбиновой кислоты, мг/20см³;

20 – объем анализируемого сока, см³.

Лабораторная работа 9

Определение кофеина в чае

Метод основан на получении хлороформного экстракта из чая и способности кофеина, содержащегося в экстракте, поглощать лучи в ультрафиолетовой области спектра (310 нм). Сопутствующие компоненты (танины, пигменты и др.) не мешают определению кофеина в чае.

Цель работы – овладеть приемами спектрофотометрического определения кофеина в чае разных сортов (краснодарский, индийский, цейлонский, грузинский и др.) на основе способности чая поглощать ультрафиолетовые лучи.

Необходимые реактивы и оборудование

1) Хлороформ.

2) Стандартный раствор кофеина: в мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг кофеина, растворяют в хлороформе, объем раствора доводят до метки этим растворителем и перемешивают; 1 мл приготовленного раствора содержит 1 мг кофеина.

3) Спектрофотометр и кюветы с толщиной поглощающего слоя 1 см.

4) Аналитические весы.

5) Воронка диаметром 5-7 см.

6) Складчатый фильтр.

7) Мерные колбы вместимостью 50 мл – 8 шт.

8) Колба с притертой пробкой вместимостью 50 мл.

9) Градуированные пипетки вместимостью 2 и 5 мл – по 1 шт.

10)Мерный цилиндр вместимостью 50 мл.

Ход определения

Для построения градуировочного графика в 5 мерных колб последовательно вводят 0, 0, 2; 0, 5; 1, 0 и 1, 5 мл стандартного раствора кофеина. В каждую колбу добавляют хлороформ до метки и перемешивают. Получают серию растворов, содержащих соответственно 0, 0, 2; 0, 5; 1, 0 и 1, 5 мг кофеина в 50 мл.

Оптическую плотность растворов измеряют при 272 нм, контроль – раствор с нулевой концентрацией кофеина. По полученным данным строят градуировочный график в координатах: содержание кофеина, q, мг/50 мл, –оптическая плотность раствора.

Пробу (1…1, 5 г) сухого чая помещают в колбу с притертой пробкой, приливают 30 мл хлороформа, каждые 2…3 мин перемешивают. Через 1 ч экстракцию заканчивают, экстракт помещают в мерную колбу. Чай промывают небольшими порциями хлороформа, которые присоединяют к экстракту в мерной колбе, добавляют хлороформ до метки и перемешивают.

Полученную жидкость фильтруют, 5 мл прозрачного фильтрата помещают в мерную колбу, разбавляют хлороформом до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность раствора в указанных выше условиях, контроль – чистый хлороформ. По градуировочному графику находят содержание кофеина во взятом объеме разбавленного экстракта (q, мг/5 мл экстракта).

Вычисления

Содержание кофеина в чае (Q, %) вычисляют по формуле

где q – найденное по градуировочному графику содержание кофеина в экстракте, мг/5 мл;

m – взятая для анализа проба чая, г.

Лабораторная работа 10

1 23	Поделиться: