Real-Time PCR Assay Using Specimens on Filter Disks as a Template

For Detection of Cytomegalovirus in Urine

ПЦР в реальном времени анализа с использованием образцов на фильтровальные диски в качестве шаблона

для обнаружения цитомегаловируса в моче

Коэффициенты обнаруженного количества копий для ввода генома

количество копий при каждом разведении были усреднены, и результат

была определена как эффективность регистрации. эффективность регистрации

для образцов добавляют непосредственно и образцов применительно к дискам

были 25 и 11% ввода, соответственно. При обнаружении

предел для стандартной ДНК в качестве значения среза (5 копий / реакция

смесь), 50 CMV геномных копий на диске было достаточно, чтобы

генерируют позитивный сигнал.

Изучить практическую применимость анализа, 55 мочи

были собраны образцы из 34 новорожденных и младенцев. 8

образцов соответствовали шести врожденных случаях. Пять из

эти врожденно инфицированных субъектов были бессимптомными в

рождение. Их врожденные инфекции были идентифицированы обнаружением

ЦМВ-иммуноглобулина М и подтверждается

ПЦР с использованием сушеные пуповины (15). Сбор и использование

 

 

Преимущества фильтра на основе ПЦР в реальном времени, как были

следующим образом: (I) минимальная обработка образца; (II) не жидких образцов

фаза перед тем ПЦР, который исключает возможность для

загрязнение ПЦР; и (III), чувствительный и количественный мера

 

мерения. Стабильность ДНК в фильтрах было продемонстрировано

ранее (21). Стоимость анализа, в том числе затраты на

фильтры, реагенты и расходные материалы и заработная плата техник,

составил? $ 8 за образец. В сочетании с сбора мочи

от подгузников, наш фильтр на основе анализа может быть наиболее подходящим для

Программы скрининга для ЦМВ инфекций у новорожденных. Потому как

небольшие объемы проб на фильтре дисков может ввести неожиданные

ошибки в клинических условиях, пилот скрининга программы для

проверить производительность анализа идет полным ходом.

 

Noorbakhsh Samileh

Role of cytomegalovirus in sensorineural

Hearing loss of children: A case—control

Study

Роль цитомегаловируса в нейросенсорной

потеря слуха детей: случай-контроль

 

Врожденная ЦМВ является наиболее распространенной причиной ненаследственных нейросенсорной

потеря слуха у детей. Более 40% случаев глухота с неизвестным

причиной обусловлены врожденной ЦМВ. Когда ЦМВ-инфекция диагностирована в первый год

жизнь, лечение с ганцикловир рекомендуется и связано с уменьшением

появление SNHL. Предыдущие исследования показали в Тегеране врожденной ЦМВ-инфекции

разработана в 2,6% новорожденных.

Цель: определить роль цитомегаловируса в нейросенсорной потери слуха

у детей путем сравнения антител CMV количественно между SNHL и

управления.

Методы и материалы: Это исследование случай-контроль было сделано в ЛОР-кафедры

Хазрат Акрам больницы Расул в Тегеране (2002-2003). Это исследование было проведено

на основе диагностических параметров (критериев AAO) для SNHL и здорового контроля. Мы

Сравнивали специфические цитомегаловирус антитела (IgM и IgG измеряли с помощью ELISA

метод) в 95 образцах крови новорожденных с SNHL (средний возраст = 35? 30 месяцев) и

63 здоровых младенцев совпадающая (средний возраст = 38,7? 27,3 месяцев) в качестве контрольной группы. 59,6% от

случаи были мужского пола; 40,4% составляли женщины. Острый и предыдущий иммунитет к цитомегаловируса

(IgM и IgG) был обнаружен в 34,7% и 72,6% от SNHL детей, острая инфекция

обнаружены в 3,5% в контрольной группе, предыдущий иммунитет (IgG) обнаружены в 94,7% из них.

Острая инфекция ЦМВ была выше в случаях (P-значение = 0,000), но предыдущий иммунитет

(CMV-IgG) был выше в контрольной группе (P-значение = 0,001). Средний возраст больных с острым

 

 

Согласно исследованию Ohlms соавт., В 38.75% от дети с SNHL этиологическим фактором оставался неизвестно. В 7,5% случаев односторонняя глухота были диагностируется случайно, чаще всего между 7-м и 10-й год возраста [1,2].

Ни дети, ни их родители могут точно определить время его появления, особенно

когда она не сопровождается другими симптомами, такими как головокружение или шум в ушах [1,2]. Врожденная ЦМВ является одной из распространенных причин themost

врожденных инфекций в развитых странах с сообщали о случаях колеблется от 0,15% и

2,0% с более высокими показателями в популяциях с более низкий уровень жизни [3-7].

Последствия врожденной инфекции CMV может варьироваться

от врожденного синдрома бессимптомному курс. Младенцы, которые являются бессимптомными при рождении могут по-прежнему присутствуют недостатки в более позднем возрасте [3,4]. В

приблизительно 5% младенцев CMV становится клинически проявляется с повреждением многих органов, включая печень, селезенка, головной мозг, глаза, и внутреннее ухо [5,6,7]. Наиболее младенцы, которые заражены врожденным ЦМВ являются бессимптомно при рождении. Многие исследования показывают, что врожденные инфекции ЦМВ

имеет более соответствующую роль в этиологии SNHL чем сообщалось ранее. Более 40% от глухоты случаи с неизвестной причиной, нуждающихся в реабилитации,

вызваны врожденной CMV [6,7]. Процент врожденных случаев ЦМВ в одиночку

по-видимому, объяснить все случаи ранее приписаны всех врожденных инфекций. Сенсоневральная потеря слуха (SNHL) встречается в большинстве из клинически пострадавших детей и составляет около 4000 случаев глухоты ежегодно в Соединенные штаты. Эта потеря слуха является симметричным и может быть прогрессирующее [7].

 

Detection of antibody or virus in urine

after the first year of life is of no use as most

children develop immunity to the virus [8,9].

 

Диагноз врожденной ЦМВ путем обнаружения ЦМВ

в моче [9]. Обнаружение IgM антител в крови

[8,9] или perilymphatic жидкости [4,10].

Диагноз перинатального заражения ЦМВ

трудно, но документально лучше всего отрицательным ЦМВ

вирусная культура и уровень антител CMV-IgM при рождении,

положительная вирусная культура и CMV-IgM антитела в 8-16

недельного возраста антитела и сохранения CMV-IgG

антитело. Обнаружение антител или вируса в моче

после того, как первый год жизни не имеет смысла, так как большинство

дети развивают иммунитет к вирусу [8,9]. Послеродовая первичная инфекция ЦМВ диагностируется наличие CMV-IgG сероконверсии ЦМВ-IgM антитела

и выделение вируса в шалфей, мочи и других телесные жидкости [4,8,10].

Лечение детей с врожденной цитомегаловирусной инфекция с ганцикловир рекомендуется

[11,9]. Предыдущие исследования в Тегеране [12,13] показали, врожденная ЦМВ-инфекция разработана в 2,6% новорожденных. Также ЦМВ является наиболее распространенной причиной TORCH в '' TORCH-заподозрили детей менее 1 года '' [12]. Из-за значительной роли врожденной ЦМВ-инфекции в этиологии SNHL, мы решили изучить Роль ЦМВ в глухих детей (<10у).

Главная цель: Определить роль цитомегаловируса в нейросенсорной потери слуха у детей по

сравнивая антитела ЦМВ количественно между SNHL и управления.

 

 

Это исследование случай-контроль был проведен в ЛОР

Департамент Хазрат Расула больницы в Тегеране

(2002-2003 годы). Наша учебная группа состоит из 95 детей с SNHL

и 63 детей, оставшихся без SNHL в качестве контроля (здоровое группа). Возраст детей во всех случаях и контроля были меньше, чем 14 лет. были основаны диагностические параметры для SNHL на ААО (Американской академии отоларингологии)

 

: Все случаи с '' Известной этиологии

для SNHL '' (генетические, радиации, наркотиков,... отбрасывается.

мы изучали только '' случаи SNHL с неизвестными

Этиология ''.

Наши средства управления включают в себя детей, которые были госпитализированы

на выборные общей хирургии в целом хирургическом отделении (аппендицит, грыжа и т.д.). Эти

дети же возраста с нашей SNHL группой.

Они прошли соответствующую

была выполнена с морозильной камерой до серологического обследования.

Центрифугированный образцы крови были тестированы

с использованием анализа на цитомегаловирус-специфического IgM и

IgG антитела.

 

Возрастной диапазон случаев (п = 81, отсутствует = 14) было

2-168 месяцев, среднее значение = 35? 30 месяцев

 

Возрастной диапазон управления (п = 63, отсутствует = 9)

был 2-106 месяцев, среднее значение = 38,7? 27,3 месяцев

(Гистограмма? 2).

Серологические результаты: Серологические результаты в тех случаях,

обнаружена острая инфекция (ЦМВ-IgM) в 34,7% (33 /95), предыдущий иммунитет (IgG) в 72,6% (69/95) из их. Серологические результаты у детей контрольных обнаружено

острая инфекция (ЦМВ-IgM) в 3,5% (2/57), предыдущая иммунитета (CMV-IgG) в 94,7% (54/57) из них.

Острая инфекция ЦМВ была выше в случаях (p-значение = 0,000), но предыдущий иммунитет (CMV-IgG) был выше в контрольной группе (Р-значение = 0,001). Средний возраст больных с острой инфекцией (ЦМВ-IgM) было 40 месяцев. Средний возраст детей с предыдущими

иммунитета (CMV-IgG) было 35 месяцев в случаях SNHL и 40 месяцев в контрольной группе (рис. 2).

 

ЦМВ-инфекция является одной из наиболее распространенных причин SNHL у детей признались в нашей третичной направления больница. Мы, предпочитаем по крайней мере в нашей стране, чтобы рассмотреть серопозитивных (CMV-IgM) SNHL детей (менее 1 год), как врожденной форме. Оба врожденные и приобретенные инфекции ЦМВ может вызывают прогрессирующую потерю слуха у детей. Мы не в состоянии дифференцировать врожденный

от приобретенной ЦМВ-инфекции только по серопозитивны (ЦМВ-IgM) приводит к SNHL детей после первого года жизнь. Поиск вируса CMV-ДНК с помощью более чувствительной

(ПЦР) в конечном органе кохлеарной имплантацией пациенты могут увеличить возможную роль ЦМВ инфекции в будущем. Большинство из этих врожденно инфицированных детей являются

бессимптомно при рождении. 10-17% этих детей может позже имеют односторонний или двусторонний глухоту (часто прогрессивная развертка). Продолжительные курс ганцикловира арестуют естественное развитие.

 

 

19. Paul D Griffiths Burden of disease associated with human cytomegalovirus

⇐ Предыдущая891011121314151617Следующая ⇒

Поделиться: