Longitudinal Kinetics of Cytomegalovirus-Specific T-Cell Immunity and Viral Replication in Infants With Congenital Cytomegalovirus Infection

Продольные Кинетика Цитомегаловирус-Specific

Т-клеточного иммунитета и вирусной репликации у детей грудного возраста

С Врожденная цитомегаловирусная инфекция

 

Врожденные цитомегаловирус (ЦМВ), как сообщается, затронет до 1% от всех родившихся живыми в Соединенных Состояния. Т-клеточный иммунитет может иметь важное значение для контроля репликации ЦМВ при врожденных ЦМВ-инфицированных младенцев.

Мы описываем естественную историю CMV-специфических эволюция Т-клеток и  MVreplication у детей раннего возраста с врожденными

ЦМВ-инфекция.Методы. Цитомегаловирус вирусная нагрузка, ЦМВ посев мочи, и CMV-специфических CD4 и Т-клеточные ответы CD8 были оценены в проспективном продольной когорты из 51 детей с врожденной ЦМВ-инфекции, которые были наблюдается от рождения до 3-х лет. Результаты. Мы нашли кинетическую схему уменьшения репликации мочевого ЦМВ и увеличение CMV-специфических CD4 и ответы CD8 Т-клеток в течение первых 3 лет жизни. Мы также обнаружили более высокий CMV-специфических CD8 Т-клеток ответы были связаны с последующим восстановлением мочи ЦМВ вирусной нагрузки. Вывод. Для грудных детей с врожденной ЦМВ-инфекции, наши данные свидетельствуют о возрастной созреванию и

ЦМВ-специфических CD4 и CD8 Т-клеточного иммунитета, что связано с сокращением связанных с возрастом в мочевом CMV копирование.

 

Врожденные цитомегаловирус (ЦМВ), как сообщается, влияет на

до 1% от всех родившихся живыми в Соединенных Штатах. По оценкам

40% до 58% инфицированных новорожденных с симптоматическими презентаций

и 13,5% инфицированных новорожденных с бессимптомной

презентации будут страдать долгосрочные последствия, большинство

видное место потеря нейросенсорная-слуха (SNHL) [1].

Несвоевременное представление и ухудшение осложнений может также

происходят [2, 3]. Патогенез осложнений от врожденных

ЦМВ-инфекция не определена. Ведущая теория

что SNHL происходит из-за упорного хронической вирусной инфекции

[4-6], но иммунологические механизмы, ответственные за

контроль репликации ЦМВ после врожденной инфекции

до сих пор полностью не поняты.

В иммунодефицитом хостов, Т-клеточные ответы на

ЦМВ-видимому, важны для борьбы с вирусной репликации

и ограничение заболевания [7, 8]. Ограниченные предыдущие исследования врожденных

ЦМВ-инфекция позволяют предположить, что Т-клеточного иммунитета

Кроме того, важно для контроля репликации ЦМВ.

По сравнению с ответами на другие антигены, CD4 Т-клеток

Ответы на ЦМВ были нарушениями у детей с врожденной

ЦМВ-инфекция [9, 10], с нарушениями иногда

длится в течение многих лет [11]. Большинство этих детей по-прежнему

чтобы пролить CMV, а также в исследовании 1 в поперечном сечении, выше

ЦМВ-специфический клеточный иммунитет у детей старшего возраста

(? 37 месяцев) было связано с более низкой частотой ЦМВ

вирусурия [11]. Тем не менее, у детей с врожденной ЦМВ-инфекции,

продольная кинетика Т-клеточного иммунитета к

ЦМВ и его отношение к репликации ЦМВ не имеют

хорошо охарактеризован.

Мы описываем естественную историю циркулирующих

CMV-специфических Т-клеточного иммунитета и ЦМВ проливая у детей раннего возраста

с врожденной ЦМВ-инфекции. Эти врожденно

инфицированных детей были выявлены при рождении и наблюдается

первые 3 года жизни.

 

Популяция пациентов и Дизайн исследования

Младенцы были запланированы визиты на 4, 8, 12, 24 и 36 месяцев

возраста. Коллекция Моча была сделана попытка при каждом визите. Кровь

Коллекция была предпринята попытка на 4, 12 и 36-месячного возраста.

Пропущенные коллекции крови или мочи, в основном,

из-за пропущенных визитов; Кроме того, наблюдались поздно зачисленные младенцы

менее 3-х лет из-за конечного периода финансирования.

Для каждого младенца, среднее число проб мочи

Полученный 3,5 (диапазон, 1-6) и среднее число

Образцы крови, полученные составило 1,8 (диапазон, 0-3). Четыре симптоматическое

новорожденные, которые получали противовирусное лечение [13]

были исключены, поскольку ганцикловир может повлиять вирусный

нагрузки и потенциально иммунный ответ на ЦМВ. В

Всего мы проанализировали 178 мочи и 93 проб крови из

51 пациентов, 5 из которых были симптоматическое. Вирусная нагрузка и

CMV-специфические ответы CD4 и CD8 Т-клеток в 4 исключенные

у пациентов, получавших ганцикловир, показаны в

Дополнительный материал.

 

Кинетика цитомегаловирусной Мочевой вирусной нагрузки

В течение первых 3 лет жизни, дети с врожденными

ЦМВ-инфекция показали общее снижение в моче

CMVshedding, как измерено byCMVqPCR и культуры мочи.

На рисунке 1 показаны встроенные траектории мочи ЦМВ

вирусная нагрузка для каждого ребенка. Сразу после родов, новорожденные '

вирусная нагрузка сильно различались. Самые высокие значения наблюдались в

симптоматические младенцев. Вирусная нагрузка быстро снижается в течение

младенчество, а затем перешли на продолжение, но медленнее

снизить за счет раннего детства.

С нашей регрессионной модели, как уменьшение CMV

вирусной нагрузки с возрастом и вероятность ЦМВ мочевого

проливая с возрастом были статистически значимыми для среднего

Ребенок (Р <0,0001) (данные не показаны).

На рисунке 2, величина снижения вирусной ЦМВ

нагрузки и вероятности мочевого ЦМВ вирусовыделении

не пропорционально. В частности, снижение ЦМВ мочи

вирусная нагрузка совпала со скромным снижением вероятности

мочевого ЦМВ пролития от 0 до 1 лет.

В отличие от этого, от 1 до 2 лет, небольшое снижение

мочи вирусная нагрузка совпала с большим падением (примерно

85% -45%) в вероятности мочевого CMV

проливать.

 

 

Кинетика цитомегаловирусной-специфических CD4 и CD8 Т-клеток

В течение первых 3 лет жизни, детей с врожденной ЦМВ

инфекции показали постепенное и приблизительно линейное увеличение

в их CMV-специфические Т-клеточных реакций (рис 3A

и В). Это увеличение было статистически значимым для обоих

CMV-специфических CD4 и CMV-специфических CD8 Т-клетки

(P <0,0001). Склон с возрастом статистически не отличался

между ЦМВ-специфических CD4 и Т-клеточных реакций CD8

(P> 0,05). Среднее значение ЦМВ-специфических CD4 и частоты Т-клеток CD8

в возрастной группе от модели подогнанной регрессионной

приведены в таблице 1. Средний ребенка ЦМВ-специфического

CD8 Т-клеточный ответ был оценен выше, чем

его / ее CMV-специфический ответ CD4 Т-клеток, для каждого возраста

группа, но в целом разница в средствах во всех возрастов

не было статистически значимым по парным т (Р = .1098).

Из нашей модели, экстраполируемое CMV-специфических CD4

и ответы CD8 Т-клеток были положительными (? 0,1%) при рождении

[17] для среднего ребенка (CMV-специфических CD4 0,10%

(95% ДИ: 0,08, 0,11); CMV-специфических CD8 0,12% (95%

ДИ: 0,08, 0,15)

 

 

26. Sheetal Manicklal, The “Silent” Global Burden of Congenital Cytomegalovirus

"Silent" Глобальное Бремя врожденного цитомегаловируса

 

 

 

Suresh B. Boppana

 Saliva Polymerase-Chain-Reaction Assay for Cytomegalovirus

Screening in Newborns

Слюна полимеразной цепной реакции Анализ на цитомегаловирус

Скрининг в Новорожденные

 

Врожденный цитомегаловирус (ЦМВ) инфекция является важной причиной потеря слуха, и большинство детей с риском развития ЦМВ-ассоциированной потерей слуха не определены в начале жизнь из-за невозможности проверить на инфекции. Стандартный тест для скрининга новорожденных ЦМВ быстрая культура, проведенные на образцах слюны, полученных при рождении, но этот анализ не может быть автоматизирован. Две альтернативы - в режиме реального времени полимеразной цепной реакции (ПЦР) основе тестирование жидкой слюны или высушенной слюны образца, полученные при рождении - были разработаны.

Методы-В нашей проспективное многоцентровое исследование скрининга новорожденных, мы сравнили в реальном времени ПЦР анализы жидкой слюны и образцы высушенной слюны с быстрой культурой образцов слюны Полученный при рождении. РЕЗУЛЬТАТЫ В общей сложности 177 из 34989 детей (0,5%; 95% доверительный интервал [ДИ], от 0,4 до 0,6) были положительными на ЦМВ, по меньшей мере, одним из трех способов. Из 17,662 новорожденных

скринингу с использованием жидкой слюной ПЦР, 17569 были отрицательными для ЦМВ, и

Остальные 85 детей (0,5%; 95% ДИ от 0,4 до 0,6) имели положительные результаты по культуре, и в ПЦР Анализ. Чувствительность и специфичность жидкой слюной ПЦР были на 100% (95% ДИ 95,8 до100) и 99,9% (95% ДИ от 99,9 до 100), соответственно, и положительное и отрицательное прогностическое значения были 91,4% (95% ДИ 83,8 до 96,2) и 100% (95% ДИ от 99,9 до 100), соответственно. из17,327 новорожденные скринингу с помощью высушенной слюны ПЦР, 74 были положительными для ЦМВ, в то время как 76 (0,4%; 95% ДИ, от 0,3 до 0,5) были признаны ЦМВ-положительным на быстрой культуре. Чувствительность и специфичность высушенной слюны ПЦР были 97,4% (95% ДИ 90,8 до 99,7) и 99,9% (95% ДИ от 99,9 до 100), соответственно. Положительные и отрицательные прогностического значения 90,2% (95% ДИ 81,7 до 95,7) и 99,9% (95% ДИ от 99,9 до 100), соответственно. ВЫВОДЫ-ПЦР в реальном времени анализы обоих жидкостных и высушенной слюны образцов показали, высокая чувствительность и специфичность для выявления ЦМВ-инфекции и их следует рассматривать потенциал скрининг инструменты для ЦМВ у новорожденных. (Финансируемый Национальным институтом глухоты и другие Связь нарушений.)

 

 

За исследуемый период, были включены 34,989 детей. Среднее значение (± стандартное отклонение) возраст на момент

коллекция образцов слюны составила 1,0 ± 1,2 дней. Характеристики исследуемой популяции являются

приведены в таблице 1. Почти все младенцы (98,0%) были из хорошо детских яслей. медиана

возраст на момент сбора последующих образцов составляла 3,6 недели (межквартильный диапазон от 2,6 до

6.6). В целом, 177 новорожденных детей (0,5%; 95% доверительный интервал [ДИ], от 0,4 до 0,6) дали положительный результат

ЦМВ на скрининг с помощью быстрой культуры, ПЦР, или обоих. Нет связанных с исследованием

наблюдались побочные реакции.

 

Быстрая Культура и жидкостным Слюна ПЦР-Во время фазы 1, жидкостно-слюна

Образцы были собраны из 17,662 новорожденных и протестированы на ЦМВ с использованием быстрого

культура и жидкость-слюна ПЦР в реальном времени для анализа. В общей сложности 93 детей (0,5%; 95% ДИ от 0,4 до

0,6) дали положительный результат на CMV любым тестом (рис. 1). Все 85 детей с положительными результатами быстрого культивирования

Результат также был положительным жидкостно-слюну ПЦР и анализ ПЦР также выявили 8

дополнительные младенцы, как инфицированных, хотя их культура результаты были отрицательными (таблица 2).

Чувствительность жидкости слюна ПЦР в реальном времени анализа по сравнению со стандартной быстрой культурой было

100% (95% ДИ 95,8 до 100) (в расчете на 85 из 85 детей); специфичность составила 99,9% (95% ДИ,

99,9 до 100) (в расчете на 17569 из 17577 младенцев). Положительная и отрицательная прогностическая

Значения для ПЦР слюны были 91,4% (95% ДИ 83,8 до 96,2) и 100% (95% ДИ 99,9

до 100), соответственно (в расчете на 85 из 93 младенцев и 17569 из 17569 младенцев, соответственно).

Положительное отношение правдоподобия для жидкой слюной ПЦР был 2197 (95% ДИ, 1099

4393), а отрицательная вероятность того, соотношение составляло 0 (95% ДИ от 0,0 до 0,1). Из 93 новорожденных,

были положительными на скрининг, 79 (85%) были зачислены для наблюдения, из которых 72 проходят

положительно как на быстрой культуре и ПЦР, с 1 из 72 оказались отрицательными на

повторное тестирование с помощью быстрой культуры и ПЦР обоих слюне и моче образцов. из

на 8 детей, которые дали положительный результат на ПЦР только 7 были включены в последующей деятельности; из тех,

6 были получены отрицательные результаты для ЦМВ на повторное тестирование с помощью быстрой культуры и ПЦР

обоих слюне и моче образцов.

 

Наш большой, проспективное исследование скрининга ЦМВ у новорожденных показывает, что ПЦР в реальном времени

Анализ обоих жидкостных слюна и сушат-слюна образцов имеет высокую чувствительность (> 97%) и

специфичность (99,9%) по сравнению со стандартной слюна быстрой культуры. Это указывает на то, что

Слюна ПЦР, которые могут быть легко адаптированы для крупномасштабного скрининга новорожденных,

определит большинство детей, которые имеют врожденные инфекции ЦМВ.

Большинство детей с врожденной ЦМВ-инфекции не будут идентифицированы с помощью

клиническое обследование в течение периода новорожденности. Кроме того, нейросенсорная потеря слуха может,

развиваются после рождения и продолжать прогрессировать в раннем детстве в значительное

доля детей с ЦМВ-ассоциированной нейросенсорной слуха loss.1,6-8,29 Таким образом,

наличие быстрых и надежных диагностических методов, которые могут быть адаптированы для высокой пропускной способностью

Скрининг необходим для раннего выявления детей группы риска для ЦМВ-ассоциированной

нейросенсорная тугоухость. Тестирование высушенной крови выборочные образцы с использованием ПЦР на основе

методы оказались многообещающей стратегией для скрининга ЦМВ у новорожденных, т.к.

несколько предыдущих исследованиях сообщалось, что высушенное крови пятно ПЦР-анализ обладает высокой чувствительностью в

идентифицирующие детей с врожденной ЦМВ infection.15,20,21,30

Тем не менее, результаты нашего недавнего многоцентрового исследования, сравнивающие высушенной крови пятно в режиме реального времени

ПЦР со слюной быстрой культуры в более чем 20000 младенцев показало, что высушенное bloodspot

ПЦР идентифицировали менее 40% от ЦМВ-инфицированных newborns.14 Кроме того,

производительность высох- крови пятна ПЦР было показано, зависит от устанавливаемой

 

 

28. Tiziana Lazzarotto,

⇐ Предыдущая13141516171819202122Следующая ⇒

Поделиться: